CRESCIMENTO E TOLERÂNCIA DE MUDAS DE Enterolobium contortisiliquum Vell. CULTIVADAS EM SOLO CONTAMINADO COM ZINCO

GROWTH AND TOLERANCE OF Enterolobium contortisiliquum Vell. SEEDLINGS GROWN IN CONTAMINATED SOIL WITH ZINC

RESUMO

O zinco é um elemento essencial às plantas, mas quando presente em altas concentrações no solo pode se tornar tóxico ao metabolismo vegetal. O trabalho objetivou determinar o crescimento e tolerância de mudas de Enterolobium contortisiliquum Vell. cultivadas em solo contaminado com zinco. O experimento foi conduzido em casa de vegetação, em solo com 81% de argila, no delineamento inteiramente casualizado, com sete tratamentos, constituídos de doses de zinco (0, 100, 200, 300, 400, 500 e 600 mg kg^-1) e oito repetições. Avaliou-se a altura de planta, diâmetro de colo, massa seca aérea, massa seca radicular, comprimento da raiz principal, área superficial específica, teor de Zn na parte aérea e radicular, coeficiente do impacto do teor relativo de zinco, índice de translocação e de tolerância. O coeficiente do impacto do teor relativo de zinco indicou tendência de menor translocação de Zn à parte aérea da muda até a dose de 300 mg de Zn kg^-1 de solo. Os resultados evidenciaram que doses próximas a 200 mg de zinco kg^-1 de solo argiloso estimulam a altura de planta, diâmetro do colo, a massa seca aérea e radicular das mudas de timbaúva. A timbaúva apresenta elevada tolerância ao zinco e por ser uma arbórea nativa adaptada às condições ambientais do Brasil pode ser indicada para revegetação de áreas contaminadas com a aplicação de até 600 mg de zinco kg^-1 de solo argiloso.

Palavras-chave: metais; fitorremediação; espécies arbóreas

ABSTRACT

Zinc is an essential element to plants, but when present in high concentrations in the soil can become toxic to the plant metabolism. The study aimed to determine the growth and tolerance of Enterolobium contortisiliquum Vell. seedlings cultived in soil contaminated with zinc. The experiment was conducted in a greenhouse in soil with 81% clay, in a completely randomized design with seven treatments, doses of zinc (0, 100, 200, 300, 400, 500 and 600 mg kg^-1) eight repetitions. We evaluated the plant height, stem diameter, shoot dry mass, root dry mass, length of the main root, specific surface area, Zn content in shoots and roots, the impact coefficient of relative zinc content, translocation and tolerance. The coefficient of impact of the relative zinc content indicated a trend of lower translocation of Zn to the aerial part of the molt up to the dose of 300 mg of Zn kg-1 of soil. The results showed that doses close to 200 mg Zinc kg^-1 clay soil stimulate plant height, stem diameter, stem and root dry mass of seedlings and timbaúva. Timbaúva presents high tolerance to zinc and because it is a native tree adapted to Brazilian environmental conditions it can be indicated for revegetation of contaminated areas with the application of up to 600 mg of zinc kg-1 of clay soil.

Keyword: metals; phytoremediation; tree species

INTRODUÇÃO

O Zn pode ser encontrado em vários resíduos ou rejeitos produzidos em elevada quantidade pela população (LUX RESEARCH, 2009), como nos descartes de equipamentos eletrônicos (INTERNATIONAL SOLID WASTE ASSOCIATION, 2012), dejeto liquido de suíno (BASSO et al., 2012), lodo de esgoto e biossólidos (KABATA-PENDIAS, 2010) e rejeitos de mineração (BORGES JUNIOR et al., 2008). Além disso, tem-se evidenciado que a aplicação sucessiva e de modo contínuo por 10 anos de fungicidas contendo cobre e zinco acarreta em aumento dos elementos na camada superficial do solo (BRUNETTO et al., 2014). Desse modo, diariamente, diferentes fontes de zinco podem estar atingindo o solo possibilitando a elevação de suas concentrações.

