Alguns aspectos epidemiológicos da mancha bacteriana (Xanthomonas spp.) do tomateiro na região de Caçador/SC

Some epidemiological aspects of bacterial spot (Xanthomonas spp.) of tomato in Caçador/SC, Brazil

ARTIGOS

Alguns aspectos epidemiológicos da mancha bacteriana (Xanthomonas spp.) do tomateiro na região de Caçador/SC^*

Some epidemiological aspects of bacterial spot (Xanthomonas spp.) of tomato in Caçador/SC, Brazil

Leandro Luiz Marcuzzo^I,IV,1; Walter Ferreira Becker^II; José Mauricio Cunha Fernandes^III,IV

^IUniversidade do Contestado-UnC, Campus de Caçador CP 232, CEP 89500-000, Caçador, SC; e-mail:[e-mail]

^IIEpagri, Estação experimental de Caçador, CP591, CEP 89500-000, Caçador, SC, e-mail:[e-mail]

^IIIEmbrapa Trigo, Rodovia BR 285, km 174. Cx. postal 451, Passo Fundo, RS, e-mail: [e-mail]

^IVFaculdade de Agronomia e Medicina Veterinária, Universidade de Passo Fundo-UPF, CP 611, CEP 99001-970, Passo Fundo, RS

RESUMO

Objetivando explorar alguns aspectos da epidemiologia da de orvalho e um período médio de 13 horas continuas de umidade mancha bacteriana do tomateiro, incitada por Xanthomonas spp., relativa e"90%. A população bacteriana epifítica oscilou nas 10 em Caçador/SC, um ensaio a campo foi conduzido com plantas semanas após o plantio, conforme as condições climáticas, no inoculadas antes do transplantio. A cada sete dias e durante 19 entanto após o inicio dos sintomas manteve-se estável. O semanas foi monitorada a população bacteriana epifítica, as progresso da doença foi representado pelo modelo logístico y = condições climáticas e a severidade na planta. Constatou-se que o 0.99964/(1+exp(10.35989-0.69762*x)) e devido a pratica de inicio da epidemia teve concomitância com início da maturação apenas 1 colheita semanal, a severidade em frutos foi alta, fisiológica dos frutos do primeiro cacho, sendo que 77 dias antes atingindo 30,22% com produtividade total de117,88 ton.ha^-1. Este do início da colheita não houve sintomas nas folhas. Observou-se, estudo epidemiológico servirá de um indicativo para determinação que mesmo em condição de estiagem, houve acréscimo da doença do inicio da epidemia e será usado na validação de um sistema de devido ao constante molhamento foliar decorrente da formação previsão para a mancha bacteriana do tomateiro.

Palavras-chave adicionais: epidemiologia , bactéria , Lycopersicon esculentum.

ABSTRACT

Aiming to explore some epidemiological aspects of bacterial spot of tomato incited by Xanthomonas spp., a field experiment was carried out in Caçador, SC. Tomato plants were inoculated with a bacterial suspension before transplanting. At seven-day intervals the bacterial population on leaf surface and disease severity were monitored during 19 weeks. Daily weather records were registered during the crop season. It was observed that epidemic onset coincided with physiological maturation of the first fruit clusters. Leaves were symptomless until 77 days before harvest. It was observed that even under a dry period the bacterial leaf spot continued to develop. It is possible that the leaf wetness from dew deposits favored disease development. Weather records showed an average of 13 hours with relative humidity e"90%. The bacterial population on leaf surface varied during the first 10 weeks after planting, according to the weather conditions, however, it remained stable after the fists symptoms of the disease. The disease curve progress was fitted to the logistic model y = 0,99964/(1+exp (10.35989-0.69762*x)), where y is disease severity and x the time in days. Disease severity on fruits was high, reaching 30.22%, with total productivity of 117.88 ton.ha^-1. The results will be used to estimate disease onset in a forecast system.

Keywords: epidemiology, bacteria, Lycopersicon esculentum.

Na cultura do tomate, diversos são os fatores que contribuem para a baixa produtividade da cultura, e dentre estes, estão as doenças de diversas etiologias, que causam danos significativos à cultura. A mancha bacteriana do tomateiro, incitada por Xanthomonas spp. (11), é uma doença de grande importância em plantações de tomate, sob condições de temperaturas entre 20 e 30ºC (16), pois ataca todos os órgãos da parte aérea da planta. A produtividade é comprometida pela redução da área foliar e pela derrubada de flores e frutos em formação, podendo também haver o comprometimento da qualidade dos frutos para a comercialização (16, 24).

