Avaliação microbiológica de polpas de frutas congeladas

Microbiological evaluation of frozen fruit pulps

Avaliação microbiológica de polpas de frutas congeladas

Microbiological evaluation of frozen fruit pulps

Cristina Auler do Amaral Santos^I; Ana Flavia Santos Coelho^II; Solange Cristina Carreiro^I,*

^ILaboratório de Microbiologia e Bioprocessos, Universidade Federal do Tocantins – UFT, Av. NS 15, ALCNO 14, s/n, bloco II, sala 4, CEP 77020-210, Palmas - TO, Brasil, E-mail: [e-mail]

^IILaboratório de Microbiologia de Alimentos, Universidade Federal do Tocantins – UFT

RESUMO

Foram analisadas 98 amostras de polpas de frutas congeladas de 8 sabores diferentes, comercializadas em uma feira livre da cidade de Palmas-TO. Foram determinados o pH das polpas, Número Mais Provável de coliformes totais e termotolerantes (NMP.g^–1) e Unidades Formadoras de Colônia de bolores e leveduras (UFC.g^–1). O pH médio das polpas variou entre 2,5 e 4,8. Apenas 5 amostras (4,3%) apresentaram resultados positivos para coliformes totais e duas confirmaram a presença de coliformes termotolerantes e E. coli, com valores entre 0,3 e 0,9 NMP.g^–1. Noventa por cento das amostras apresentaram contaminação por bolores e leveduras, sendo que as contagens variaram de < 10 até 6,2 x 10⁴ UFC.g^–1. Dentre as amostras que apresentaram bolores e leveduras, 29,6 % não se enquadraram nos padrões estabelecidos pela legislação em vigor.

Palavras-chave: polpas de frutas; qualidade; coliformes; bolores; leveduras.

ABSTRACT

Ninety-eight frozen pulps samples of eight different flavors commercialized in the city of Palmas, State of Tocantins, Brazil, were submitted to pH and microbiological analysis. The microbiological analysis included counts for total and termotolerant coliforms (MPN.g^–1) and the determination of moulds and yeasts (CFU.g^–1). The pH was rate was 2.5 and 4.8. Five samples (4.3%) showed coliform contamination and two of them presented E. coli showing values between 0.3 and 0.9 MPN.g^–1. 90% of the samples showed levels of moulds and yeast ranging from <10 to 6,2 x 10⁴ CFU.g^–1. Among them, 29.6% of the samples were considered unacceptable for consumption according to the legislation.

Keywords: fruit pulps; coliforms; quality; moulds; yeasts.

1 Introdução

O Brasil é o maior produtor mundial de frutas in natura, porém, por serem perecíveis, grande parte dessas frutas sofre deterioração em poucos dias, tendo sua comercialização dificultada, especialmente a longas distâncias. A produção de polpas de frutas congeladas tem se destacado como uma importante alternativa para o aproveitamento dos frutos durante a safra, permitindo a estocagem das polpas fora da época de produção dos frutos in natura (BRUNINI; DURIGAN; OLIVEIRA, 2002).

Segundo a legislação brasileira do Ministério da Agricultura, polpa é o produto não fermentado, não concentrado ou diluído, obtido pelo esmagamento de frutos polposos (BRASIL, 2000). Além disso, devem ser preparadas com frutas sãs, limpas, isentas de matéria terrosa, de parasitas e detritos de animais ou vegetais. Não deverão conter fragmentos das partes não comestíveis da fruta, nem substâncias estranhas à sua composição normal, devendo ser observada também a presença ou ausência de sujidades, parasitas e larvas (SANTOS et al., 2004).

A maior parte da microbiota presente nas frutas reside em sua parte externa, sendo o seu interior praticamente estéril, a menos que haja uma ruptura em alguma parte da casca. As frutas e seus derivados são em geral alimentos ácidos e a elevada acidez restringe a microbiota deterioradora, especialmente os microrganismos patogênicos. A microbiota normalmente presente constitui-se em bolores, leveduras, bactérias lácticas e outros microrganismos ácido tolerantes como bactérias acéticas, Zymomonas e algumas espécies de Bacillus (SIQUEIRA; BORGES, 1997). A microbiota que contamina os produtos de frutas é normalmente proveniente das condições da matéria-prima e da lavagem à qual estas são submetidas, além das condições higiênico-sanitárias dos manipuladores, equipamentos e ambiente industrial em geral.

A ANVISA, através da Instrução Normativa nº 12 de 10/09/99, regulamentou os padrões de identidade e as características mínimas de qualidade para polpas de frutas destinadas ao consumo como bebida, estabelecendo valores máximos de 1 NMP.g^–1 de coliformes e 5 x 10³ UFC.g^–1 de bolores e leveduras. A resolução RDC nº 12, de 02/01/2001, que estabelece os padrões microbiológicos para alimentos, estabelece valor máximo de 10² UFC.g^–1 para coliformes termotolerantes, porém não estabelece padrões para bolores e leveduras.

