HEMOGLOBINA GLICADA E FRUTOSAMINA EM CÃES COM DIABETES MELLITUS

GLYCATED HEMOGLOBIN AND FRUCTOSAMINE IN DOGS WITH DIABETES MELLITUS

Resumo

O Diabetes mellitus (DM) ocorre com frequência em cães, sendo a glicemia o teste laboratorial de confirmação. O diagnóstico e monitoramento em pessoas são realizados pelas concentrações de hemoglobina glicada e frutosamina. O objetivo deste estudo foi diagnosticar a DM em 19 cães, com avaliação das concentrações da glicose sérica, hemoglobina glicada e frutosamina. Seis cães com DM e em tratamento com insulina foram acompanhados por um período de doze meses, com as mesmas avaliações hematológicas, até o óbito (três cães) ou controle glicêmico (três cães). Observouse aumento dos valores de glicose, hemoglobina glicada e frutosamina em todos os cães com DM, e valores de hemoglobina glicada e glicose superiores nos animais não sobreviventes, na última avaliação realizada. Estes resultados apontam para a importância da avaliação de hemoglobina glicada e frutosamina em cães com diabetes e para diagnóstico e controle da efetividade do tratamento.

Palavras-Chave:
diagnóstico laboratorial; glicemia; insulina; prognóstico

Abstract

Diabetes mellitus (DM) commonly occurs in dogs, and the laboratorial confirmation is carried out by glycemia test. The diagnosis and monitoring in humans is made by glycated hemoglobin and fructosamine concentrations. The objective of this study was to diagnose DM in 19 dogs, by evaluating seric glucose, glycated hemoglobin and fructosamine concentrations. Six dogs with DM and treated with insulin were assisted during a twelve-month period, by means of the same blood analysis, until the death (three dogs) or glycemic control (three dogs). Glucose, glycated hemoglobin and fructosamine increased in all dogs with DM, and dogs that did not survive presented higher glycated hemoglobin and seric glucose values than those that survived at the last evaluation. The results showed the importance of evaluating glycated hemoglobin and fructosamine in dogs with DM to diagnose and control treatment effectiveness.

Keywords:
glycemia; insulin; laboratorial diagnostic; prognostic

Introdução

A prevalência do Diabetes mellitus (DM) em cães vem aumentando consideravelmente nos últimos anos. O DM é uma endocrinopatia comum em cães e pode ser fatal se não for diagnosticada e adequadamente tratada. A deficiência de insulina que ocorre no DM é resultante da incapacidade das ilhotas pancreáticas em secretar insulina ou da sua ação deficiente nos tecidos⁽¹⁾. O descontrole permanente acarreta uma série de complicações orgânicas, resultando em danos aos tecidos, perda de função e falência orgânica⁽²⁾. O diagnóstico baseia-se fundamentalmente no aumento da glicose plasmática em jejum ou pelo teste de tolerância à glicose⁽³⁾.

Os cães diabéticos do tipo 1 são insulino-dependentes e necessitam da mesma de forma contínua. Geralmente, são necessárias duas aplicações ao dia e o tratamento é bastante individualizado, sendo necessário o ajuste da dose ideal para cada paciente⁽⁴⁾.

A hemoglobina glicada e a frutosamina são muito utilizadas na medicina humana como exames padrão-ouro para diagnóstico, monitoramento e tratamento da DM, podendo ser utilizadas também para cães, desde que devidamente ajustadas com valores de referências para a espécie⁽⁵⁾. A dosagem da frutosamina e hemoglobina glicada são de extrema importância, por refletirem os níveis glicêmicos a curto e longo prazo e permiterem intervenção clínica em tempo útil⁽³,⁶⁾.

Dada a importância destes dois exames para pacientes diabéticos, objetivou-se avaliar cães com DM, em tratamento com insulina, por meio das dosagens de glicose sérica, hemoglobina glicada e frutosamina, e determinar valores de hemoglobina glicada e frutosamina relacionados com agravamento clínico e prognóstico desfavorável em cães com complicações resultantes da DM.