O Zn, embora seja considerado um elemento essencial para o desenvolvimento das plantas, absorvido da solução do solo como Zn²⁺ (SANTOS et al., 2011), pode se tornar extremamente fitotóxico (ROUT; DIAS, 2009). Isso ocorre quando suas concentrações estão entre 100 a 500 mg Zn kg^-1 de solo (KABATA-PENDIAS, 2010). Nesse sentido, o Conselho Nacional do Meio Ambiente estabeleceu, por meio da resolução nº 420 (CONSELHO NACIONAL DO MEIO AMBIENTE, 2009), o limite de 450 mg de Zn kg^-1 de solo como o valor de investigação para solos agrícolas, pois, acima desta concentração, esse elemento promove redução do crescimento vegetal. Sintomas de toxicidade do Zn às plantas incluem deficiência induzida de Fe, levando à clorose pela diminuição da síntese de clorofila e degradação dos cloroplastos, além de interferir na absorção de fósforo (P), magnésio (Mg) e manganês (Mn) (BROADLEY et al., 2007). O estudo de plantas que tolerem os teores em excesso desse metal no solo torna-se importante para possibilitar a revegetação de áreas contaminadas.

As plantas apresentam mecanismos de tolerância aos metais pesados, como a alteração na atividade das enzimas antioxidantes (catalase e superóxido dismutase), a complexação do metal em compostos intracelulares (fitoquelatinas e metalotioninas) e a compartimentalização no vacúolo (KRÄMER et al., 2000). Desse modo, as plantas podem ser classificadas conforme sua resposta à concentração de metais no solo, em exclusoras, indicadoras e acumuladoras (SALT, 2001). Entretanto, ainda é escassa a relação de espécies arbóreas nativas tropicais que reconhecidamente apresentam desenvolvimento em solos contaminados com zinco.

Diversos trabalhos de pesquisa indicam efeito positivo da utilização de plantas em solos contaminados com zinco, sejam espécies florestais, como evidenciado para Corymbia citriodora tolerante à adição de até 1.500 mg kg^-1 de zinco em solo com 81% de argila (SILVA et al., 2016), para Cordia africana na fitoestabilização de Zn (PEREIRA et al., 2013), para mogno-africano (K. senegalensis A. Juss) que tolera apenas 20 mg de zinco dm^-3 (ARAÚJO et al., 2017), ou agronômicas como o Zea mays indicado para fitorremediar zinco e cádmio (VAN SLYCKEN et al., 2013). Contudo, a literatura não relata a influência da contaminação do solo com zinco no crescimento de mudas de timbaúva (Enterolobium contortisiliquum Vell.) que é uma espécie arbórea nativa pioneira, pertencente à família Leguminosae, de ocorrência nos Estados do Mato Grosso e do Ceará até o Rio Grande do sul (GRINGS; BRACK, 2011). Esta planta apresenta tendência de armazenamento de cobre nas raízes e baixa translocação para a parte aérea, resultando em incremento na massa seca da parte aérea com pequenas doses de cobre no solo (SILVA et al., 2011). Nesse sentido, uma questão ainda persiste sobre a possibilidade da timbaúva crescer e ser tolerante a solo contaminado com Zn. Desse modo, este trabalho objetivou determinar o crescimento e a tolerância de mudas de Enterolobium contortisiliquum Vell. cultivadas em solo contaminado com zinco.

MATERIAL E MÉTODOS

O experimento foi conduzido em casa de vegetação pertencente ao Departamento de Ciências Agronômicas e Ambientais da UFSM, Campus de Frederico Westphalen, Rio Grande do Sul, Brasil. O solo utilizado foi classificado como Latossolo Vermelho (EMBRAPA, 2013), cuja caracterização química e física está apresentada na Tabela 1.

Tabela 1
Caracterização química e física do solo utilizado como substrato para a produção de mudas de timbaúva em casa de vegetação. Frederico Westphalen-RS, 2014
Table 1
Chemical and physical soil used as substrate for the production of seedlings in the greenhouse timbaúva characterization. Frederico Westphalen, RS state, 2014

pH água	Ca + Mg	Al	H + Al	P	K	Zn	MO	Argila
(1:1)
	------- Cmolc dm-3 -------			------- mg dm-3 ------			------- % ------
5,5	5,4	0,4	4,3	6,6	110	1,1	2,4	81

As unidades experimentais (EU) foram compostas por recipientes plásticos de 125 cm³ contendo uma planta. A espécie arbórea utilizada foi a timbaúva (Enterolobium contortisiliquum Vell.) cujas sementes foram provenientes da FEPAGRO Florestas - Centro de Pesquisas Florestais, unidade de Santa Maria-RS. As sementes foram submetidas à quebra de dormência por escarificação mecânica, sendo semeadas três sementes por UE e, quando as plântulas apresentaram um par de folhas definitivas foi realizado o desbaste, deixando-se uma planta por unidade experimental.

