Reação de cultivares de alface a Thielaviopsis basicola

Lettuce reaction to black root rot caused by Thielaviospsis basicola

COMUNICAÇÃO CIENTÍFICA

Reação de cultivares de alface a Thielaviopsis basicola

Lettuce reaction to black root rot caused by Thielaviospsis basicola

Fernando C Sala^I; Cyro P da Costa^II; Liliane de D Teixeira^II; Eliane G Fabri^III; Sally F Blat^IV

^ITecnoseed, Av. 21 de abril 1432, 98700-000 Ijuí-RS

^IIUSP/ESALQ, C. Postal 9, 13418-900 Piracicaba-SP

^IIIInstituto Agronômico Campinas, C. Postal 28, 13012-970 Campinas-SP

^IVAPTA-Regional Centro Leste, C. Postal 271, 14001-970 Ribeirão Preto-SP; [e-mail]

RESUMO

A alface é a folhosa de maior importância no Brasil. O presente trabalho visou determinar a reação de cultivares de alface à murchadeira provocada pelo fungo Thielaviopsis basicola, na fase juvenil. Um experimento foi conduzido em casa-de-vegetação em delineamento inteiramente casualizado, em esquema fatorial 37 x 2 (cultivares, com e sem inoculação), com três repetições. Mudas com 30 dias foram transplantadas para bandejas de 128 células preenchidas com 1/3 de substrato colonizado com 7,5 x 10⁵ conídios/g de substrato. Logo após o transplante, inoculou-se 3 mL de suspensão de esporos de concentração 2 x 10⁶ conídios/mL, próximo ao colo de cada planta. A reação do hospedeiro ao patógeno e sua avaliação foi realizada utilizando escala de nota de 1 (ausência de sintomas) a 5 (mais de 90% das raízes afetadas), com base na severidade da doença. Cultivares do tipo crespa e batavia foram todas resistentes. Cultivares do tipo americana e lisa apresentaram variação inter-varietal quanto à reação da hospedeira ao patógeno.

Palavras-chave:Lactuca sativa L., Chalara elegans, podridão negra das raízes, tipos varietais de alface.

ABSTRACT

Lettuce is the most important leafy crop in Brazil. The varietal reaction of four lettuce types to lettuce black root rot (LBRR) caused by Thielaviopsis basicola at the juvenile stage were determined. The trial was carried out in controlled greenhouse conditions and arranged in completely randomized design, in a 37 x 2 (cultivars with and without inoculation) cheme with three replications. 30-day old seedlings were transplanted to styrofoam tray of 128 cells filled with 1/3 of colonized substrate with 7,5 x 10⁵ conidia/g of substrate. After transplant, seedlings were reinoculated with a spore suspension with 2 x 10⁶ conidia/mL poured next to the seedling stem. Host reaction to the pathogen and its evaluation were performed according to a severity scale from 1 (absence of symptoms) to 5 (more than 90% of rotted roots). Lettuce cultivars belonging to the loose leaf and batavia types were all resistant to LBRR. Cultivars of iceberg lettuce and butterhead types presented inter-varietal reactions being, some resistant and others susceptible.

Keywords:Lactuca sativa L., Chalara elegans, lettuce black root rot, lettuce types.

A alface é a hortaliça folhosa de maior importância no Brasil com uma área plantada de 35.000 ha. Seu cultivo é feito de maneira intensiva e geralmente praticada pela agricultura familiar, sendo responsável pela geração de cinco empregos diretos por hectare (Costa & Sala, 2005).

Até meados da década de 1980, o padrão da alface consumida no país era alface lisa, tipo 'White Boston', que atualmente corresponde a 10% do mercado. Posteriormente, houve uma mudança da preferência de alface lisa para o segmento crespo, tipo 'Grand Rapids', que atualmente representa 70%. A alface americana vem apresentando grande crescimento no Brasil, ocupando atualmente, mais de 15% do mercado (Costa & Sala, 2005).

Em conseqüência de cultivos sucessivos de alface em áreas sem a rotação com outras culturas, doenças ocasionadas por patógenos habitantes do solo têm surgido. A murchadeira, causada pelo fungo Thielaviopsis basicola, sinanamorfo Chalara elegans Nag Raj & Kendrick, vem limitando o plantio e expansão da alface americana e lisa, no cultivo de verão em algumas regiões de São Paulo.

As plantas infectadas pelo patógeno apresentam lesões amarronzadas no sistema radicular, num estágio inicial. Com o passar do tempo, as lesões tornam-se mais escuras. Normalmente, as raízes laterais são destruídas e as plantas passam a emitir novas raízes, com conseqüente redução do desenvolvimento da planta (O'Brien & Davis, 2002). Nas horas mais quentes do dia ocorre a murcha da parte aérea, sintoma que é conhecido como murchadeira da alface.

