Ausência de efeito do captopril no metabolismo de uma emulsão lipídica artificial semelhante aos quilomícrons em pacientes hipertensos e hipercolesterolêmicos

Resumos

OBJECTIVE: To assess the effect of captopril, an angiotensin-converting enzyme inhibitor, on the metabolism of chylomicrons and their remnants and the possible alterations in the concentrations of plasma lipids caused by the drug in hypertensive hypercholesterolemic individuals. METHODS: The metabolism of chylomicrons was tested with the method of artificial lipid emulsion of chylomicrons labeled with ³H-cholesteryl oleate. The emulsion was injected intravenously in 10 patients with mild-moderate arterial hypertension before and 45 days after treatment with captopril (50 mg/day). After injection, blood samples were collected during 60 minutes at pre-established time intervals for determining the decay curve, the fractional catabolic rate (FCR in min-1), and the plasma residence time of the artificial lipid emulsion by analyzing different compartments. The plasma concentrations of the lipids were also assessed before and after treatment. RESULTS: The fractional catabolic rate (min-1) of the lipid emulsion before and after treatment with captopril (0.012±0.003 and 0.011±0.003, respectively; p=0.85, n.s.) and the plasma residence time of the emulsion (83.3±20.8 and 90.9±22.5 min, n.s.) did not change, but the total cholesterol and LDL-C levels decreased by 7% and 10%, respectively (p=0.02). The concentrations of HDL-C, triglycerides, Lp(a), and apolipoproteins AI and B did not change. CONCLUSION: Treatment with captopril, evaluated with the artificial lipid emulsion method, does not cause deleterious changes in the metabolism of chylomicrons and their remnants.

captopril; chylomicrons; lipoproteins; metabolism

ARTIGO ORIGINAL

Ausência de efeito do captopril no metabolismo de uma emulsão lipídica artificial semelhante aos quilomícrons em pacientes hipertensos e hipercolesterolêmicos

Renato J. Alves; Jayme Diament; Rosângela F. Amâncio; Neusa Forti; Raul C. Maranhão

São Paulo, SP

Laboratório de Metabolismo de Lípides do InCor da Faculdade de Medicina da USP e Faculdade de Ciências Farmacêuticas da USP.

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RESUMO

OBJETIVO: Avaliar o efeito do captopril, sobre o metabolismo dos quilomícrons e de seus remanescentes e as possíveis alterações nas concentrações dos lípides plasmáticos em hipertensos e hipercolesterolêmicos.

MÉTODOS: O metabolismo dos quilomícrons foi testado pelo método da emulsão lipídica artificial de quilomícrons marcada com 3H-oleato de colesterol, foi injetada intravenosamente em 10 pacientes com hipertensão arterial leve-moderada antes e após 45 dias de tratamento com captopril (50 mg/dia). Após injeção, foram coletadas amostras de sangue durante 60min em intervalos de tempo pré-estabelecidos para determinar a curva de decaimento e a taxa fracional de remoção (TFR em min-1), bem como o tempo de residência no plasma, da emulsão lipídica artificial, por análise compartimental. As concentrações dos lípides do plasma também foram avaliadas antes e após o tratamento.

RESULTADOS: A taxa fracional de remoção (em min-1) da emulsão lipídica antes e após o tratamento com captopril (0,012±0,003 e 0,011±0,003, respectivamente; p=0,85, n.s.) ou o tempo de permanência da emulsão no plasma (83,3±20,8 e 90,9± 22,5 min, n.s.) não se alteraram, mas os níveis de colesterol total e de LDL-c reduziram-se em 7% e 10% respectivamente (p=0,02). As concentrações de HDL-c, triglicérides, Lp(a) e apolipoproteínas AI e B não se modificaram.

CONCLUSÃO: O tratamento com captopril, avaliado pelo método da emulsão lipídica artificial, não provoca alterações deletérias no metabolismo dos quilomícrons e seus remanescentes.

