Leptospirose bovina: sorologia na bacia leiteira da região de Londrina, Paraná, Brasil

Bovine leptospirosis: serology at dairy farms in Londrina region, Paraná State, Brazil

LEPTOSPIROSE BOVINA: SOROLOGIA NA BACIA LEITEIRA DA REGIÃO DE LONDRINA, PARANÁ, BRASIL

BOVINE LEPTOSPIROSIS: SEROLOGY AT DAIRY FARMS IN LONDRINA REGION, PARANÁ STATE, BRAZIL

Cibele Giatti Rodrigues¹ Ernst Eckehardt Müller² Julio Cesar de Freitas³

RESUMO

Uma avaliação sorológica para 22 sorotipos de L. interrogans foi realizada. Usou-se o teste de microaglutinação rápida no soro de 1253 fêmeas bovinas, adultas de 14 propriedades produtoras de leite tipo B, da região de Londrina-Paraná- Brasil, onde havia animais com problemas reprodutivos. Títulos de anticorpos > 100 foram detectados em 166 (13,25%) animais de 10 (71,43%) propriedades. Em 56 (33,73%) animais foram encontrados anticorpos contra dois ou mais sorotipos simultaneamente. Anticorpos contra o sorotipo icterohaemorrhagiae foram detectados em 48 (28,91%) animais, seguido pelos sorotipos pomona 35 (21,08%); bataviae 28 (16,87%); autumnalis 24 (14,46%); canicola 19 (11,44%); hardjo 18 (10,84%); bratislava 17 (10,24%); butembo 13 (7,83%); pyrogenes 12 (7,22%); hebdomadis 11 (6,63%) e wolffi 10 (6,02%).

Palavras-chave: bovino, Leptospira interrogans, sorologia.

SUMMARY

A serological survey for leptospirosis was performed in farms that had cows with reproductive problems, in the region of Londrina, Paraná State, Brazil. Twenty-two serotype of L. interrogans were investigated, using rapid microscopic agglutination test in 1253 serum samples. One-hundred-sixty-six serum samples (13.25%) from 10 farms (71.43%) presented antibodies agaisnt L. interrogans. Antibodies against two or more L. interrogans serotypes were found in 56 animals. Antibodies against the serotype icterohaemorrhagiae were found in 48 (28.91%) animals, whereas antibodies against pomona were found in 35 (21.08%), bataviae in 28 (16.87%), autumnalis in 24 (14.46%) , canicola in 19 (11.44%), hardjo in 18 (10.84%), bratislava in 17 (10.24%), butembo in 13 (7.83%), pyrogenes in 12 (7.22%), hebdomadis in 11 (6.63%) and wolffi in 10 (6.02%).

Key words: bovine, Leptospira interrogans, serological survey.

INTRODUÇÃO

A leptospirose bovina encontra-se amplamente difundida no mundo. Levantamentos sorológicos estimam uma prevalência de 15,0% no rebanho bovino norte americano (THIERMANN, 1984). No Brasil, os resultados sorológicos de bovinos obtidos por vários autores (ÁVILA et al., 1978; MOREIRA et al., 1979; GIORGI et al., 1981; RIBEIRO et al., 1988; GIRIO & MATHIAS, 1989; BROD et al., 1995) também mostraram que a infecção está bastante difundida. Segundo TEDESCO (1997), a leptospirose em bovinos é uma doença ainda em expansão em nosso país. Atualmente, o sorotipo hardjo tem sido o mais freqüentemente detectado e o que causa maior impacto econômico na eficiência reprodutiva de rebanhos de bovinos de diversas partes do mundo ( SALMAN, 1990; MILLER et al., 1991; MOREIRA et al. 1993; MOREIRA et al., 1994; BROD et al., 1995; LILENBAUM et al., 1995; RICHARDSON, 1995; TEDESCO, 1997). Nessa espécie, os principais sinais da leptospirose são os ligados à esfera reprodutiva, como abortos, natimortos, reabsorção fetal, nascimento de animais debilitados e infertilidade, podendo a fêmea necessitar de 3-6 coberturas para conceber (FAINE, 1982; ELLIS, 1984; ELLIS et al., 1985). Há ainda relatos de casos de mamite clínica e subclínica, com presença de flacidez de úbere e leite amarelado com estrias de sangue, ocasionando elevada redução na produção (SULLIVAN et al., 1970; ELLIS et al., 1986).