Existe uma forte suspeita que T. basicola foi introduzido no Brasil através de turfa importada e contaminada e usado na formulação de substrato para produção de mudas (Teixeira-Yañez, 2005). Vários trabalhos têm demonstrado a importância da turfa como fonte de inóculo e disseminação da podridão negra das raízes em outros países. Na Flórida (EUA), a infecção de mudas de Citrus por T. basicola tem sido através de substrato à base de turfa contaminada com o patógeno (Graham & Timmer, 1991) e o mesmo ocorrendo para alface, na Austrália, no início da década de 90 (O'Brien & Davis, 1994).

Um fungo do gênero Thielaviopsis já foi constatado em nosso país, atacando plântulas de alface no estado do Rio de Janeiro (Silva et al., 1999). Teixeira-Yañez (2005), avaliando a incidência do patógeno em plantios comerciais de alface no estado de São Paulo, obteve três isolados do patógeno a partir de mudas de alface contaminadas e produzidas com o uso de substrato. Embora a ocorrência de T. basicola já tenha sido relatada em alface nas condições brasileiras (Silva et al., 1999; Teixeira-Yañez, 2005), não existem dados quantitativos sobre danos causados pelo fungo.

Além da alface, o patógeno infecta outras culturas como algodão (King & Presley, 1942), citros (Tsao & Gundy, 1962), amendoim (Hsi, 1967), chicória (Prinsloo, 1986), quiabo (Silva et al., 1999), grão-de-bico (Bowden et al., 1985), pêssego, roseira e petúnia (Trebilco et al., 2002), soja (Mondal et al.; 2004), fumo (Yarwood, 1981), cenoura, ervilha, feijão e pepino (O'Brien & Davis, 1994, 2002). O patógeno afeta mais de 33 famílias de plantas sendo relatado em mais de 46 países.

A utilização da técnica da solarização do solo (Teixeira-Yañez, 2005) e o uso de fungicidas (O'Brien & Davis, 1994; Teixeira-Yañez, 2005) tem sido recomendado para o controle de T. basicola em alface, mas não há fungicidas registrados para seu controle no país.

Dessa forma, a melhor maneira de controle seria pelo uso de cultivares resistentes. Segundo O'Brien & Davis (1994), avaliando a reação de cultivares de alface a T. basicola na Austrália, verificaram que 'Monaro', 'Kirralee', 'Centenário' e 'NKX030' foram resistentes enquanto que 'Classic', 'NKX029', 'Yatesdale' e 'Buffalo' foram suscetíveis. No Brasil, Teixeira-Yañez (2005) concluíram que as cultivares do tipo lisa (Luisa, Elisa e Regina) foram suscetíveis, enquanto as do tipo crespa (Locarno, Vera e New Red Fire) foram resistentes, exceto 'Verônica'. Das cultivares do tipo americana, 'Invader', 'Classic' e 'Lucy Brown' foram suscetíveis, enquanto 'Warrior', 'Raider' e 'Mohawk' foram resistentes, segundo a mesma autora.

O cultivo da alface no Brasil é feito de maneira contínua na mesma área, sem rotação com até quatro safras sucessivas anuais. Este fato agrava a incidência de patógenos associados ao solo como é o caso de Thielaviopsis. Além do mais, cultiva-se várias dezenas de cultivares cuja reação ao patógeno é desconhecida. O conhecimento da reação varietal é importante para permitir a recomendação de determinadas cultivares em áreas de ocorrência do patógeno. Identificação de resistência contribui para uso em hibridação e posterior seleção visando a incorporação de genes de resistência a T. basicola no melhoramento genético de alface. O presente trabalho teve como objetivos determinar a reação das cultivares comerciais de alface de quatro tipos varietais a T. basicola.

MATERIAL E MÉTODOS

Os experimentos foram conduzidos no laboratório de Fitopatologia da USP-ESALQ em Piracicaba-SP, de 15/01/03 a 12/03/03.

Usou-se o isolado L₁ de Thielaviopsis basicola obtido a partir de plantas de alface lisa (cv. Elisa), provenientes de Paulínia-SP, por Teixeira-Yañes (2005), para avaliar-se a reação de 37 cultivares de alface, sendo 18 do tipo americana, 9 do tipo crespa, 6 do tipo lisa e 4 do tipo batávia.

Para a multiplicação do inóculo usou-se o meio de cultura proposto por Teixeira-Yañez (2005) de BCA (batata-cenoura-ágar com 20 g de batata, 20 g de cenoura, 20 g de ágar e 1000 mL de água destilada) em placas de Petri e incubadas a 25ºC, sob escuro contínuo. Para obtenção de inóculo, adicionou-se 10 mL de água destilada às placas, 10 dias após incubação. Foi feita homogeneização do inóculo sobre a superfície do meio com auxílio de uma alça de vidro. Calibrou-se o número de conídios/mL com auxílio de um hemacitômetro.

Mudas das cultivares de alfaces produzidas em bandejas de poliestireno expandido de 200 células foram transplantadas para bandejas de 128 células, com um terço de substrato (Plantmax^® HA) colonizado com o isolado L₁ na concentração de 7,5 x 10⁵ conídios/g de substrato. Após o transplante, 3 mL de uma suspensão de 2 x 10⁶ conídios/mL foi adicionada à região do colo de cada muda. O substrato para produção de mudas e o colonizado foram previamente solarizados durante 72 h em coletor solar (Ghini, 1997). Para cada cultivar avaliada havia uma respectiva testemunha não inoculada. Conduziu-se o experimento em bandejas de 128 células, em casa-de-vegetação adotando-se irrigação intermitente por aspersão, acionado eletronicamente por um temporizador.

