Paridade de Ochlerotatus scapularis em condições de laboratório e campo

Parity of Ochlerotatus scapularis in laboratory and field conditions

ARTIGOS ORIGINAIS

Paridade de Ochlerotatus scapularis em condições de laboratório e campo

Parity of Ochlerotatus scapularis in laboratory and field conditions

Juliana Telles de Deus^I; Iná Kakitani^II

^ISuperintendência de Controle de Endemias. Secretaria de Estado da Saúde de São Paulo. Marília, SP, Brasil

^IIDepartamento de Epidemiologia. Faculdade de Saúde Pública. Universidade de São Paulo. São Paulo, SP, Brasil

^{Correspondência | Correspondence}

RESUMO

OBJETIVO: Identificar o estado de paridade em fêmeas de Ochlerotatus scapularis de campo e obtidas em condições de laboratório.

MÉTODOS: Para obtenção das fêmeas de campo, foram realizadas coletas quinzenais no Vale do Ribeira utilizando-se a técnica da aspiração manual, de abril de 2003 a março de 2004. Em laboratório, 100 fêmeas (F1) de Ochlerotatus scapularis foram mantidas e observadas individualmente anotando-se o número de repastos realizados, duração do ciclo gonotrófico, tempo de sobrevivência e número de ovos colocados. A observação do estado de paridade e desenvolvimento ovariano foi feita pela dissecção dos ovários de 90 fêmeas por coleta, e de todas as fêmeas mantidas em laboratório.

RESULTADOS: Das 100 fêmeas mantidas em laboratório e dissecadas, o diagnóstico de condição de paridade conferiu com os resultados constatados em 55% dos casos, sendo subestimados em 37% e superestimados em 2%. Ainda em laboratório, de 106 ciclos gonotróficos completados, cerca de 55% das fêmeas necessitaram de mais de um repasto sangüíneo antes de ovipor. A sobrevivência observada em laboratório foi de até 26 dias para a espécie. Foram dissecadas 1.180 fêmeas de Ochlerotatus scapularis do campo: 418 (35,4%) foram consideradas nulíparas, 655 (55,5%) uníparas, 46 (3,9%) como bíparas e 61 (5,2%) não puderam ser avaliadas. Noventa fêmeas apresentavam-se na fase III-V de Christophers e Mer.

CONCLUSÕES: Pode-se confirmar a hipótese de discordância gonotrófica, com base nas observações de fêmeas de Ochlerotatus scapularis no campo e laboratório.

Descritores: Paridade. Ovário, crescimento e desenvolvimento. Ochlerotatus scapularis. Culicidae. Insetos vetores. Encefalite por arbovírus. Biologia do desenvolvimento.

ABSTRACT

OBJECTIVE: To identify the parity status of Ochlerotatus scapularis females in laboratory and field conditions.

METHODS: Field collections were carried out fortnightly using a hand-held aspirator in Vale do Ribeira, Southeastern Brazil, from April 2003 to March 2004. In laboratory, 100 Ochlerotatus scapularis F1 females were obtained and followed up individually, reporting the number of blood meals, the length of gonotrophic cycle, survival and number of eggs laid. The parity status and ovarian development were observed through ovarian dissection of 90 field females for each collection and all females reared in laboratory.

RESULTS: The parity status diagnoses of the 100 females reared in laboratory and dissected agreed with 55% of the oviposition data, and it was underestimated in 37% and overestimated in 2%. Also in the laboratory, 106 gonotrophic cycles were completed, around 55% of females needed more than one blood meal before laying eggs. In laboratory conditions the species survival was 26 days. A total of 1,180 field females of Ochlerotatus scapularis were dissected: 418 (35.4%) nulliparous, 655 (55.5%) uniparous, 46 (3.9%) biparous and 61 (5.2%) could not be evaluated. Ninety field females were found in Christophers and Mer's phase III-V.

CONCLUSIONS: The gonotrophic discordance hypothesis could be confirmed based on field and laboratory observations of Ochlerotarus scapularis females.