Na transmissão da leptospirose bovina, deve ser considerada a eliminação do microrganismo através da urina por um período prolongado, o que ocasiona a contaminação do meio ambiente e de outros animais (AMATREDJO et al., 1975; THIERMANN, 1984; ELLIS et al., 1981). Segundo TWIGG et al. (1972), as leptospiras estão amplamente distribuídas entre animais silvestres, o que os torna prováveis fontes de infecção para animais domésticos. Como o quadro clínico de leptospirose é comum a outras patologias infecciosas da esfera reprodutiva, uma vez observados os sinais clínicos o diagnóstico é confirmado através de exames laboratoriais. Dentre os diversos testes já padronizados para diagnóstico laboratorial de leptospirose, LILEMBAUM (1995) afirma que o teste de soroaglutinação microscópica com antígenos vivos é, sem dúvida, ainda o mais utilizado por pesquisadores de todo o mundo para diagnóstico da leptospirose bovina.

O objetivo principal deste trabalho foi determinar a freqüência de infecção leptospírica através da pesquisa de anticorpos contra 22 sorotipos de Leptospira interrogans (L. interrogans) em fêmeas bovinas, adultas de 14 propriedades produtoras de leite tipo B, da região de Londrina-Pr.

MATERIAL E MÉTODOS

Foram estudadas14 propriedades produtoras de leite tipo B, da região de Londrina-Pr. Em 13 propriedades, os animais eram da raça Holandesa e em uma, da raça Jersey. As propriedades foram denominadas de A a N, sendo que apenas as propriedades A e D faziam compra e venda de animais (propriedades abertas), enquanto as demais propriedades realizavam somente a venda (propriedades fechadas). Todas as propriedades utilizavam inseminação artificial e foram selecionadas por apresentarem histórico de abortos e infertilidade das fêmeas. Nenhuma propriedade vacinava os animais contra leptospirose. Foram colhidas amostras de sangue de 1253 fêmeas bovinas com idade a partir de 15 meses, no período de agosto de 1995 a agosto de 1997. Os soros obtidos foram estocados a –20° C até a realização do exame. O exame sorológico foi realizado usando o teste de microaglutinação rápida, descrito por RYU (1970). Foram utilizadas como antígenos culturas vivas de 22 sorotipos de L. interrogans, com 5-10 dias de incubação a 28°C, correspondendo a 17 sorogrupos (tabela 1), mantidas em meio de Ellinghausen- McCullough-Johnson-Harris (EMJH) modificado com albumina bovina. Os soros suspeitos foram diluídos previamente a 1:50 em PBS pH 7,2, e a esses foi adicionado a mesma quantidade de antígeno. Os tubos contendo a mistura foram incubados por 12 minutos, à temperatura ambiente. Com uma alça de platina, uma gota de cada mistura foi colocada sobre uma lâmina e a leitura realizada em microscópio de campo escuro, de acordo com MYERS (1985). Todos os soros que apresentaram 2+ de aglutinação na diluição 1:100 foram considerados positivos. Após essa triagem, os soros positivos foram diluídos e examinados até encontrar os títulos finais. Em todos os soros examinados para leptospirose também foi realizado o teste de soroaglutinação rápida para diagnóstico de brucelose, utilizando antígeno produzido pelo TECPAR-Pr.