No estudo de epidemias, a dinâmica temporal das doenças de plantas tem sido enfatizada, pois o progresso de doenças é freqüentemente a manifestação facilmente visualizada (10). Trabalhos envolvendo acompanhamento epidemiológico têm como objetivo constatar períodos da cultura em que ocorre maior intensidade da doença (4).

Para o caso da mancha bacteriana do tomateiro, dentre os aspectos epidemiológicos, desconhece-se o comportamento da doença nas condições de campo para o início de epidemia, e, portanto, este trabalho pretendeu relacionar variáveis climáticas com a população bacteriana epifítica, a severidade da doença em folhas e frutos e a produtividade.

MATERIAL E MÉTODOS

O estudo epidemiológico da mancha bacteriana do tomateiro foi realizado na Empresa de Pesquisa Agropecuária e Extensão e Rural de Santa Catarina S/A - EPAGRI, estação experimental de Caçador/SC, localizada a 26º81'93''S e 51º83'53''W e altitude de 950 m, no período de 26 de novembro de 2005 a 8 de abril de 2006, totalizando 19 semanas após o transplantio da mudas.

O registro das variáveis meteorológicas como temperatura, umidade relativa e molhamento foliar foram obtidos em um termo-higroumectógrafo (G. Lufft Altenberg STR 3) instalado em abrigo meteorológico padrão e o índice pluviométrico medido pelo pluviômetro na estação meteorológica da Estação Experimental da Epagri/Caçador, localizada a 500 m do local do experimento.

Foi utilizado isolado de Xanthomonas spp., mutante a rifampicina, obtido de colônia isolada em meio de cultura 523 de Kado & Heskett (13) contendo 150 µg.mL^-1 de rifampicina e repicada por três vezes consecutivas, para manutenção da resistência ao antibiótico.

Sessenta mudas de tomateiro da cultivar Carmem, com 30 dias de idade, produzidas em bandejas contendo substrato Plantmax^®, no sistema floating, foram colocadas em câmara úmida (UR ± 100%) por 48 horas e inoculadas com uma suspensão em solução salina (NaCl 0,85%) de Xanthomonas spp. mutante a rifampicina 150 µg.mL^-1, com 48 horas de crescimento, sendo a concentração ajustada em espectrofotômetro para OD₅₅₀=0,1 (2x10⁸ UFC/mL). Esta suspensão foi uniformemente pulverizada nas plantas por meio de um compressor rotativo portátil ajustado para pressão de 5 lib/pol² (0,35 Kg/cm²). As plantas foram mantidas por mais 48 horas em câmara úmida e após esse período, foram transplantadas para condições de campo, no sistema de estaqueamento vertical com uma planta e duas hastes por estaca dispostas em quatro linhas de 15 plantas, com espaçamento de 1,5 m entre filas e 0,6 m entre plantas. A calagem, adubação de plantio e de cobertura e os tratos culturais foram realizados conforme recomendação para a cultura (6). Para os tratamentos fitossanitários visando controle de fungos, utilizou-se clorothalonil (200 g p.c./100L), a cada 7 dias e/ou precipitação acumulada de 25 mm. De acordo com a literatura, esse fungicida não apresenta interferência sobre a bactéria em estudo (18). No controle de insetos, pulverizou-se intercalado semanalmente, o deltamethrine (40 ml p.c./100 L) e etofenproxi (200 ml p.c./100 L).

Devido à ausência dos sintomas da doença nos estádios iniciais do desenvolvimento das plantas, no 67º dia após o transplantio, reinoculou-se as primeiras oito folhas baixeiras, com auxílio de um pulverizador costal, uma suspensão bacteriana mutante a rifampicina ajustada a OD₅₅₀=0,5 (1x10⁹ UFC/mL), acrescida de 1% de sacarose e dois dias após, aplicou-se 2,5 gramas/planta de nitrogênio (uréia 45%) em cobertura.

As avaliações foram realizadas em 10 plantas centrais previamente demarcadas, coletando-se semanalmente, a partir da 1ª semana após o transplantio, 10 a 20 folíolos das folhas baixeiras apresentando sintoma da doença, para levantamento da população epifítica e também em outras 10 plantas, para calcular a severidade total/planta, empregandose a escala diagramática descrita por Mello et al. (19). As folhas foram acondicionadas em caixa de isopor contendo gelo, para manutenção de temperatura durante o transporte até o laboratório. A avaliação da população epifítica constou de 5 repetições contendo sub-amostras de 1 grama de folhas cortadas transversamente em secções de aproximadamente 1 cm de comprimento. Essas sub-amostras foram colocadas em tubo de ensaio contendo 10 mL de solução salina (NaCl 0,85%), e homogenizadas, com auxílio de um agitador de tubos, durante 15 segundos. Em seguida foram feitas diluições em série até a concentração de 10^-10 e todas as diluições de cada sub-amostra foram plaqueadas, com auxílio de alça de Drigalski, em meio de cultura Kado & Heskett (13) acrescido de rifampicina a 150 µg.mL^-1. Após a incubação a 28ºC por 72 horas, foi contado o número de colônias bacterianas emergentes.