Keywords: Parity. Ovary, growth & development. Ochlerotatus scapularis. Culicidae. Insect vectors. Encephalitis, arbovirus. Developmental biology.

INTRODUÇÃO

A determinação da idade de fêmeas de insetos é um parâmetro importante para estimar o índice de mortalidade desta população, e alcança maior relevância em se tratando de insetos vetores de doenças. A longevidade das fêmeas de mosquitos é fator que influencia a sua eficácia epidemiológica; quanto maior sua idade fisiológica, maior é a oportunidade do mosquito entrar em contato com o agente infeccioso (Forattini^4,8 1962; 2002).

A composição etária é importante para a avaliação da capacidade vetora de culicídeos, pois está diretamente ligada à densidade, proporção de picadas, antropofilia e sobrevivência da população. A sobrevivência de culicídeos pode ser estimada por meio da determinação da paridade e dos ciclos gonotróficos desenvolvidos pelas fêmeas. Essas informações são importantes para se ter uma estimativa da oportunidade de contato com o agente etiológico (Klowden & Briegel¹⁶ 1994). Entende-se por ciclo gonotrófico o período que vai da procura pelo repasto sangüíneo até a oviposição (Forattini⁴ 1962).

A espécie Ochlerotatus scapularis está amplamente distribuída pelo continente americano, sendo mais freqüente na América do Sul (Consoli & Lourenço-de-Oliveira¹ 1994; Forattini⁸ 2002).

Forattini et al⁵ (1978) consideraram esta espécie importante epidemiologicamente, quando foi levantada a hipótese da participação desses mosquitos na transmissão domiciliar na epidemia de encefalite Rocio. A doença acometeu mais de mil pessoas na Região do Vale do Ribeira em 1975 e 1976 e houve uma centena de óbitos (Iversson¹³ 1989). Considerando o comportamento da população de Oc. scapularis na região epidêmica, e os resultados obtidos em infecção experimental, Forattini et al⁷ (1995) demonstraram a capacidade vetora desta espécie para o vírus Rocio.

Apesar do último caso clínico humano da doença ter ocorrido em 1976, Iversson et al¹⁴ (1989) sugerem que o vírus continua a circular entre os habitantes da região. Esse dado foi confirmado em inquérito soroepidemiológico, publicado por Romano-Lieber & Iversson¹⁹ (2000), quando observou-se a presença de anticorpos para este e outros arbovírus em moradores de reserva ecológica no Vale do Ribeira.

Oc. scapularis também foi incriminado como vetor de Wuchereria bancrofti no Estado de Santa Catarina. É considerado vetor primário da Dirofilaria immitis no Sudeste do Brasil, já que foi encontrado naturalmente infectado em regiões do Estado do Rio de Janeiro (Lourenço-de-Oliveira & Deane¹⁸ 1995; Labarthe et al¹⁷ 1998).

O presente trabalho teve como objetivo identificar o estado de paridade em fêmeas de Oc. scapularis obtidas em campo e em condições de laboratório. Especificamente nesta última parte objetivou-se verificar a ocorrência ou não da concordância gonotrófica na espécie, assim como avaliar a sobrevivência dessas fêmeas.

MÉTODOS

Três municípios foram selecionados para o estudo: Cananéia, Ilha Comprida (Boqueirão Norte), e Pariquera-Açu, localizados no Vale do Ribeira, área com cerca de 17.000 km² que se situa entre 24º e 25º16'S, e 46º50' e 49º20'W. Esses municípios são litorâneos, com altitudes que variam de dois a 40 metros. O clima da região é tropical superúmido com temperaturas médias entre 18ºC e 25ºC e precipitação anual de 1.800 mm atingindo 2.000 mm a 3.000 mm na zona de escarpa da serra. Possui formação florestal latifoliada tropical úmida na encosta, e floresta perenifólia latifoliada higrófila costeira (Forattini et al⁵ 1978).