Atualmente, o mercado de polpas tem apresentado expressivo crescimento, com grande potencial mercadológico, especialmente pela variedade de frutas e sabores agradáveis. Porém, a grande variedade de sabores não contemplados na legislação, aliado ao crescimento do mercado informal, podem levar à comercialização de produtos sem uniformidade e sem controle sanitário adequado.

O objetivo do presente trabalho foi avaliar as características microbiológicas de diferentes polpas de frutas congeladas comercializadas em uma feira livre da cidade de Palmas - TO, através da análise de microrganismos do grupo coliformes, pesquisa de Escherichia coli e contagem de bolores e leveduras.

2 Material e métodos

2.1 Obtenção das amostras

Foram analisadas 98 amostras de 8 polpas de diferentes frutos, sendo 9 amostras de açaí, 11 amostras de acerola, 12 de bacuri, 12 de caju, 13 de cupuaçu, 12 de maracujá, 13 de murici e 16 de tamarindo. As polpas foram adquiridas de dois produtores em uma feira livre da cidade de Palmas - TO entre agosto de 2005 e junho de 2006, e mantidas em caixa térmica até seu processamento.

2.2 Preparo das amostras

Determinação do pH das amostras

Foram pesadas 10 g de cada amostra e diluídas em 90 mL de água destilada. Após a homogeneização, o pH das amostras foi determinado em potenciômetro modelo HI 255 Combine Meter, Hanna Instruments. Foram realizadas pelo menos 4 medidas de pH para cada amostra, sendo o valor final dado pela média aritmética simples das medidas. Os valores de pH foram avaliados estatisticamente quanto à análise de variância, e a comparação das médias, pelo teste de Tukey a 5% de significância, com uso do software Sisvar (2000).

Análises microbiológicas

Após as amostras terem sido degeladas em temperatura ambiente, foram pesadas 25 g de cada amostra e transferidas assepticamente para frascos contendo 225 mL de água peptonada estéril (diluição 10^–1). A partir dessa diluição, foram feitas as diluições seriadas até 10^–3 com o mesmo diluente.

2.3 Determinação do número mais provável (NMP.g ^–1 ) de coliformes totais e termotolerantes

Alíquotas de 1 mL de cada diluição foram inoculadas em séries de três tubos contendo 9 mL de caldo Lauril Sulfato Triptose (LST), com tubo de Duhran invertido (teste presuntivo). Os tubos foram incubados a 35 °C por 24-48 horas. A partir dos tubos com leitura positiva (turvação e formação de gás), foram realizados os testes confirmativos para coliformes totais em caldo Lactose Bile Verde Brilhante (VB) a 35 °C por 24-48 horas e coliformes termotolerantes em caldo Escherichia coli (EC) a 45,5 °C por 24 horas.

Os valores de NMP.g^–1 foram calculados de acordo com Silva et al. (2001).

2.4 Determinação de Escherichia coli

Para confirmação da presença de Escherichia coli, uma alçada de tubos contendo caldo EC que apresentavam turbidez, com ou sem produção de gás no interior do tubo de Durhan, foi semeada em placas de Petri contendo Ágar Eosina Azul de Metileno (EMB). As placas foram incubadas a 35 °C por 24-48 horas.

2.5 Determinação de bolores e leveduras

Para contagem de bolores e leveduras, foi utilizado o método de plaqueamento direto em superfície das diluições 10^–1 e 10^–2, em meio Ágar Batata Dextrose acrescido de 0,2 mg.mL^–1 de cloranfenicol. Alíquotas de 100 µL foram semeadas na superfície do Ágar BD e as placas foram incubadas a 22 ºC por 3 a 5 dias. Os resultados foram expressos pelo número de Unidades Formadoras de Colônia por grama de material (UFC.g^–1).

3 Resultados e discussão

A Tabela 1 mostra os valores médios de pH obtidos para cada polpa e as contagens de coliformes totais e termotolerantes, pesquisa de E. coli, e contagens para bolores e leveduras. Os valores médios de pH das polpas ficaram entre 2,5, para as polpas de tamarindo, e 4,8, para as polpas de açaí, mostrando-se ligeiramente superiores aos encontrados por Lima et al. (2001), que obtiveram valores de 1,8 e 4,0, respectivamente.

