The violacein biosynthesis monitored by multi-wavelength fluorescence spectroscopy and by the PARAFAC methodResumo
A obtenção de informações sobre uma rota biossintética é um procedimento complexo e trabalhoso. Neste sentido, o presente trabalho apresenta uma nova abordagem para a análise inicial da biossíntese de produtos naturais fluorescentes usando a biossíntese da violaceína como exemplo. Para tanto, uma cultura da Chromobacterium violaceum foi inoculada em um biorreator de onde alíquotas eram retiradas a cada 2 h para posterior análise por espectroscopia de fluorescência 2D. As matrizes de emissão-excitação obtidas demonstraram o comportamento dinâmico dos sinais de fluoróforos que são consumidos e produzidos pela bactéria. Estes sinais foram resolvidos pelo método PARAFAC (análise paralela de fatores) perfazendo um total de seis espécies químicas. O triptofano e a violaceína foram identificados por comparação espectral. A identificação dos outros fluoróforos mostrou-se a etapa crítica devido à falta de banco de dados de produtos naturais fluorescentes para comparação. Por fim, esta metodologia apresenta um grande potencial para fornecer informações da biossíntese de produtos naturais.