A escala de notas baseou-se no critério da severidade da doença, proposta por O'Brien & Davis (1994): 1=ausência de sintomas; 2=traços de necrose nas radicelas; 3=menos de 50% das raízes necrosadas; 4=mais de 50% e menos de 90% das raízes necrosadas e 5=mais de 90% das raízes afetadas. Realizaram-se avaliações e leituras dos sintomas 22 dias após a inoculação, nas mudas mantidas em bandejas de 128 células.

O delineamento experimental foi inteiramente casualizado, em esquema fatorial 37 x 2 (trinta e sete cultivares de alface, com e sem inoculação), em três repetições, constituídas de seis plantas/repetição. Plantas não inoculadas apresentaram nota 1 (ausência de sintoma) e não foram consideradas para análise estatística. A análise estatística dos dados foi feita pela comparação de médias pelo teste de Tukey (a = 0,05) utilizando o programa SAS (SAS Institute, 1999).

RESULTADOS E DISCUSSÃO

As cultivares Elisa, Tainá, Empire, Invader, Luisa, Lady, SVR 1778, Lorca e Lucy Brown foram suscetíveis ao patógeno com nota média de severidade variando de 4,16 a 5, na fase juvenil. 'Sonoma' apresentou nota média 2,16 para severidade sendo estatisticamente semelhante às cultivares Stinger, Vera e Salinas 88, classificadas como resistentes a T. basicola. As demais cultivares testadas para reação ao patógeno mostraram-se resistentes (Tabela 1).

Todas as cultivares do tipo crespa e batávia foram resistentes ao patógeno. É importante destacar que, no Brasil, a alface crespa representa 70% do mercado desta folhosa (Costa & Sala, 2005), sendo 'Vera' e 'Verônica' as cultivares mais plantadas e líderes de vendas. Teixeira-Yañez (2005) avaliando a patogenicidade in vitro de T. basicola (isolado L₁) das cultivares de alface a 21ºC, verificou que as cultivares do tipo crespa foram resistentes, com exceção de 'Verônica' que comportou-se como suscetível, o que não foi observado no presente trabalho, pois a mesma mostrou-se resistente. Entretanto, segundo a mesma autora, a drástica metodologia de inoculação in vitro e estágio juvenil da planta não permitiram a expressão da resistência ao patógeno, não obtendo correlação dos resultados de inoculação in vitro com aqueles obtidos nos testes in vivo.

Segundo Prinsloo et al. (1993) e Sala et al. (2004) as cultivares de chicória do tipo crespa, conhecida como frisée, foram resistentes a T. basicola, da mesma forma que todas as cultivares de alface do tipo crespa (Tabela 1). Diante desse resultado, é possível que o gene que confere resistência a T. basicola esteja ligado ao gene que confere crespecidade foliar nas cultivares de alface e chicória. Sala et al. (2006) relataram que a resistência de alface a T. basicola, nas cultivares estudadas, é controlada por um gene dominante, denominado Tb.

As cultivares de alface do tipo lisa e americana apresentaram variação inter-varietal quanto à reação ao patógeno. As cultivares do tipo lisa 'Elisa' e 'Luisa' foram suscetíveis estando de acordo com os resultados obtidos por Teixeira-Yañez (2005). Esses resultados confirmam a limitação dessas cultivares em áreas com histórico da doença.

As cultivares do tipo americana 'Stinger', 'Salinas 88', 'Niner', 'Rubete', 'Mohawk', 'PRS 113', 'PRS 115', 'Raider' e 'Yuri' foram resistentes, enquanto que 'Tainá', 'Empire', 'Invader', 'Lady', 'SVR 1778', 'Lorca' e 'Lucy Brown' foram suscetíveis (Tabela 1). A cultivar Lucy Brown tem sido a alface americana mais plantada no Brasil por mais de uma década, graças à sua extraordinária adaptabilidade de cultivo no verão (Costa & Sala, 2005). Entretanto, seu cultivo em áreas com incidência de T. basicola vem sendo limitado devido à sua suscetibilidade ao patógeno. Existe a demanda de uma cultivar de alface americana adaptada ao cultivo de verão e com resistência à murcha causada por T. basicola.

Os resultados observados da reação das cultivares de alface a T. basicola, na fase juvenil, confirmam suas reações em condições de campo com alta incidência da murchadeira. Deste modo, os resultados evidenciam a validade do controle genético. Identificar cultivares de alface resistentes ao patógeno poderá ser importante contribuição para o melhoramento desta folhosa visando resistência a T. basicola.

(Recebido para publicação em 24 de janeiro de 2007; aceito em 7 de agosto de 2008)

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Datas de Publicação

• Publicação nesta coleção
  26 Nov 2008
• Data do Fascículo
  Set 2008

Histórico

• Aceito
  07 Ago 2008
• Recebido
  24 Jan 2007