De acordo com os dados da Fundação Sistema Estadual de Análise de Dados SEADE (2004),^* a população de Pariquera-Açu em 2004 era de 19.498 habitantes com 70,0% de taxa de urbanização, numa área de 370 km². No município de Ilha Comprida, a população registrada foi de 8.017 habitantes, com taxa de urbanização de 100% e a área de 182 km². Em Cananéia, naquele mesmo ano, foi estimada a população de 13.606 habitantes, 84,8% de taxa de urbanização e área de 1.272 km².

As três localidades apresentam acentuada alteração do ambiente primitivo com casas situadas em locais abertos e próximos a matas residuais.

Em cada localidade, foram selecionados três pontos de coleta no peridomicílio, caracterizado por terrenos propícios à formação de poças, criadouros para as formas imaturas de Oc. scapularis e outras espécies. De tamanhos variados e rodeados por gramíneas, esses criadouros são chamados de temporários, pois se formam em depressões no solo após a ocorrência de chuvas (Forattini⁸ 2002).

As capturas dos culicídeos adultos foram realizadas quinzenalmente das 17:00 às 20:00 horas baseando-se no comportamento da espécie, que apesar de apresentar hábito diurno, possui picos de atividade hematofágica durante e logo após o crepúsculo vespertino (Forattini et al⁶ 1981; Kakitani et al¹⁵ 2003). A técnica utilizada foi a da aspiração manual com aspiradores movidos à pilha (Service²⁰ 1993; Kakitani et al¹⁵ 2003).

Em cada ponto, um coletor separava todo material em três gaiolas, uma para cada hora de coleta. Em laboratório foi feita a triagem dos mosquitos, separando-se até dez fêmeas de Oc. scapularis por gaiola. A separação das fêmeas foi feita de forma aleatória, visando a constituir amostragem não probabilística que representasse cada localidade de coleta.

Esse processo foi feito com base na observação das características morfológicas da espécie,⁸ com os culicídeos vivos.

Fêmeas de Oc. scapularis capturadas no município de Cananéia foram mantidas em gaiolas dentro de estufa à temperatura de 26ºC a 28ºC com umidade relativa (UR) de 80%. A partir destas, para obtenção de fêmeas F1, recolheu-se os ovos que ficaram armazenados na placa de gesso até o momento de serem colocados em recipiente plástico para a eclosão, onde foi adicionado água destilada com cloreto de sódio e alimento para peixe. O desenvolvimento dos imaturos foi acompanhado diariamente e as pupas foram separadas em gaiolas, identificadas segundo a origem dos ovos e idade das pupas. Nas gaiolas havia oferta de alimento à base de solução de água e açúcar a 10% através de um chumaço de algodão envolto por gaze.

Individualmente, as fêmeas foram isoladas em frascos de Borrel dois dias após terem emergido. Os recipientes com as fêmeas foram etiquetados, enumerados e a elas foi ofertada fonte de sangue para o repasto. As anotações foram feitas diariamente com as seguintes considerações: data de emergência do adulto, data de cada repasto ou a recusa por ele, data de oviposição e morte.

Foi oferecido sangue diariamente, até que a fêmea realizasse o primeiro repasto. Após o qual, a oferta de sangue era feita em dias intercalados até a oviposição, a fim de evitar o estresse do mosquito. Logo após a oviposição, já era oferecido sangue para novo repasto e nos dias seguintes consecutivamente até que ela o aceitasse novamente.

Depois de cada oviposição, a fêmea era transferida para um novo frasco de Borrel, possibilitando a contagem do número de ovos colocados em cada ciclo. Procedeu-se assim com as 100 fêmeas de Oc. scapularis até a morte de cada uma, quando procedeu-se à dissecção para a observação dos folículos ovarianos.

Esses dados foram utilizados para dar embasamento à técnica escolhida, já que era conhecida toda a história reprodutiva das 100 fêmeas criadas.

Utilizou-se a técnica de Polovodova (Detinova³ 1962) para dissecção dos ovários e observação dos ovaríolos. Após a oviposição, o ovaríolo apresenta seu tubo folicular distendido com paredes frouxas, sendo então chamado de saco ovariolar. As Escolas Clássica e Nova discordam quanto à interpretação deste saco ovariolar.