Palavras chave: captopril, quilomícrons, lipoproteínas, metabolismo

O tratamento com alguns agentes anti-hipertensivos pode provocar alterações indesejáveis no perfil lipídico, atenuando seus efeitos benéficos anti-aterogênicos na redução da pressão arterial. Os efeitos dos anti-hipertensivos no perfil lipídico variam tanto na classe farmacológica, quanto no fármaco especificamente. Diuréticos tiazídicos, como a hidroclorotiazida e a clortalidona, e beta-bloqueadores não cardiosseletivos e sem atividade simpaticomimética intrínseca, como o propranolol, são os principais agentes deletérios ao perfil lipídico^1,2. Entre as alterações causadas por esses agentes estão o aumento nos níveis de triglicérides e redução de HDL-c. Por outro lado, inibidores da enzima de conversão da angiotensina (ECA), como o captopril, parecem ter efeito neutro no perfil lipídico, ou mesmo, melhorá-lo em hipertensos hipercolesterolêmicos, por meio de redução dos valores de LDL-c e de colesterol total³.

Os quilomícrons são as lipoproteínas plasmáticas responsáveis pelo transporte dos lípides da dieta absorvidos pelo intestino. Possuem a mesma via metabólica das VLDL produzidas pelo fígado. Semelhante às VLDL, os quilomícrons são submetidos à ação da enzima lipase lipoprotéica na parede dos capilares. Esta enzima é estimulada pela apolipoproteína (apo) CII, uma das apos presente na superfície dos quilomícrons. Os triglicérides das partículas de quilomícrons sofrem hidrólise pela lipase lipoproteica, transformando-se em ácidos graxos e glicerol, que serão captados pelos tecidos muscular e adiposo, onde serão armazenados após reesterificação.

Após sofrer processo de lipólise, os quilomícrons dão origem a partículas menores, os remanescentes de quilomícrons. Estas partículas são seqüestradas no espaço de Disse e captadas por células hepáticas, através de receptores específicos, entre os quais os receptores de LDL e a proteína relacionada ao receptor de LDL (LRP)4. A apo E funciona como o principal ligante dos remanescentes de quilomícrons aos receptores hepáticos⁵.

Os remanescentes de quilomícrons são considerados lipoproteínas aterogênicas e sua remoção mais lenta está diretamente relacionada com a doença arterial coronariana⁶. A avaliação deste metabolismo é importante para o completo entendimento do metabolismo lipídico em hipertensos em uso de um determinado agente farmacológico. Além disso, os efeitos dos anti-hipertensivos no metabolismo dos quilomícrons têm sido raramente investigados, devido dificuldade metodológica.

Neste estudo, os efeitos do captopril, na remoção dos remanescentes de quilomícrons da circulação, foram avaliados em um grupo de portadores de hipertensão arterial leve-moderada e concomitante hipercolesterolemia, condição patológica muito comum; nesta, não só o controle da pressão arterial é importante para reduzir o risco aterosclerótico, mas também o controle da hipercolesterolemia e o aparecimento de outras condições pró-aterogênicas, como as alterações no metabolismo das lipoproteínas ricas em triglicérides e retenção dos remanescentes de quilomícrons. O metabolismo intravascular dos quilomícrons foi avaliado pela remoção plasmática de uma emulsão lipídica artificial rica em triglicérides, que simula o comportamento intravascular dos quilomícrons. A emulsão, marcada com oleato de colesterol radioativo (3H-CO) e injetada intravenosamente após 12h de jejum, reflete a cinética plasmática dos remanescentes de quilomícrons⁶, método que facilita o estudo metabólico destas lipoproteínas em seres humanos, ultrapassando o componente gastrointestinal e não sendo afetado pela variabilidade individual da absorção intestinal. Esta emulsão lipídica artificial tem sido usada para revelar distúrbios do metabolismo dos quilomícrons em diversas doenças^7,8,9 e investigar efeitos de drogas hipolipemiantes neste metabolismo^10,11.

