Efeito da irradiação em carne de coelho congelada

Effect of the irradiation in meat of frozen rabbit

Efeito da irradiação em carne de coelho congelada

Effect of the irradiation in meat of frozen rabbit

Adriana Régia Marques de Souza^I; Valter Arthur^I; Solange Guidolin Canniatti-Brazaca^II,*; Meylene Aparecida Luzia Couto^II

^ILaboratório de radioentomologia e irradiação de alimentos, Centro de Energia Nuclear na Agricultura, Universidade de São Paulo – USP, CEP 13416-000 Piracicaba – SP, Brasil

^IIDepartamento Agroindústria, Alimentos e Nutrição, Escola Superior de Agricultura Luiz de Queiroz – ESALQ, Piracicaba – SP, Brasil, E-mail: [e-mail]

RESUMO

O crescimento nacional da produção de carne de coelhos necessita de maior conhecimento sobre características da carne, bem como o efeito de um processo que permita sua maior conservação. Os cortes congelados da carne de coelho: coxa, pernil e lombo, tratados com dois tipos de antibióticos, norfloxacina e ciprofloxacina, foram irradiados nas doses de 0, 3 e 6 kGy e determinados os teores de ferro heme e não heme dos cortes. As doses de irradiação empregadas foram influentes nos teores de ferro heme e não heme, sendo que a dose de 3 kGy foi a que apresentou os maiores valores, independente do tipo de antibiótico utilizado. Para o ferro heme o antibiótico norfloxacina apresentou os maiores valores e para o ferro não heme os maiores valores foram notados para o antibiótico ciprofloxacina.

Palavras-chave: irradiação; carne; coelho; ferro.

ABSTRACT

The growth in national production of rabbit meat demands greater knowledge of the characteristics of the meat, as well as the effects of a process that allows greater conservation of the meat. Frozen cuts of rabbit meat: thigh, ham and loin, treated with two types of antibiotics (norfloxacyn and ciprofloxacin), were irradiated in doses of 0, 3 and 6 kGy, and the levels of heme and nonheme iron in the cuts were determined. The irradiation doses employed were influential on the levels of heme and nonheme iron, and the dose of 3 kGy was the one that presented the largest values, independent of the type of antibiotic used. For heme iron, the antibiotic norfloxacyn presented the largest values and for nonheme iron the largest values were noted for the antibiotic ciprofloxacyn.

Keywords: irradiation, meat, rabbit, iron.

1 Introdução

A produção nacional de carne de coelho é baixa, quando comparada a outras carnes, e atende somente ao mercado interno. As regiões com predominância de descendente de europeus são as regiões de maior consumo desse tipo de carne. Possivelmente por causa disso, a qualidade da carne de coelho brasileira é pouco estudada se comparada com a carne de outros animais comerciais. Dessa forma, os critérios para a definição de uma carne de qualidade estão baseados nos atributos dados a outros tipos de carnes (FURUKAWA, 2002).

Estudos indicam que a carne de coelho possui altas quantidades de proteínas, e baixos níveis de sódio, gordura e colesterol, constituindo alimento benéfico para a dieta humana, se comparada com outros tipos de carnes (FERNÁNDEZ-ESPLÁ; O'NEILL, 1993; BADR, 2004). A carne é importante fonte de ferro, em especial porque fornece ferro heme que é absorvido independentemente de interações de outros componentes alimentares, o que não ocorre com o ferro não heme que sofre a influência de outras substâncias da dieta.

Os medicamentos veterinários vêm sendo usados nas criações comerciais para prevenir patologias ou mesmo para otimizar o crescimento dos animais além de atuarem como agentes terapêuticos (AERTS; HOGENBOOM; BRINKMAN, 1995). Um número elevado de quinolonas e fluoroquinolonas foi aprovado e disponibilizado comercialmente para uso em animais de produção (SILVA, 2004). Entre os medicamentos empregados, temos as fluoroquinolonas que apresentam um átomo de flúor na posição 6 (SAMANIDOU; CRISTODOULOU; PAPADOYANNIS, 2005), sendo a ciprofloxacina e a norfloxacina pertencentes ao segundo grupo, que possui grande atividade antimicrobiana contra a maioria das bactérias Gram-negativas e algumas Gram-positivas (AFSSA, 2000; MARTINEZ; MCDERMOTT; WALKER, 2006).

Devido às grandes distâncias entre as regiões de produção e consumo, a comercialização da carne de coelho pelas grandes redes de supermercado é feita através do oferecimento da carcaça congelada, com o objetivo de estender sua preservação (ZOTTE, 2002).