Segundo premissa da Escola Clássica, originada por Polovodova (Charlwood et al² 1980), em poucas horas ou dias o saco ovariolar se contrai, formando uma dilatação folicular que permanece mesmo com posturas subseqüentes. Assim, de acordo com a interpretação desta Escola, contando-se o número de dilatações ocorridas num mesmo ovaríolo, chega-se ao número de ciclos ovarianos completados por aquela fêmea. Quando apenas uma dilatação é encontrada, considera-se a fêmea como unípara. Havendo duas dilatações, esta será bípara e assim por diante (Forattini⁸ 2002).

Para a Escola Nova, as dilatações só ocorrem quando a oogênese for abortiva, ou seja, a ovulação resulta somente na formação de um saco terminal. Para ser considerado como "ovaríolo diagnóstico", assim chamado por Fox & Brust¹⁰ (1994), o ovaríolo precisa cumprir oogêneses abortivas em cada ciclo. Portanto, se as oogêneses forem todas normais, o ovaríolo apresentará um saco ovariolar ou vestígio deste, e esta fêmea será considerada unípara, mesmo se tiver realizado múltiplas oviposições. Nesse caso, de acordo com a interpretação da Escola Clássica, isto significaria ausência de fêmeas multíparas na população, o que não corresponderia à realidade. Quanto mais ciclos normais a fêmea tiver realizado, menor a proporção de ovaríolos diagnósticos (que poderiam ser indicadores de ciclos gonotróficos) (Hoc & Charlwood¹² 1990; Fox & Brust¹⁰ 1994).

Os resultados obtidos em laboratório foram organizados em banco de dados, observando-se as percentagens e freqüências dos dados. Os dados de campo foram agrupados por mês para os três municípios, considerados em conjunto, como representantes do Vale do Ribeira.

RESULTADOS

Das 100 fêmeas de Oc. scapularis dissecadas, 39 foram consideradas nulíparas, 54 uníparas, uma bípara e seis sem condições de avaliação. Não foi encontrado nenhum exemplar multíparo (com mais de duas dilatações no pedicelo ovariolar).

Dentre as 39 fêmeas nulíparas, 32 estavam na fase III-V do desenvolvimento ovariolar de Christophers e Mer; das 54 uníparas, 17 estavam na fase III-V de Christophers e Mer.

Observou-se maior freqüência de oogênese normal, sendo que a oogênese abortiva foi constatada em uma bípara e em duas uníparas (que não ovipuseram) conforme mostra a Tabela 1.

Das 100 fêmeas, 26 não ovipuseram, 74 fizeram pelo menos uma oviposição e 21 ovispuseram mais de uma vez.

A média de ovos colocados na primeira oviposição foi de 75; na segunda e terceira foi de 64; entre as fêmeas que ovipuseram pela quarta vez, a média foi de 61 ovos.

A Tabela 2 mostra a média de ovos colocados por repasto sangüíneo. Com um repasto sangüíneo, as fêmeas de Oc. scapularis conseguiram colocar mais de 59 ovos em média, e até 101. A fêmea que necessitou realizar quatro repastos para uma oviposição apresentou baixa produção (três ovos).

Uma fêmea realizou cinco oviposições, necessitando de um repasto para cada postura. Por outro lado, outra fêmea se alimentou seis vezes antes da primeira oviposição.

A Tabela 3 apresenta o número e percentagem de repastos feitos pelas fêmeas para a realização de cada oviposição.

A duração do ciclo gonotrófico observado em laboratório foi de quatro dias para 37,7% das fêmeas e três dias para 23,6%. Uma pequena parte (2,7%) necessitou de mais de 10 dias para que o ciclo se completasse, chegando até o 15º dia (Figura).

Foram dissecadas 1.180 fêmeas de Ochlerotatus scapularis. Destas, 655 (55,5%) foram consideradas uníparas, 418 (35,4%) como nulíparas e 46 (3,9%) foram avaliadas como bíparas. Do total de dissecções realizadas, 61 (5,2%) não puderam ser avaliadas (Tabela 4).