Material e Métodos

Este trabalho foi submetido e aprovado pela Comissão de Ética no Uso de Animais CEUA/SCA protocolo 048/2010. Foram utilizados 19 cães com diagnóstico de DM, de idades e raças variadas, provenientes do atendimento médico veterinário a animais de proprietários particulares, realizado no Hospital Veterinário, pelos residentes veterinários e professores da universidade. O diagnóstico de DM foi pautado em sinais clínicos como poliúria, glicosúria, polidipsia, polifagia e dosagem de glicose sérica superior a 110 mg/dL. Posteriormente à primeira avaliação, os animais foram tratados com insulinoterapia, recebendo administrações iniciais diárias de 0,25 U/Kg a cada doze horas, segundo protocolo adotado pela instituição. Seis cães com diagnóstico de DM foram monitorados individual e mensalmente por um período de doze meses, após o início do tratamento com insulina, até o controle glicêmico ou óbito, sendo três animais sobreviventes e três não sobreviventes. As coletas foram realizadas com o animal em jejum, pela venipunção da jugular, e o sangue foi acondicionado em tubos com EDTA e sem anticoagulante. A frutosamina e a glicose foram dosadas no soro; já a hemoglobina glicada foi dosada no sangue total. Os valores de glicose, hemoglobina glicada e frutosamina foram comparados com os valores obtidos de 100 cães hígidos⁽⁷⁾.

A análise da glicose foi realizada pelo método enzimático glicose oxidase no analisador semi-automático CELM SBA 200 (CELM, Barueri, Brasil), com kit comercial (Human do Brasil, Itabira, Brasil). Ahemoglobina glicada foi determinada pelo método de resina de troca iônica com kit comercial (Human do Brasil) e a frutosamina pelo método cinético por redução do azul de nitrotetrazólio (NBT), com kit comercial (Labtest, Lagoa Santa, Brasil). A determinação da porcentagem da hemoglobina glicada e da frutosamina foram feitas por leitura em espectrofotômetro Quick-Lab (Dreake, São José do Rio Preto, Brasil).

Os resultados de glicose, hemoglobina glicada e frutosamina dos cães clinicamente sem alterações e dos cães com diabetes foram avaliados pelo teste de ANOVA e as médias comparadas pelo teste de Tukey, considerando-se p<0,05.

Os resultados de glicose, hemoglobina glicada e frutosamina observados em cães com diabetes sob insulinoterapia foram avaliados para pesquisa de correlação, por meio do Teste de Correlação de Spearman. Ainda, as médias destas três variáveis foram avaliadas em três cães sobreviventes e três cães não sobreviventes sob tratamento com insulina, comparando-se os momentos de início, dois momentos intermediários e final da avaliação (óbito ou controle da glicemia), também utilizando-se o teste de ANOVA e as médias comparadas pelo teste de Tukey, considerando-se p<0,05.

Resultados e Discussão

Os 19 animais com DM utilizados neste estudo obtiveram valores de hemoglobina glicada e frutosamina superiores aos cães sem alteração clínica (Tabela 1). As dosagens de hemoglobina glicada e frutosamina são ferramentas muito empregadas porque fornecem informações dos níveis médios glicêmicos a curto e longo prazo⁽⁸⁾, sendo de uso rotineiro na medicina humana, pois propiciam diagnóstico preciso de diabetes e monitoramento mais eficiente de pacientes em tratamento.