Uma alternativa para a preservação da carne de coelho é a irradiação. A irradiação é um método eficiente para aumentar a segurança (patógenos, parasitas), preservar alimentos, melhorar a qualidade (comparada a processos térmicos), manter e preservar os nutrientes contidos nos alimentos (NAM; AHN, 2002). Todos os nutrientes contidos na carne são importantes para a saúde humana, destacando-se os minerais ferro e zinco. Nas carnes, o ferro é encontrado na forma heme, de mais fácil absorção pelo organismo do que o ferro não heme (VALLE, 2000). As alterações provocadas pela irradiação podem aumentar ou diminuir a quantidade de ferro presente nas carnes. Com o objetivo de compreender o efeito de diferentes doses de irradiação, esta pesquisa avaliou a disponibilidade de ferro heme e não heme, colesterol, TBA e capacidade de retenção de água em diferentes cortes da carne de coelho que receberam dois diferentes antibióticos. A importância de dados sobre a influência de antibióticos em carnes é necessária visto que no mercado interno ainda há a liberação do uso de antibióticos em carnes e somente em carnes tipo exportação esse tipo de prática é proibida.

2 Material e métodos

2.1 Matéria-prima

A carne dos coelhos foi obtida de experimento conduzido no Centro de Energia Nuclear na Agricultura (CENA) para estudo do efeito de antibióticos na carne, na qual foram empregados os antibióticos norfloxacina e ciprofloxacina, que foram administrados em 5 doses (40 µg.Kg^–1), uma a cada 2 semanas, totalizando 10 semanas de tratamento. No início do experimento os animais tinham 2 meses de idade. Os cortes utilizados no estudo foram coxa, pernil e lombo de coelhos, sendo utilizadas 3 amostras de cada corte. Estes foram embalados a vácuo, congelados e irradiados nas doses de 0, 3 e 6 kGy, no irradiador Multipróposito no Instituto de Pesquisas Energéticas Nucleares (IPEN), com taxa de dose de 6 kGy.h^–1. As análises químicas foram realizadas no Laboratório de Nutrição Humana da Escola Superior de Agricultura "Luiz de Queiroz", ESALQ/USP. As amostras foram armazenadas congeladas à temperatura de –4 °C durante 6 meses. Foram utilizadas 3 amostras de cada corte para cada tratamento de irradiação e foram realizadas as análises em triplicata.

Todos os reagentes utilizados foram de grau analítico.

2.2 Análises Químicas

Ferro heme e ferro não heme

A determinação do ferro heme foi realizada utilizando-se o método descrito por Hornsey (1956), com algumas modificações. O método baseia-se na extração por acetona acidificada. As amostras da carne de coelho (5 g) foram colocadas em tubos de centrífuga de 50 mL, e foram adicionados 20 mL de acetona e de 0,5 mL de HCl. A seguir, adicionou-se água deionizada até que o volume total de água na amostra fosse equivalente a 4,5 g. Para a determinação da quantidade de água a ser adicionada, foi determinada a umidade do material segundo AOAC (1992). As amostras foram então centrifugadas (Centrífuga modelo TDL80-2B, marca Centribio) a 2000 g por 15 minutos e filtradas em papel de filtro qualitativo (Marca Schleicher & Chuell nº 1). A absorbância do filtrado foi medida a 640 nm e, em seguida, foi calculado o conteúdo de ferro heme através da Equação 1:

Para a determinação do ferro não heme, amostras de carne de frango (2 g) foram pesadas e adicionaram-se 15 mL de solução extratora composta pela mistura de 1:1 de ácido tricloroacético 40% e HCl 6N, segundo Torrence e Bothwell (1968). Foi adicionado nitrito de sódio a 1%, e então as amostras foram colocadas em banho de água quente (50 °C) por 18 horas, resfriadas e centrifugadas (Centrífuga modelo TDL80-2B, marca Centribio) a 2000 g por 10 minutos, sendo o sobrenadante filtrado e utilizado para a determinação do ferro não heme pelo método Ferrozine.