DISCUSSÃO

Foi possível observar a veracidade dos preceitos da Escola Nova, pois havia sempre o saco ovariolar ou vestígio nos ovaríolos de oviposições bem-sucedidas, confirmado pela comparação com as fêmeas de idade conhecida. Para a Escola Clássica, a cada oviposição uma dilatação seria formada no pedicelo ovariolar, o que não ocorreu nas presentes observações. Houve uma fêmea que ovipôs cinco vezes e não apresentou dilatação em seu pedicelo.

Devido às limitações operacionais, apenas parte do material foi dissecada. Considerando a alta densidade da espécie em períodos pós-chuva, a amostra pode não ter sido representativa, dificultando análises estatísticas em relação à sazonalidade.

Das 100 fêmeas observadas em laboratório, 74% ovipuseram. No entanto, os resultados interpretados conforme preceitos da Escola Nova, mostravam que apenas 55% delas haviam parido. A explicação desta diferença decorre do fato de que 32 das fêmeas estavam na fase III-V do desenvolvimento ovariano. Nesta fase os ovaríolos se apresentam de tal forma que a identificação de dilatação ou saco ovariolar fica dificultada ou impedida. Portanto, entre as fêmeas que se mostravam na fase III-V havia nulíparas e uníparas, mas na ausência de vestígios de oviposição optou-se por diagnosticá-las como nulíparas.

Em relação às fêmeas do campo, os resultados da dissecção mostraram que 59,4% delas eram oníparas, ou seja, essas fêmeas realizaram no mínimo o segundo repasto sangüíneo.

Este dado também foi verificado em Anopheles marajoara por Kakitani et al,¹⁵ (2003) que mencionaram a importância desta informação associada à longevidade, parâmetro importante na estimativa da capacidade do vetor.

Foram observadas oogêneses abortivas em três fêmeas: uma delas apresentava uma dilatação e vestígio de saco ovariolar, tendo sido diagnosticada como bípara; nas outras duas somente a dilatação foi encontrada. Segundo Sokolova²¹ (1994), as oogêneses abortivas podem ser explicadas por vários fatores, dentre eles a abstinência de alimentação sangüínea complementar.

Observando a quantidade de repastos realizados para cada oviposição, pode-se notar que o número maior de repastos sangüíneos não significa número maior de ovos; ao contrário: a produção média de ovos foi maior em oviposições com um repasto sangüíneo.

Em relação ao número de ovos, segundo Foster⁹ (1995), a presença de açúcar na alimentação das fêmeas pode influenciar sua fecundidade. De acordo com Hien¹¹ (1976), a quantidade dos ovos colocados está associada a condições como: idade fisiológica, peso após emergência da fêmea e também do volume ingerido de sangue.

Os dados foram subestimados em 37% pois, de 53 fêmeas que haviam feito uma oviposição, 18 foram consideradas nulíparas e, de 21 que fizeram mais de uma oviposição, 19 foram diagnosticadas como uníparas. Para a primeira situação, a explicação reside no fato de essas fêmeas se encontrarem na fase III-V de Christophers e Mer, o que dificulta a visualização de saco ovariolar. Para o segundo caso, os dados podem ser explicados pela interpretação da Escola Nova, segundo a qual em oviposições subseqüentes, somente o vestígio da última será encontrado e a fêmea será dita unípara. Foram encontrados 2% de casos superestimados, onde as duas fêmeas encontradas tinham uma dilatação no pedicelo ovariolar indicando oogênese abortiva. Assim, estas fêmeas não colocaram ovos, mas realizaram repasto sangüíneo.

Observou-se em laboratório a realização de mais de um repasto para completar o ciclo gonotrófico. De 106 ciclos completados, cerca de 55% das fêmeas se alimentaram mais de uma vez antes de ovipor, chegando a realizar até seis repastos sangüíneos. O contrário não foi observado, ou seja, a ocorrência de mais de uma oviposição para um repasto sangüíneo. Foi observada uma provável anautogenia para a espécie, já que não foram encontrados ovaríolos em fase de desenvolvimento avançado de Christophers e Mer, sem alimentação prévia com sangue.