O experimento foi conduzido por 120 dias, com três irrigações diárias mantendo o solo na capacidade de campo. As fertilizações foram realizadas na pré-semeadura com 150 g de N, 300g de P₂O₅ e 100g de K₂O por m³ de substrato e, em pós-semeadura, utilizaram-se 200 g de N e 150 g de K₂O em solução, diluídos em 100 L de água, aos 30 dias após a germinação sendo aplicado N e K, aos 60 dias após a emergência apenas N e aos 90 dias após a germinação, N e K seguindo as recomendações de Gonçalves & Benedetti (2005).

O delineamento experimental foi inteiramente casualizado com 7 tratamentos compostos de doses de zinco, sendo: 0 (controle sem adição de zinco), 100, 200, 300, 400, 500 e 600 mg de Zn kg^-1 de solo, com oito repetições. O solo foi contaminado com a adição de solução de sulfato de zinco (ZnSO₄ 7H₂O).

Os parâmetros avaliados foram: altura da parte aérea (AP), medida com régua graduada do colo da planta até o meristema apical, diâmetro do caule (DC) obtido com paquímetro digital pela medida na região do colo da planta, peso da massa seca da parte aérea (MSPA), peso da massa seca da parte raiz (MSPR), peso da massa seca total (PMST), comprimento de raiz principal (CRP) e área superficial específica (ASE), conforme Tennant (1975), teor de Zn na raiz e parte aérea. As plantas foram seccionadas na região do colo, separando-se a parte aérea da radicular, as quais foram submetidas à secagem em estufa a 60ºC ± 1ºC, até peso constante, sendo a massa seca da parte aérea e radicular quantificadas em balança analítica. A análise química do tecido vegetal foi realizada por digestão úmida com HNO₃ + HClO₄ (3:1) e posterior determinação do teor zinco da parte aérea (TZnA) e radicular (TZnR) por espectrofotometria de absorção atômica com chama de ar acetileno (EMBRAPA, 2009). Utilizando-se os valores dos parâmetros avaliados, na dose zero e na maior dose (600 mg kg^-1), calculou-se o percentual de redução ou aumento (PRA) pela fórmula ((dose 600 / dose 0) -1) x 100.

Calculou-se também o índice de tolerância, o coeficiente de impacto do teor relativo de zinco e o índice de translocação de zinco. O índice de tolerância (IT) foi calculado pela fórmula: [(PMST contaminado/PMST controle) X 100], sendo PMST contaminado, o peso da massa seca total da muda crescida em solo contaminado e PMST controle, o peso da massa seca total da muda crescida no controle sem adição de Zn (ZACCHINI et al., 2009). O coeficiente de impacto do teor relativo de zinco (CITR) foi calculado com base na relação entre o teor na raiz e na parte aérea na dose zero (R₀/PA₀) e nas doses com zinco (R_Zn/PA_Zn), utilizando-se a fórmula CITR = (R_Zn/PA_Zn)/( R₀/PA₀). O índice de translocação de zinco (ITZn), expresso em percentagem, foi calculado pela fórmula ITZn = (CPAZn/CTZn) x 100 (ABICHEQUIER; BOHNEN, 1998), sendo CPAZn o conteúdo de zinco acumulado na parte aérea e CTZn o total na planta. O conteúdo de Zn foi obtido por meio da fórmula: CZn = Teor Zn (mg kg^-1 ) x Massa Seca (g).

Os resultados foram submetidos à análise de variância, com probabilidade de erro de 5% (p ≤ 0,05), quando significativo foram ajustadas equações de regressão, através do programa estatístico SISVAR (FERREIRA, 2011). Os resultados do índice de tolerância e do coeficiente de impacto do teor relativo de zinco, por serem relativos ao controle foram comparados pelo teste de Tukey a 5% de probabilidade de erro (p < 0,05).