Tabela 1
Médias e desvios-padrão de glicose sérica, hemoglobina glicada e írutosamina de cães normais e cães com DM (ANOVA e Tukey:

Avaliações	Cães normais	Cães com DM
Glicose (mg/dL)	95,1 ± 11,9 a	494,2 ± 180,03 b
HB glicada (%)	6,2 ± 0,85 a	10,3 ± 2,48 b
Frutosamina (μmol/L)	327,9 ± 54,39 a	687,0 ± 186,94 b

• Letras iguais ua mesma linha indicam médias sem diferetuça estatística significativa (p<0,05)

Uma vez que os animais utilizados eram provenientes da casuística de atendimento do hospital veterinário, sete cães não puderam ser monitorados durante a adaptação do protocolo de tratamento porque os proprietários não retornaram com os animais ao atendimento veterinário. Somente três cães que sobreviveram puderam ser acompanhados até o retorno de glicose, hemoglobina glicada e frutosamina aos valores de referência. Para efeitos de comparação, utilizaram-se três cães não sobreviventes que foram acompanhados até a última análise antes do óbito, para equiparar os grupos.

Houve correlação positiva entre glicose, hemoglobina glicada e frutosamina. A mais forte correlação observada ocorreu entre a glicose e a hemoglobina glicada; a análise entre a hemoglobina glicada e frutosamina resultou em correlação moderada (Tabela 2). Esta correlação comprova que a utilização destas avaliações para diagnóstico e monitoramento de cães com DM tem relevância na prática clínica. A moderada correlação verificada entre a hemoglobina glicada e a frutosamina pode ser explicada porque as duas relacionam-se diretamente com a glicemia sérica e, assim, indiretamente entre si. A glicemia sérica é afetada por diversos fatores, como, por exemplo, variação diurna, exercício, estresse, alimentação e medicação, o que não ocorre com a hemoglobina glicada e a frutosamina⁽⁹⁾, aumentando a margem de confiança para afirmar que o cão está com glicemia elevada e por tempo prolongado⁽¹⁰⁾. Ambas as substâncias são geradas pela interação com a glicose plasmática⁽¹¹,¹²⁾. Foi possível notar que a correlação mais elevada ocorreu entre a glicose e a hemoglobina glicada, resultado este observado também na comparação das avaliações entre animais sobreviventes e não sobreviventes, pois foram as únicas que mostraram resultados menores no grupo sobrevivente (Tabela 3). Infelizmente, a quantidade de animais avaliados durante o tratamento foi pequena, uma vez que a maioria não retornou para acompanhamento do tratamento instituído e ajuste da dose de insulina. Além disso, considerando-se as grandes diferenças encontradas entre os animais dos mesmos grupos, foi difícil demonstrar diferença estatística em todas as análises. Observou-se que, na última avaliação dos cães não sobreviventes, a média de frutosamina encontrada foi de 718 µmol/L, considerada como controle glicêmico inadequado por Herring et al.⁽¹³⁾, que indicou um valor limite de 614 µmol/L para tratamento moderadamente adequado.

Tabela 2
Coeficientes de correlação entre glicose, hemoglobina glicada e fiutosamina em cães com DM (Teste de Correlação de Spearman)

Matriz de correlação	Glicose (mg/dL)	HE glicada (%)	Frutosamina (μmol/L)
Glicose (mg/dL)	1	0,72477361	0,702394077
HB glicada (%)	0,72477361	1	0,675183174
Frutosamina ((μmol/L))	0,702394077	0,6751S3174	1

Tabela 3
Comparação da glicose, hemoglobina glicada e frutosamina entre cães sobreviventes e não sobreviventes, do inicio do tratamento até o fim do experimento (ANOVA e Tukey, p<0,05)

	Glicose		Hemoglobina glicada		Frntosamina
		Não		Não		Não
	Sobreviventes	sobreviventes	Sobreviventes	sobreviventes	Sobreviventes	sobreviventes
	(n=3)	(n=3)	(n=3)	(n=3)	(n=3)	(n=3)
1	478,5 ± 14,84Aa	427,33 ± 22,5Aa	9,75 ± 0,3 5Aa	8,70 ± 0,72Aa	707 ± 66,46Aa	556,33 ± 69,8Aa
2	125,5 ± 127,89Ba	351,67 ± 218,3Aa	7,15 ± 2,19Aa	7,77 ± 0,32Aa	598 ± 285,6Aa	559,67 ± 124,78Aa
3	160 ± 2,82Ba	342,00 ± 171,lAa	6,7 ± 0,14Aa	8,55 ± l,41Aa	359,5 ± 6,36Aa	511,00 ± 213,5Aa
4	126 ± 9,89Ba	590,67 ± 55,5Ab	6,7 ± 0,28Aa	9,13 ± 0,8Ab	355 ± 7,07Aa	718,00 ± 186,3Aa

• Letras maiúsculas iguais na mesma coluna indicam médias sem diferença significativa (p<0,05). Letras minúsculas iguais na mesma linha indicam médias sem diferença significativa.