Foi observado que mais de 50% das fêmeas voltaram a se alimentar em dois dias (entre um repasto e outro), e que a duração do ciclo gonotrófico foi de quatro dias para a maior parte das fêmeas (37,7%), indicando possível discordância gonotrófica. O curto intervalo de tempo entre a realização dos repastos sangüíneos aumenta a oportunidade de contato com o hospedeiro, e este é um parâmetro importante discutido na capacidade vetora da espécie.

Verificou-se que 90 fêmeas de campo (7,6% do total dissecado), estavam na fase III-V do desenvolvimento ovariano de Christophers e Mer, o que indica que estavam em busca de mais um repasto sanguíneo para a oviposição, reforçando a hipótese de discordância gonotrófica. Menezes (2002)^** já havia levantado a hipótese de discordância gonotrófica para Oc. scapularis, quando encontrou fases avançadas de oogênese em fêmeas desta espécie repletas de sangue.

Foram contabilizadas até cinco oviposições. Considerando que a média observada para a conclusão de cada ciclo foi de quatro dias, a estimativa da idade seria de 20 dias aproximando-se da idade real observada em laboratório (26 dias).

Em laboratório era oferecido alimento sangüíneo em abundância às fêmeas, ou seja, elas não necessitaram sair em busca do hospedeiro sofrendo as intempéries. Assim, na maior parte das vezes as fêmeas se ingurgitaram completamente. Por outro lado, o confinamento pode ter causado estresse aos insetos, principalmente quando dentro de frasco de Borrel. Os mosquitos que estavam nas gaiolas sobreviveram por mais tempo (até 60 dias aproximadamente), mesmo sem a oferta de repastos sangüíneos.

Tais observações indicam que o método não é um bom indicador para o estudo da produção de ovos de culicídeos, já que os dados se apresentaram na sua maioria subestimados.

O estudo da paridade pode ser importante para a estimativa do contato vetor/hospedeiro. Os dados obtidos com a técnica da dissecção e interpretados pela Escola Nova são confiáveis, porém, nos casos subestimados, informações importantes poderiam também ser subestimadas, como o tempo de sobrevida. A eficácia do método pode ser plena quando associada a outros estudos.

AGRADECIMENTOS

Aos Professores Oswaldo Paulo Forattini, Délsio Natal da Faculdade de Saúde Pública da USP, e às doutoras Regiane Tirone de Menezes da Superintendência de Controle de Endemias e Helene Mariko Ueno, pelas sugestões.

Recebido: 29/9/2005

Revisado: 17/1/2006

Aprovado: 6/2/2006

Financiado pela Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (Fapesp - Projeto Temático n. 99/10517-1) e pelo Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq).

Baseado em dissertação de mestrado apresentada ao Departamento de Epidemiologia da Faculdade de Saúde Pública da USP, em 2005.