Os resultados obtidos nas contagens de coliformes totais demonstraram que apenas 5 amostras (4,3 %) apresentaram resultados positivos para coliformes totais, sendo 3 de maracujá, 1 de caju e 1 de açaí. Dentre elas, 2 (1 de açaí e 1 de maracujá) confirmaram a presença de coliformes termotolerantes e E. coli, com valores entre 3 x 10¹ e 9 x 10¹ NMP.g^–1, estando dentro dos padrões estabelecidos pelo regulamento técnico RDC nº 12, de 02/01/2001 que preconiza valor máximo de 10² NMP.g^–1 (BRASIL, 2001). O baixo valor de pH apresentado pela maioria das polpas pode representar um fator limitante para o crescimento de bactérias patogênicas, mantendo os índices de contaminação bacteriana em níveis baixos. Contaminação por coliformes totais e termotolerantes em polpa de maracujá também foi encontrada por Leite et al. (2000) e Lima et al. (2001), estando, provavelmente, associada à manipulação inadequada durante o processamento da matéria-prima, ou à contaminação de equipamentos.

Oitenta e oito amostras (89,8%) apresentaram contaminação por bolores e leveduras, sendo que as contagens variaram de <10 até 6,2 x 10⁴ UFC.g^–1. Tal fato pode ser parcialmente atribuído ao elevado teor de carboidratos normalmente presentes nas polpas de frutas, além do caráter ácido das polpas. Embora o baixo pH favoreça o desenvolvimento desses microrganismos, não houve uma relação direta entre o pH e uma maior ou menor contagem de bolores e leveduras nas diferentes polpas. Dentre as polpas que apresentaram contaminação por bolores e leveduras, 29 (29,6%) não se enquadraram nos padrões estabelecidos pela Instrução Normativa 12 de 10/09/99, a qual preconiza um máximo de 5 x 10³ UFC.g^–1.

Nascimento et al. (1999), ao estabelecerem o perfil microbiológico de polpas produzidas e comercializadas na cidade de São Luís – MA, constataram que 100% das amostras apresentaram contaminação por bolores e leveduras, apresentando contagens entre 1,0 x 10⁵ e 1,1 x 10⁸ UFC.g^–1. Hoffmann et al. (1997), Feitosa et al. (1999), Leite et al. (2000) e Lima et al. (2001), analisando a qualidade microbiológica de polpas comercializadas nos Estados de São Paulo, Paraíba, Pernambuco, Bahia e Ceará, observaram a presença de bolores e leveduras, encontrando valores entre <10 e 7,8 x 10⁵ UFC.g^–1, dados que concordam com aqueles obtidos no presente trabalho.

Segundo Franco e Landgraf (2003), baixas contagens de bolores e leveduras são consideradas normais (não significativas) em alimentos frescos e congelados. No entanto, contagens elevadas representam, além do aspecto deteriorante, que pode levar inclusive à rejeição do produto, um risco à saúde pública devido à possível produção de micotoxinas por algumas espécies de bolores.

Apesar de 70,4% das amostras apresentarem-se dentro dos padrões microbiológicos para bolores e leveduras e apenas 2 amostras apresentarem-se em desacordo com relação a coliformes termotolerantes, as elevadas contagens de bolores e leveduras, associadas com a presença de bactérias do grupo coliformes, reforçam a hipótese de processamento inadequado e/ou recontaminação pós-processamento, o que pode ser explicado pela qualidade insatisfatória da matéria-prima, manipulação inadequada e equipamento sujo ou com sanitização insatisfatória.

4 Conclusões

Os dados obtidos no presente trabalho mostraram que as polpas analisadas se encontram dentro dos padrões estabelecidos pela legislação vigente com relação a coliformes totais e termotolerantes, porém 29,6% das amostras apresentaram valores acima do permitido para bolores e leveduras. Esses resultados sugerem uma falta de controle sanitário, evidenciando que as condições higiênicas durante o processamento, operações de limpeza, escolha de matérias-primas e condições de armazenamento não devem estar de acordo com as boas práticas de fabricação (BPF).

Agradecimentos

Os autores agradecem ao Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) a concessão da bolsa de iniciação científica à primeira autora.

Recebido para publicação em 16/7/2007

Aceito para publicação em 4/3/2008 (002682)

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• BRASIL. MINISTÉRIO DA AGRICULTURA DO ABASTECIMENTO. Instrução Normativa nº 01/00, de 07/01/00. Regulamento técnico geral para fixação dos padrões de identidade e qualidade para polpa de fruta. Diário Oficial da República Federativa do Brasil, Brasília, DF, 10 jan. 2000, Seção I, p.54-58.
• BRASIL. AGÊNCIA NACIONAL DE VIGILÂNCIA SANITÁRIA. Resolução RDC nº 12, de 02/01/2001. Regulamento Técnico sobre padrões microbiológicos para alimentos. Diário Oficial da República Federativa do Brasil, Brasília, DF, 10 jan. 2001, Seção I, p. 45-53.
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A quem a correspondência deve ser enviada

Datas de Publicação

• Publicação nesta coleção
  06 Fev 2009
• Data do Fascículo
  Dez 2008

Histórico

• Recebido
  16 Jul 2007
• Aceito
  04 Mar 2008