RESULTADOS E DISCUSSÕES

A análise de regressão revelou alterações significativas (p ≤ 0,05) nos parâmetros avaliados em função das doses de Zn (Figura 1). Observou-se aumento na altura, diâmetro de colo das mudas de timbaúva, atingindo ponto de máxima com 232 e 212,5 mg de Zn kg^-1de solo, respectivamente, porém, com redução de 23,3 e 19,8% na maior dose de Zn em relação à dose zero (Figuras 1A e 1B). O Zn é um elemento essencial para o desenvolvimento das plantas, por estar presente em seis classes de enzimas, desempenhando funções estruturais ou como catalizador (BROADLEY et al., 2007; HOODA, 2010). Desse modo, essas doses iniciais possibilitaram teores de suficiência de Zn no solo para o crescimento em altura e diâmetro das mudas de timbaúva e refletem a necessidade de estudos com ênfase na fertilização com micronutrientes, para maximizar o crescimento das espécies arbóreas nativas.

Figura 1
Equações de regressão para a altura (A), diâmetro de colo (B) massa seca da parte aérea - MSA (C), massa seca da parte raiz - MSR (D), comprimento da raiz principal - CRP (E) área superficial específica - ASE (F) das mudas de Enterolobium contortisiliquum submetidas a doses de cobre no solo. Frederico Westphalen-RS, 2014
Figure 1
Regression equations for height (A), stem diameter (B) Dry weight of shoot - MSA (C), root dry mass arial part - MSR (D), length of the main root - CRP (E) specific surface area - ASE (F) of seedlings Enterolobium contortisiliquum subjected to doses of copper in the soil. Frederico Westphalen, RS state, 2014

Na massa seca da parte aérea e radicular observou-se ponto de máxima em 187 e 200 mg kg^-1 de Zn, respectivamente (Figuras 1C e 1D). Zeitouni, Berton e Abreu (2007) observaram diminuição na matéria seca das plantas de mamona com o aumento das doses dos metais aplicadas ao solo. Sousa (2010) também evidenciou redução no crescimento das mudas de Mimosa caesalpiniaefolia Benth com o aumento das doses de zinco. Nesse sentido, Pavlíkováa et al. (2008) evidenciaram que a absorção de alta concentração de Zn de um solo contaminado, afeta o funcionamento da rubisco, reduzindo a produção de biomassa, em plantas de espinafre. Desse modo, é possível que a timbaúva tenha sua atividade enzimática afetada somente a partir de 187 mg de Zn kg^-1 de solo contendo 81% de argila, mas essa hipótese necessita ser comprovada em outros trabalhos, para arbóreas nativas.

O comprimento da raiz principal diminuiu linearmente com o aumento das doses de Zn no solo e a área superficial específica radicular aumentou significativamente em doses iniciais, com ponto de máxima em 245,0 mg kg^-1 (Figuras 1E e 1F). O excesso de Zn no solo geralmente reduz o comprimento radicular (HOODA, 2010), pois pode causar danos aos processos fisiológicos, afetando a mitose e causando a morte celular (EL-GHAMERY; EL-KHOLY; ABOU EL-YOUSSER, 2003). Soares et al. (2001) verificaram que as doses de 1.200 e 1.600 µmol L^-1 de Zn causaram morte das plantas de Eucalyptus maculata, cultivado em solução nutritiva e, em concentrações menores, as plantas apresentaram raízes escuras e pouco desenvolvidas. Isso indica que sob estresse, induzido pelas doses de zinco, as mudas de timbaúva inicialmente emitem raízes novas e finas, mas, em doses maiores há um engrossamento e menor produção de raízes, o que pode ser evidenciado neste trabalho pela redução de 18,3% no comprimento da raiz principal e 27% na área superficial específica radicular na dose mais elevada em relação à dose zero (Figuras 1E e 1F).

Os teores de Zn na parte aérea e radicular aumentaram 535,7 e 1.285,8% na maior dose, respectivamente, comparadas à testemunha, além disso, há maior teor de Zn na parte radicular com o aumento das doses (Figuras 2A e 2B). Isso se deve ao Zn ser de fácil translocação dos tecidos radiculares para os tecidos aéreos da planta (PULFORD; WATSON, 2003). Entretanto, Testiati et al. (2013) trabalhando com Globularia alypum L. e Rosmarinus officinalis L. em solo contaminado com zinco, encontraram teores elevados de zinco tanto na parte aérea, quanto nas raízes. Desse modo, esses resultados indicam a possibilidade da timbaúva ser uma espécie capaz de acumular Zn nos seus tecidos radiculares.