Métodos

Foram avaliados 10 indivíduos (8 mulheres) com hipertensão arterial leve-moderada, idade 60,7 ± 2,2 anos, colesterolemia > 240 mg/dL, triglicérides < 200 mg/dL e glicemia de jejum < 110 mg/dL. A Tabela I mostra as características dos pacientes. O tratamento anti-hipertensivo foi interrompido 30 dias antes do estudo e o diagnóstico de hipertensão arterial baseou-se no VI Joint National Committee¹².

Os critérios de exclusão eram: doença arterial coronariana; diabetes mellitus; mulheres na pré-menopausa; alcoolismo; disfunção renal, hepática ou tireoideana; doença inflamatória aguda e neoplasia. Nenhum paciente recebeu terapia de reposição hormonal ou terapia hipolipemiante nos 6 meses que precederam o estudo.

Os pacientes submeteram-se ao tratamento com captopril por 45 dias, na posologia de 25 mg em duas tomadas diárias (50 mg/dia). A cinética plasmática da emulsão lipídica e a determinação dos lípides e apolipoproteínas do plasma foram realizados antes e após a terapêutica com captopril.

O protocolo foi aprovado pela comissão científica e de ética do Instituto do Coração do Hospital das Clínicas da Facildade de Medicina da Universidade de São Paulo e um consentimento escrito foi obtido de todos os participantes do estudo.

Colesterol total e triglicérides foram determinados pelo método colorimétrico enzimático (CHOD-PAP), Boeringher e Abbott respectivamente. Apolipoproteínas AI e B por imunodifusão radial (Boeringher) e Lp(a) por imunoturbidimetria.

O metabolismo dos quilomícrons foi avaliado pelo método da emulsão lipídica artificial marcada com 3H-oleato de colesterol. O clearance do oleato de colesterol reflete a remoção plasmática das partículas da emulsão marcadas com o radioisótopo, enquanto o "clearance" da trioleína reflete o processo lipolítico.

A emulsão lipídica foi preparada por irradiação ultrassônica da mistura de lípides composta por 69% de trioleína, 6% de oleato de colesterol, 23% de fosfolípides e 2% de colesterol livre em meio aquoso, com adição de 3H-oleato de colesterol, seguido por ultracentrifugação em gradiente de densidade salina, como descrito previamente¹³. Após, a emulsão foi esterilizada através da passagem por um filtro de 0,2 mm. Cerca de 3 a 5 mg da emulsão lipídica em um volume de aproximadamente 100 a 200 mL, contendo 4mci de oleato de colesterol, marcada com trício (3H-CO), foi injetada intravenosamente em bolus e amostras de sangue foram coletadas nos intervalos de tempo pré-estabelecidos.

Alíquotas de 1,0 mL de plasma foram pipetadas em frascos de cintilação. Acrescentou-se a esses frascos, 7,0 mL de solução cintiladora PPO/POPOP/tritonX-100/tolueno (0,5g: 0,5g: 333 mL:/ 667mL) para a determinação da radioatividade presente nas amostras, utilizando-se um contador Beta (Packard, modelo 1660 TR, EUA).

Amostras de sangue foram colhidas durante 60min, com intervalos de tempo pré-estabelecidos de 2,4,6,10,15,20,30,45 e 60min. A curva de decaimento plasmático da radioatividade residual da emulsão foi determinada antes e após o tratamento com captopril, em função do tempo. A taxa fracional de remoção do éster de colesterol (TFR-CE), em min-1, que representa a fração da partícula que é removida do compartimento plasmático, foi calculada por análise compartimental, com auxílio de um programa computacional (AnaComp 4.1) desenvolvido para análise da cinética de emulsões artificiais¹⁴.