Nas dez plantas avaliadas para a intensidade da doença (folhas e frutos), aferiu-se a produtividade (ton.ha^-1) em colheitas semanais.

Para a análise do progresso da doença utilizou-se o modelo logístico y = ymax/(1+exp(B-r*x)), onde y é a proporção de intensidade final de doença; ymax (intensidade máxima da doença); B o parâmetro de formatação ao modelo (-log(y0/(kL-y0), onde y0=inóculo incial estimado e kL=1; r corresponde a taxa do progresso da doença e x, o tempo em semanas. O progresso foi relacionado à variação da população bacteriana epifítica (logUFC/g de tecido foliar fresco) e comparada com as condições climáticas para a elaboração de uma fundamentação teórica da epidemiologia da mancha bacteriana do tomateiro.

RESULTADOS E DISCUSSÃO

Durante o período de avaliação do experimento constatou-se que houve estiagem, com temperaturas elevadas durante o dia e, baixa a noite, o que proporcionou a formação de orvalho e, consequentemente, molhamento foliar em grande parte do período avaliado (Figura 1).

Para estabelecer relações entre o progresso de uma epidemia e as condições climáticas é necessário conhecer as condições ambientais favoráveis para o desenvolvimento da doença (28). A temperatura média foi de 21,4ºC nas 19 semanas (Figura 1), satisfazendo a condição favorável ao desenvolvimento da doença (20). Segundo Nayudu & Walker (20), à medida que a temperatura aumentou de 16 para 24ºC houve um acréscimo de severidade de 25 até 100% e que temperaturas abaixo de 20ºC reduziram os sintomas da doença. Condição de temperatura que se assemelhou após a 10ª semana após o transplantio (SAT) e ao final de março (Figura 1). Estudo semelhante a campo foi realizado por Pallazzo et al. (22), que verificaram a influência de fatores climáticos sobre o índice de infecção de cancro cítrico (Xanthomonas campestris pv. citri) em laranjeira Valência, em Bataguassu/MS. Neste caso, foi observado o aumento de infecção foliar com temperatura acima de 20ºC, mas não abaixo desta temperatura, mesmo com a ocorrência de chuva, concluindo que a temperatura foi o fator primordial para o desenvolvimento da doença. Resultado semelhante foi observado para a podridão negra das crucíferas (Xanthomonas campestris pv. campestris) em Lavras/MG, onde Oliveira et al. (21) evidenciaram maior ocorrência da doença em período de temperatura média de 21,3ºC e de maior precipitação.

Com relação à precipitação no presente estudo, constatou-se, que em meados de dezembro as poucas chuvas (Figura 1), aliadas às temperaturas elevadas contribuíram para um decréscimo na população epifítica (Figura 2). É possível que a chuva, ao promover o molhamento foliar, tenha facilitado à penetração da bactéria nos ferimentos ou aberturas naturais, além de protegê-la contra a dessecação. A chuva facilitaria a dispersão da bactéria agente causal da doença por aerossóis, formando novos focos de infecção a pequenas e médias distâncias, conforme anteriormente constatado por Carmo et al. (5) para Xanthomonas campestris pv. vesicatoria em pimentão.

Ainda no período de avaliação do ensaio, os dados referentes ao molhamento foliar, apresentaram uma média de 8,4 horas de período contínuo de água livre na superfície da folha, valor superior ao de 6 horas, relatados por Smitley & McCarter (27), necessário para induzir o aparecimento de sintomas da doença causada por Pseudomonas syringae pv. tomato, em folhas de tomateiro.

Por outro lado, a umidade relativa e"90% durante 13 horas contínuas induziu a formação de água livre na superfície da folha (28), entretanto, em condições de temperaturas mais amenas, não há necessidade de estar a 90% (23). Fryda & Otta (7) observaram que a umidade entre 80 e 98% favoreceu a epidemia de Pseudomonas syringae em trigo. Umidade relativa acima de 80% foi também fator importante para o desenvolvimento de Pseudomonas syringae pv. tomato em tomateiro (29).