Referências bibliográficas

• 1. Consoli RAGB, Lourenço-de-Oliveira R. Principais mosquitos de importância sanitária no Brasil. Rio de Janeiro: Fiocruz; 1994.
• 2. Charlwood JD, Rafael JA, Wilkes TJ. Métodos de determinar a idade fisiológica em Diptera de importância médica. Uma revisão com especial referência aos vetores de doenças na América do Sul. Acta Amazônica 1980;10(2):311-33.
• 3. Detinova TS. Age grouping methods in Diptera of medical importance. Geneva: World Health Organization; 1962.
• 4. Forattini OP. Entomologia médica. São Paulo: EdUSP; 1962. v. 1.
• 5. Forattini OP, Gomes AC, Galati EAB, Rabello EX, Iversson LB. Estudos ecológicos sobre mosquitos Culicidae no Sistema Serra do Mar, Brasil: observações no ambiente domiciliar. Rev Saúde Pública. 1978;12(4):476-96.
• 6. Forattini OP, Gomes AC, Santos JLF, Galati EAB, Rabello EX, Natal D. Observações sobre atividade de mosquitos Culicidae, em mata residual no Vale do Ribeira, São Paulo, Brasil. Rev Saúde Pública. 1981;15(6):557-86.
• 7. Forattini OP, Kakitani I, Massad E, Marucci D. Studies on mosquitoes (Diptera: Culicidae) and anthropic environment: 9- Synanthropy and epidemiological vector role of Aedes scapularis in South-Eastern Brazil. Rev Saúde Pública 1995;29(3):199-207.
• 8. Forattini OP. Culicidologia médica. São Paulo: EdUSP; 2002. v. 2.
• 9. Foster WA. Mosquito sugar feeding and reproductive energetics. Ann Rev Entomol. 1995;40:443-74.
• 10. Fox AS, Brust RA. How do dilatations form in mosquito ovarioles. Parasitol Today. 1994;10(1):19-23.
• 11. Hien DS. Biology of Aedes aegypti (L., 1762) and Aedes albopictus (Skuse, 1895) Diptera, Culicidae: the gonotrophic cycle and oviposition. Acta Parasit Pol 1976;24(6):37-55.
• 12. Hoc TQ, Charlwood JD. Age determination of Aedes cantans using the ovarian oil injection technique. Med Vet Entomol. 1990;4:227-33.
• 13. Iversson LB. Rocio encephalitis. In: Monath TP, editor. The arboviruses: epidemiology and ecology. Boca Raton: CRC Press; 1989. v. 4. p. 77-92.
• 14. Iversson LB, Rosa APAT da, Rosa MDB. Ocorrência recente de infecção humana por arbovírus Rocio na região do Vale do Ribeira. Rev Inst Med Trop São Paulo 1989;31(1):28-31.
• 15. Kakitani I, Ueno HM, Forattini OP. Paridade e influência do vento sobre a freqüência de Anopheles marajoara, São Paulo. Rev Saúde Pública 2003;37(3):280-4.
• 16. Klowden MJ, Briegel H. Mosquito gonotrophic cycle and multiple feeding potential: contrasts between Anopheles and Aedes (Diptera: Culicidae). J Med Entomol. 1994;31(4):618-22.
• 17. Labarthe N, Serrão ML, Melo YF, Oliveira SJ de, Lourenço-de-Oliveira R. Potential vectors of Dirofilaria immitis (Leidy, 1856) in Itacoatiara, oceanic region of Niterói municipality, State of Rio de Janeiro, Brazil. Mem Inst Oswaldo Cruz 1998;93(4):425-32.
• 18. Lourenço-de-Oliveira R, Deane LM. Presumed Dirofilaria immitis infections in wild-caught Aedes taeniorhynchus and Aedes scapularis in Rio de Janeiro, Brazil. Mem Inst Oswaldo Cruz 1995;90(3):387-8.
• 19. Romano-Lieber NS, Iversson LB. Inquérito soroepidemiológico para pesquisa de infecções por arbovírus em moradores de reserva ecológica. Rev Saúde Pública. 2000;34(3):236-42.
• 20. Service MW. Mosquito ecology: field sampling methods. 2^nd ed. London: Elsevier Applied Science; 1993.
• 21. Sokolova MI. A redescription of the morphology of mosquito (Diptera: Culicidae) ovaríolos during vitellogenesis. Bull Soc Vector Ecol. 1994;19(1):53-68.

*

Fundação Sistema Estadual de Análise de Dados - SEADE. Informações municipais - perfil municipal. Disponível em:

http//:www.seade.gov.nr/perfil/index.html [acesso em 20 ago 2004]

**

Menezes RMT. Aspectos bioecológicos de

Culex quinquefasciatus e

Ochlerotatus scapularis, abrigados em habitats do Parque Ecológico do Tietê na cidade de São Paulo, SP [tese de Doutorado]. São Paulo: Faculdade de Saúde Pública da USP; 2002.

Datas de Publicação

• Publicação nesta coleção
  16 Ago 2006
• Data do Fascículo
  Jun 2006

Histórico

• Recebido
  29 Set 2005
• Revisado
  17 Jan 2006
• Aceito
  06 Fev 2006