A cinética foi expressa tanto em TFR como em tempos de residência no plasma, calculados por meio de 1/TFR. No modelo utilizado, demonstrado na figura 1, foi avaliada a cinética plasmática dos componentes lipídicos radioativos. A partir desse modelo e com base no método dos mínimos quadrados não linear, foram calculadas as TFR(K) do lípide marcado entre os compartimentos. Nesta figura, o compartimento número 1 representa a emulsão marcada com 3H-CE, introduzida no espaço intravascular; o K1,0 representa a fração da emulsão que é retirada do compartimento plasmático por via não específica; o K1,2 a fração da emulsão que sofre ação da enzima lipase lipoprotéica, se transformando no remanescente de quilomícron, o qual é representado pelo compartimento 2; o K2,0 a fração do remanescente de quilomícron que é removida do compartimento plasmático, principalmente por captação hepática.

A curva experimental do decaimento plasmático da radioatividade do 3H-oleato de colesterol foi obtida colocando-se os valores brutos e percentuais da radioatividade residual plasmática em um gráfico em função do tempo, por meio dos intervalos pré-estabelecidos acima. O resultado mostrou aspecto biexponencial da curva, que se caracteriza por queda rápida da radioatividade residual, o que representa a remoção rápida das partículas. Após essa queda rápida, segue-se um decaimento plasmático mais lento. Por fim, há uma tendência a uma forma de platô da curva, ou até discreta elevação, indicando que os componentes radioativos reciclam incorporados nas VLDL recentemente sintetizadas no fígado.

O teste de Wilcoxon foi usado para comparação da TFR-CE, pressão arterial e valores dos lípides do plasma antes e após a terapêutica com captopril. Valores de p<0,05 foram considerados significantes, adotando-se um intervalo de confiança de 95%.

Resultados

A tabela I mostra que o tratamento com captopril reduziu os níveis de colesterol total e LDL-c em 7% e 10% respectivamente (p=0,02). Contudo, esta terapêutica não modificou os valores de HDL-c, triglicérides, Lp(a) e apolipoproteínas AI e B.

A figura 2 exibe as curvas de decaimento plasmático da radioatividade da emulsão lipídica, obtidas antes e após do tratamento com captopril. Não há diferença nas duas curvas.

A TFR-CE e os tempos de residência no plasma, como demonstrado na tabela I, não se alteraram após o tratamento (p=0,85).

Discussão

A hipertensão arterial é um dos mais importantes fatores de risco para a aterosclerose e a doença arterial coronariana, e seu tratamento tem se mostrado benéfico na prevenção destas patologias. Como a dislipidemia está freqüentemente associada à hipertensão arterial e também é um forte preditor de risco para a doença arterial coronariana, é válido assumirmos que fármacos anti-hipertensivos não devam trazer efeitos indesejáveis ao perfil lipídico.

Neste estudo, utilizando-se o teste da emulsão lipídica artificial, demonstramos que o tratamento com um inibidor da ECA (captopril), em pacientes hipertensos e hipercolesterolêmicos e, portanto, com maior predisposição à aterosclerose, não provoca retenção dos remanescentes de quilomícrons (partículas aterogênicas) na circulação. Semelhante aos quilomícrons secretados na linfa pelo intestino, o metabolismo da emulsão consiste de duas etapas: 1) lipólise pela enzima lípase lipoproteica; 2) remoção dos remanescentes de quilomícrons pelo fígado. O colesterol esterificado da emulsão, que reproduz a cinética plasmática das partículas da emulsão, permanece no interior da partícula no compartimento plasmático¹⁵, enquanto os triglicérides são continuamente removidos das partículas da emulsão por ação da lipase lipoproteica, refletindo o processo lipolítico¹⁶. Neste trabalho, devido à marcação radioativa ter sido feita apenas no éster de colesterol da emulsão, mas não nos triglicérides, o processo lipolítico não foi estudado. Porém, a dupla marcação não seria necessária: quando a lipólise está diminuída, as partículas da emulsão, semelhante aos quilomícrons da linfa, são removidas mais lentamente. Um eficiente processo de lipólise é necessário para uma eficaz remoção do plasma^10,15,16. Como não houve diferença entre a cinética plasmática do éster de colesterol da emulsão, podemos assumir que a lipólise também não se alterou com o tratamento.