Figura 2
Equações de regressão para o teor de zinco na parte aérea (A), teor de zinco na raiz (B) e índice de translocação (C) das mudas de Enterolobium contortisiliquum submetidas a doses de cobre no solo. Frederico Westphalen-RS, 2014
Figure 2
Regression equations for the zinc content in shoots (A), zinc content in the root (B) and Index of translocation (C) of Enterolobium contortisiliquum seedlings subjected to doses of copper in the soil. Frederico Westphalen, RS state, 2014

O Índice de Translocação de zinco das mudas de timbaúva apresentou resposta linear positiva (Figura 2C). Esse Resultado é semelhante aos encontrados por Rajoo et al. (2013) trabalhando com Dipterocarpus verrucosus em solo com aplicação de lodo de esgoto com altas concentrações de zinco. O crescimento de espécies arbóreas em solos contaminados com Zn relaciona-se com a capacidade de acumular ou translocar o metal (MARQUES; MOREIRA; SIQUEIRA, 2000). As mudas de timbaúva absorvem e translocam zinco para a parte aérea, além de acumular grande quantidade deste elemento em suas raízes.

A timbaúva apresentou maior índice de tolerância na dose de 300 mg kg¹ de Zn no solo (Figura 3A). Quando este índice for maior que 60% tem-se alta tolerância das plantas aos contaminantes (LUX et al., 2004). Desse modo, a timbaúva por apresentar valores superiores a 70% em todas as doses testadas, pode ser uma planta promissora para cultivo em solos argilosos contaminados com até 600 mg kg^-1 de zinco.

Figura 3
Índice de Tolerância (A) e Coeficiente de Impacto do Teor Relativo de Zinco - CITR (B) das mudas de Enterolobium contortisiliquum submetidas a doses de zinco no solo. Frederico Westphalen-RS, 2014. * Médias seguidas da mesma letra maiúscula, não diferem entre si pelo teste de Tukey a 5% de probabilidade de erro (p < 0,05)
Figure 3
Index of Tolerance (A) and Coefficient of Relative Impact of Zinc Content - CITR (B) of Enterolobium contortisiliquum seedlings subjected to doses of zinc in the soil. Frederico Westphalen, RS state, 2014. * Means followed by the same capital letter do not differ by Tukey test at 5% level of probability (p <0.05)

O coeficiente de impacto do teor relativo foi significativamente menor a partir de 400 mg kg¹ de Zn no solo (Figura 3B). Quando o CITR é maior que uma unidade indica que mais metal é retido nas raízes da muda cultivada em solo contaminado (MARQUES; MOREIRA; SIQUEIRA, 2000). Assim, a tolerância apresentada pela timbaúva deve-se a uma tendência de menor translocação de Zn à parte aérea até a dose de 300 mg kg^-1 de Zn no solo, o que reduz o impacto na fisiologia da planta e permite que ocorra desenvolvimento das mudas. Porém, nas doses de 400, 500 e 600 mg kg^-1 de Zn no solo ocorreram valores baixos do CITR, próximos a 0,2, o que pode indicar que o mecanismo fisiológico responsável por reter o Zn nas raízes entrou em colapso, resultando em maior índice de translocação com doses elevadas deste elemento no solo, conforme observado na Figura 2C.

CONCLUSÃO

Doses próximas a 200 mg de zinco kg^-1 de solo argiloso estimulam a altura, diâmetro do colo, a massa seca aérea e radicular das mudas de timbaúva.

A timbaúva apresenta elevada tolerância ao zinco e por ser uma espécie arbórea nativa adaptada às condições ambientais do Brasil pode ser indicada para revegetação de áreas contaminadas com a aplicação de até 600 mg de zinco kg^-1 de solo argiloso.

AGRADECIMENTOS

Ao Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq), à Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (Capes) pela concessão das bolsas, à Fundação Estadual de Pesquisa Agropecuária - FEPAGRO Florestas, unidade de Santa Maria (RS) e a FAPERGS.

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Datas de Publicação

• Publicação nesta coleção
  Jul-Sep 2018

Histórico

• Recebido
  26 Set 2014
• Aceito
  26 Jun 2017