No método Ferrozine, segundo Stookey (1970) e Carter (1971), os filtrados obtidos acima receberam agente redutor a 1% (ácido ascórbico) e precipitante de proteínas (ácido tricloroacético 11%) e, a seguir, foram centrifugados a 1000 g por 10 minutos. Ao sobrenadante foi adicionado 1 mL de acetato de amônio 20%, seguido de 1 mL de reagente Ferrozine 1 mM. O reagente Ferrozine foi preparado da seguinte maneira: 5,14 g do reagente Ferrozine (marca Sigma) mais 100 g de cloridrato de hidroxilamina (marca Sigma) e 500 mL de ácido clorídrico, sendo o volume completado para 1 L com água deionizada. Essa mistura resultou no desenvolvimento de complexo colorido magenta, que foi determinado por absorbância a 562 nm em espectrofotômetro marca Beckman modelo DU640, em cubeta de vidro de 4,5 x 1,0 x 1,0 cm. A quantidade de ferro não heme nos cortes foi determinada através da Equação 2:

em que:

A_u = absorbância lida;

A_b = absorbância do branco; e

A_g = absorbância do padrão.

No método Ferrozine, é necessária a preparação de um branco (no qual não se utiliza a amostra) e de uma solução padrão (preparada com sulfato de ferro e amônia).

Capacidade de retenção de água

A capacidade de retenção de água (CRA) foi medida pela metodologia de centrifugação, descrita por Hoffmann, Hamm e Bluchel (1982). Foi pesado 1g de amostra no papel de filtro e inserido no tubo da centrífuga. Foi centrifugado por 4 minutos a 1500 Xg e pesado. A água restante após a centrifugação foi quantificada pela secagem da amostra a 70 °C por uma noite e a CRA, calculada de acordo com Equação 3:

Análise TBA

As análises de TBA foram realizadas segundo metodologia descrita por Kanattt, Chander e Sharma (2005): foram pesados 4 g de amostra e misturados a 16 mL de ácido tricloroacético (TCA) 5% e BHT (10 µg BHT.g^–1 de lipídio). A solução foi filtrada em papel de filtro. Foi acrescentado ao filtrado 0,02 M de TBA e foi aquecido em banho-maria a 45 °C por 30 minutos. Depois de frio, a leitura foi feita a 532 nm. Os valores de TBARS foram expressos em mg de malonaldeído por kg de carne.

Colesterol

Foi utilizada a metodologia de Bligh e Dyer (1959) para a extração de lipídios totais. A 2 g de amostra foram adicionados 10 mL de clorofórmio, 20 mL de metanol e 8 mL de água destilada e a solução foi agitada por 30 minutos. Foram adicionados novamente clorofórmio e sulfato de sódio (1,5%) e agitados. As camadas foram separadas, sendo desprezada a camada superior e filtrada a camada inferior. Para a leitura do teor de colesterol, foi usado o método colorimétrico segundo Bohac et al. (1988), com a adição de 10 mL de KOH (12%) a 3 mL da amostra, a qual foi levada para banho-maria a 80 °C por 15 minutos. Foram acrescentados 5 mL de água destilada resfriados em torneira, cloreto de ferro e deixados em repouso por 15 minutos. Realizou-se a leitura da absorbância em 490 nm e os resultados foram expressos em mg.100 g^–1.

2.3 Análise estatística

O delineamento estatístico utilizado foi inteiramente casualizado. Foi realizada a análise de variância pelo teste F, e a comparação das médias obtidas nos diferentes tratamentos foi analisada segundo teste de Tukey (p < 0,01) (PIMENTEL-GOMES, 1982), com utilização do programa Statistical Analysis System (SAS INSTITUTE, 1998), através da ferramenta ANOVA.

3 Resultados e discussão

3.1 Ferro heme

Os resultados obtidos nos experimentos encontram-se nas Tabelas 1 e 2 e indicam que tanto as doses de irradiação estudadas quanto os antibióticos empregados no experimento se mostraram influentes nos teores de ferro heme dos cortes de coelho (Tabela 1).

Os maiores valores de ferro heme foram obtidos para a dose de 3 kGy independente do tipo de antibiótico utilizado. O aumento nos valores de ferro heme na dose de 3 kGy (Tabela 1), para o corte de pernil e lombo, podem ser explicados pela perda de água (Tabela 2).

Quanto maior a perda de água no corte, menos concentrados ficam os teores de ferro, visto que pode haver perda do ferro junto com a água. Como a mioglobina e outras proteínas heme são proteínas sarcoplasmáticas e estão localizadas dentro das células, são solúveis em água. Sendo assim, estas proteínas podem, em parte, ser perdidas com a ocorrência de exsudação, ou seja, durante a perda de umidade ou suco da carne (SHIMOKOMAKI et al., 2006). Esse aumento na perda de água foi observado antes da análise de ferro heme, em que foi feita a análise de umidade dos cortes. Os antibióticos estudados também se mostraram influentes, a norfloxacina apresentou valores superiores ao ciprofloxacina, mostrando que antibióticos influenciam de forma diferente na qualidade da carne pois são diferentes. A ciprofloxacina possui um grupo ciclopropil na posição N-1, o que melhora sua atividade antimicrobiana e também altera o seu comportamento em relação à norfloxacina (MARTINEZ; MCDERMOTT; WALKER, 2006; ROYBAL et al. 2002).