Loste et al.⁽¹⁴⁾ avaliaram as concentrações de frutosamina, em cães com diabetes e cães com insulinoma, pelo método cinético de redução do azul de nitrotetrazólio (NBT) e encontraram médias de 454,85 µmol/L para cães diabéticos e 202,8 µmol/L para cães com insulinoma. Este valor obtido para cães com DM é inferior ao encontrado neste estudo, com média de 687 µmol/L. Os estudos apontaram valores distintos, provavelmente pela gravidade do quadro de diabetes dos cães deste estudo, em que a maioria evoluiu ao óbito, o que consequentemente elevou os resultados da frutosamina.

Sako et al.⁽¹⁵⁾ observaram que valores de frutosamina acima de 300 µmol/L estão associados a controle glicêmico inadequado pelo tratamento com insulina. Como observado neste estudo, todos os animais que vieram à óbito apresentavam dosagem de frutosamina muito acima deste valor. No entanto, o intervalo encontrado em 100 cães não diabéticos para a frutosamina foi de 273,51 - 382,29 µmol/L, o que engloba o valor descrito por Sako et al.⁽¹⁵⁾ como limite para se avaliar a eficácia de um tratamento. Acredita-se que esta diferença se deva à metodologia empregada por aqueles pesquisadores, os quais utilizaram um método enzimático (FOD–TOOS). Davison et al.⁽¹⁶⁾ encontraram valores de frutosamina em cães não diabéticos abaixo de 300 µmol/L, e descrevem que cães com tratamento insulínico adequado possuem valores inferiores a 400 µmol/L. Nos três cães em que foi possível fazer o monitoramente completo do tratamento, houve redução média da frutosamina a 355 µmol/L, o que corrobora os resultados de Davison et al.⁽¹⁶⁾.

Wood E Smith⁽¹⁷⁾ relataram valores de hemoglobina glicada de 4,97% para cães não diabéticos e 9,63% para cães diabéticos, pela técnica de cromatografia em coluna, valores estes que foram semelhantes aos encontrados neste estudo, com resultados médios de hemoglobina glicada de 6,2% para cães não diabéticos e 10,3% para cães com DM.

A DM apresenta uma complicação grave em cães, que é a cetoacidose diabética, caracterizada por alterações metabólicas extremas como hiperglicemia, acidose metabólica, acetonemia, desidratação e perda de eletrólitos⁽¹⁸⁾. Concentrações de hemoglobina glicada persistentemente acima dos níveis normais estão associadas a risco maior de complicações crônicas⁽¹⁹⁾. Este aumento da hemoglobina glicada foi observado nos cães deste estudo que apresentaram cetoacidose e que evoluíram a óbito, o que demonstra que esta enzima é mais precisa na detecção de complicações potencialmente fatais da DM.

Conclusão

A avaliação inicial de cães com DM deste estudo demonstrou valores médios de glicose de 494,2 md/dL, hemoglobina glicada de 10,3% e frutosamina de 687 µmol/L antes do tratamento com insulina. Altos valores de hemoglobina glicada e a frutosamina relacionam-se com agravamento causado pelas complicações da DM, relacionados diretamente com mau prognóstico, devendo ser utilizadas tanto para diagnóstico como monitoramento da condição clínica do paciente.

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Datas de Publicação

• Publicação nesta coleção
  Oct-Dec 2015

Histórico

• Recebido
  10 Dez 2013
• Aceito
  17 Ago 2015