Segundo a literatura, o monitoramento da variação da população epifítica bacteriana é o principal requisito para a dinâmica do progresso da doença (8,14). Os diversos trabalhos desenvolvidos a respeito, revelaram que as fitobactérias têm a capacidade de se multiplicar às custas de exsudatos do hospedeiro sem infectá-lo e assim o inóculo presente, é suficiente para o surgimento de uma epidemia, fato também relatado para o caso de Xanthomonas vesicatoria em tomate (15, 25).

Também é aceito por diversos autores que a população do patógeno que se desenvolve na superfície da folha (3) não induz sintomas da doença (8). No presente caso, isso foi observado que durante as primeiras 10 SAT, em que a população bacteriana oscilou, quando comparada às condições ambientais. Apenas a partir da 10ª SAT é que começou a se desenvolver o processo epidêmico. Presume-se que, por causadas condições ambientais desfavoráveis anteriores a este período, havia baixa população bacteriana para iniciar o processo infeccioso. Segundo McCarter et al. (17), em presença de baixa população epifítica de Pseudomonas syringae pv. tomato, também não ocorreu expressão dos sintomas em plantas de tomateiro. Além disso, mesmo sido efetuada a segunda inoculação, que teria por base facilitar o desenvolvimento da doença (27), o aparecimento dos sintomas somente pode ser notado após a 11ª semana. O início da doença coincidiu com início da maturação dos frutos do primeiro cacho, que ocorreu aos 77 dias após transplantio e neste período constatou-se a maior população epifítica (Figura 2) de Xanthomonas spp. (6,8 logUFC/g de tecido fresco), embora que as condições ambientais (Figura 1) não apresentassem diferenças marcantes em relação a períodos anteriores.

Pressupõe-se que no início da maturação dos frutos, ocorra a translocação de carboidratos das folhas mais velhas para os frutos. Em tais folhas, que estão em início de senescência, ocorre liberação desses compostos, inicialmente no interior das células dos tecidos foliares, seguido da disponibilização desses nutrientes para os espaços intercelulares, nos quais se encontram as bactérias, propiciando, aumento de sua população. Conforme o modelo de colonização bacteriana proposto por Beattie & Lindow (2), é possível que a decorrência do aumento populacional ocorresse seu egresso à superfície foliar e com isso aumentaria a população epifítica, onde concomitantemente iniciaria o processo de patogênese e manifestação da doença (Figura 3). O processo infeccioso e a fenologia do hospedeiro também foi correlacionado no patossistema Alternaria solani - tomateiro, por Barratt & Richards (1) e os resultados mostraram que a maturação fisiológica do fruto está relacionada com a ocorrência da doença.

No presente trabalho após o acréscimo da população bacteriana, a mesma se manteve estável, possivelmente devido à competição por nutrientes e à produção de substâncias tóxicas durante a multiplicação bacteriana (Figura 2). Na décima oitava semana, entretanto, houve um decréscimo da população epifítica, que pode ser explicado pela diminuição da temperatura (Figura 1), comprovando o efeito desta variável no desenvolvimento da população bacteriana.

Durante o período de colheita ocorreu maior severidade entre as nove semanas após início dos sintomas, atingindo um máximo de severidade de 94,3% na 19ª semana (Figura 3), a qual foi representada pelo modelo logístico y = 0.99964/(1+exp(10.35989-0.69762*x)), (R²=0,9956), onde a taxa (0,69762) nas condições observadas, comprova o avanço da doença após a estabilização da população epifítica que ocorreu a partir da 11ª semana (Figura 2).

Nas colheitas, 30,22% dos frutos apresentavam sintomas da doença, como também constatado por Scott & Jones na Flórida (26).

Quanto à produtividade total de frutos (comercial e indústria), foi de 117,88 ton.ha^-1. No entanto, Quezado-Soares et al. (24) constataram uma redução de 52,1% e produção de 45,6 ton.ha^-1 para a mancha bacteriana no Brasil central, em cultivares de tomate destinados à indústria.

Este estudo exploratório de alguns aspectos da epidemiologia teve como objetivo conhecer o período de início e progresso da doença que aliado às condições climáticas poderão servir de suporte para a validação de um sistema de previsão para a mancha bacteriana do tomateiro.

Data de chegada: 15/09/2007.

Aceito para publicação em: 31/10/2008

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Parte da tese de doutorado do primeiro autor. Universidade de Passo Fundo, 2008.

1

Autor para correspondência: Leandro Luiz Marcuzzo

Datas de Publicação

• Publicação nesta coleção
  04 Ago 2009
• Data do Fascículo
  Jun 2009

Histórico

• Recebido
  15 Set 2007
• Aceito
  31 Out 2008