Os teores de ferro heme (Tabela 1) foram afetados pelo tipo diferente de antibiótico utilizado; outros fatores afetam também esses teores. Segundo pesquisas realizadas por Estévez e Cava (2004), Schricker e Miller (1983), os teores de ferro heme tendem a decrescer com o armazenamento e o cozimento, e o efeito da irradiação nas características nutricionais das carnes não são diferentes dos observados para outros métodos de conservação.

3.2 Ferro não heme

Os valores de ferro não heme encontrados demonstraram que a irradiação na dose de 3 kGy foi a mais influente, apresentando os maiores valores (Tabela 3). O antibiótico que mais afetou os teores de ferro não heme foi a ciplofloxacina, que apresentou os maiores valores, quando comparados com os de norfloxacina, independente dos cortes estudados.

Segundo Estévez e Cava (2004), o aumento da quantidade de ferro não heme em carnes é considerado um reflexo da diminuição de ferro heme como consequência da quebra da molécula heme durante o cozimento ou estocagem. Como a radiação ionizante pode afetar quimicamente proteínas e alterar a valência de íons metálicos, pode influenciar a disponibilidade de ferro em alimentos. Esse fato pode ser observado quando comparados os diferentes antibióticos empregados no estudo, pois os maiores valores de ferro não heme foram encontrados para o antibiótico ciprofloxacina que apresentou os menores valores de ferro heme.

3.3 CRA

A capacidade de retenção de água está ligada à maciez da carne. Quanto maiores os valores de CRA, mas macio o corte será. Os valores de CRA para carne de coelho irradiada se encontram na Tabela 4, na qual é observada uma maior maciez para os cortes que empregaram como antibiótico a ciprofloxacina e na dose de 3 kGy.

Dependendo da dose, várias mudanças organolépticas podem alterar a carne irradiada. A textura e a capacidade de retenção de água são alteradas pela desnaturação das proteínas estruturais (LAWRIE, 1985). A dose de 3 kGy foi a que se mostrou mais influente tanto para a capacidade de retenção de água quanto para os teores de ferro heme, apresentando os maiores valores. Isso demonstra que essa dose é melhor para a manutenção da qualidade da carne de coelho.

3.4 TBA

A oxidação lipídica é um fator muito importante na qualidade de carnes. Uma maior oxidação leva à formação de odores desagradáveis, principalmente em carnes irradiadas. Os níveis de TBA medidos para a carne de coelho irradiada e tratada com diferentes antibióticos se encontram na Tabela 5.

Os maiores valores de oxidação foram observados para a dose de 0 kGy ou dose controle, indicando haver uma relação entre quantidade de ferro não heme e oxidação lipídica. Maiores valores de TBARS são notados quando se tem maiores valores de ferro não heme, visto que esse ferro é promotor de oxidações, sendo prejudicial à qualidade da carne.

3.5 Colesterol

Os níveis de colesterol são importantes para a decisão de compra de um consumidor. A Tabela 6 apresenta os valores de colesterol para os cortes da carne de coelho irradiadas e tratadas com antibióticos.

De acordo com os resultados encontrados, quanto maior a dose de irradiação aplicada aos cortes, menores os valores de colesterol encontrados. Isso está de acordo com Souza, Arthur e Canniatti-Brazaca (2007) que, trabalhando com carne de cordeiro, encontrou o mesmo comportamento e sugere que o colesterol é oxidado a outros tipos de gorduras.

4 Conclusões

A irradiação é um bom método para conservação da carne de coelhos, visto que ocorreu leve aumento nos teores de ferro heme, uma queda nos teores de colesterol e oxidação lipídica e ferro não heme. Os diferentes antibióticos da carne mostraram ter influência sobre a disponibilidade de ferro, tanto heme quanto não heme, e também sobre os demais aspectos analisados.

Recebido para publicação em 15/9/2007

Aceito para publicação em 15/4/2008 (002833)

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*

A quem a correspondência deve ser enviada

Datas de Publicação

• Publicação nesta coleção
  12 Fev 2010
• Data do Fascículo
  Mar 2010

Histórico

• Recebido
  15 Set 2007
• Aceito
  15 Abr 2008