É importante ressaltar que em pacientes normolipidêmicos com doença arterial coronariana, a remoção dos quilomícrons do plasma está atenuada^6,17,18. O papel dos remanescentes de quilomícrons na aterogênese tem sido investigado¹⁹ e a lipemia pós-prandial foi associada com a doença arterial coronariana em humanos, através do teste de sobrecarga oral de gordura. Simpson e cols.²⁰, Groot e cols.¹⁷ e Patsch e cols.²¹ registraram aumento da concentração de triglicérides pós-prandial e/ou vitamina A em pacientes com doença arterial coronariana. Simons e cols.¹⁸ registraram elevação de apoB48 em coronariopatas. Retinil éster e apoB48 (forma de apoB encontrada nos quilomícrons) são usados como marcadores de quilomícrons na circulação. Maranhão e cols.⁶, utilizando a mesma emulsão lipídica empregada neste estudo para avaliar o metabolismo de quilomícrons, encontraram remoção diminuída da circulação de ambos, éster de colesterol e triglicérides, indicando que tanto a lipólise quanto a remoção dos remanescentes estão diminuídas nos pacientes que desenvolvem a doença arterial coronariana.

Previamente, Iaina e cols.²² demonstraram que a área sob a curva da concentração plasmática pós-prandial do retinil éster, usado como marcador dos remanescentes de quilomícrons, foi reduzido após 25 a 75 mg/dia de captopril durante 3 meses. Esse achado sugere que a retenção de remanescentes de quilomícrons no plasma diminuiu após o tratamento com captopril. Esse efeito é possivelmente anti-aterogênico, como sugerido pela associação entre doença arterial coronariana e remoção reduzida de remanescentes ^6,17,19. Em nosso estudo, embora o uso de captopril não promovesse remoção mais rápida dos remanescentes de quilomícrons, a observação de que a droga não altera a cinética dos remanescentes evidencia a segurança deste fármaco em relação ao metabolismo de quilomícrons. Adicionalmente, e como em outros estudos, esta terapêutica resultou em redução dos níveis de LDL-c, efeito anti-aterogênico muito bem documentado. O fato do captopril não alterar os valores de triglicérides, HDL-c e Lp(a) também evidencia que este agente não é deletério ao perfil lipídico.

As diferenças encontradas entre nossos resultados e aqueles por Iaina e cols.²² podem ser atribuídos ao fato dos pacientes deste estudo serem hipercolesterolêmicos e não diabéticos. Naquele estudo, os indivíduos supostamente apresentavam resistência insulínica, como sugerido pelos níveis de glicose do plasma, que melhorou com o tratamento com captopril. Em nosso estudo, pacientes com glicemia em jejum > 110 mg/dL eram excluídos.

Os prováveis mecanismos implicados na apresentação destes resultados residem, primeiramente, no fato dos receptores de LDL, que se mostram defeituosos em presença de hipercolesterolemia, também serem os responsáveis pela remoção dos remanescentes de quilomícrons da circulação. Em segundo lugar, a ação da enzima enzima lipase lipoprotéica, resultando na geração dos remanescentes, também influencia a remoção dos quilomícrons, e sua função é dependente dos níveis de insulina^23,24. Naquele estudo, a queda da resistência insulínica, alcançada pelo uso de captopril, poderia ter ocasionado a melhora na depuração do retinil palmitato.

Em conclusão, neste trabalho, o captopril, na posologia de 50 mg/dia, administrado a pacientes hipertensos e hipercolesterolêmicos, não alterou o metabolismo dos quilomícrons e seus remanescentes nem provocou alterações prejudiciais nos lípides plasmáticos e apolipoproteínas AI e B.

Recebido para publicação em: 07/08/2003

Aceito em: 05/05/2004

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Datas de Publicação

• Publicação nesta coleção
  07 Jan 2005
• Data do Fascículo
  Dez 2004

Histórico

• Aceito
  05 Maio 2004
• Recebido
  07 Ago 2003