RESULTADOS

Das 14 propriedades estudadas, 10 (71,43%) apresentaram animais com evidência sorológica de infecção por L. interrogans. Em 166 (13,25%), dos 1253 animais testados, foram encontrados títulos de anticorpos > 100 contra leptospira. Nas propriedades estudadas, foram observados percentuais de animais reagentes variando de 4,7 a 51,06 (tabela 2). No presente estudo, foram detectados anticorpos contra 11 sorotipos de L. interrogans. Anticorpos contra o sorotipo icterohaemorrhagiae foram verificados em 48 (28,91%) dos animais reagentes, seguido pelos sorotipos pomona 35 (21,08%), bataviae 28 (16,87%), autumnalis 24 (14,46%), canicola 19 (11,44%), hardjo 18 (10,84%), bratislava 17 (10,24%), butembo 13 (7,83%), pyrogenes 12 (7,22%), hebdomadis 11 (6,63%) e wolffi 10 (6,02%) (tabela 3). Em 110 (66,26%) animais, foram detectados anticorpos contra 01 sorotipo, enquanto que 56 (33,73%) apresentaram anticorpos contra 02 ou mais sorotipos simultaneamente. Anticorpos nas diluições de 1:100 e 1:200 foram observados em 163 (98,19%) dos animais considerados positivos, enquanto apenas 03 (1,81%) apresentaram anticorpos nas diluições de 1:400 e 1:800. A freqüência de sorotipos detectados através da prova de microaglutinação rápida, em cada propriedade estudada, está representada na tabela 4. Todas as fêmeas bovinas testadas foram negativas para brucelose.

DISCUSSÃO

Os resultados deste trabalho mostram em 166 (13,25%) fêmeas bovinas, adultas de 10 (71,43%), das 14 propriedades pesquisadas, a presença de anticorpos contra diferentes sorotipos de Leptospira interrogans. Estes resultados coincidem com os encontrados por ROCHA & PEREIRA (1987) em Portugal, FONTAINE et al. (1988) na França e GIRIO & MATHIAS (1989) no Brasil, os quais encontraram respectivamente 13,3%, 20,7% e 18,98% de bovinos reagentes para leptospira. Os resultados obtidos neste trabalho diferem de MILLER et al. (1991) que, pesquisando bovinos de abatedouros de 49 estados dos EUA, encontraram 49% de positivos; e de LILENBAUM et al. (1995), no Brasil, que detectaram reações positivas em 68,4% dos soros de vacas com problemas reprodutivos. As diferenças, obtidas pelos autores acima citados em relação a este trabalho, podem ter ocorrido, pois esses autores selecionaram apenas animais com problemas reprodutivos, enquanto neste trabalho não foram selecionados animais, mas sim propriedades com histórico de problemas reprodutivos. Os resultados obtidos neste trabalho, no que se referem aos sorotipos mais freqüentemente detectados (icterohaemorrhagiae e pomona), assemelham-se em parte, aos encontrados na década de 70 no Brasil, onde se observava na maioria dos trabalhos a predominância do sorotipo pomona (REIS et al., 1973; CORDEIRO et al. , 1975; WILLIANS et al., 1975; VAZ & OLIVEIRA, 1977; ÁVILA et al., 1978 e MOREIRA et al. 1979). Este sorotipo foi considerado por ZAMORA & RIEDEMANN (1978) como um dos principais responsáveis por problemas reprodutivos em bovinos no Chile; embora as porcentagens apresentadas na tabela 3, em relação ao total de fêmeas bovinas, adultas examinadas sejam baixas, tanto para o sorotipo icterohaemorrhagiae (3,83%) como para o sorotipo pomona (2,79%), deve-se ressaltar a importância dos valores obtidos para esses sorotipos (28,91% e 21,08% respectivamente) quando analisados em relação ao total de animais reagentes. Os resultados deste trabalho mostram, ainda, que uma grande porcentagem dos animais reagentes apresentaram títulos de anticorpos > 100 contra os sorotipos bataviae e autumnalis, sorotipos que têm sido isolados de outros animais domésticos, silvestres e/ou sinantrópicos (SANTA ROSA et al., 1972; BIANCHI, 1984; ELLIS, 1986; TAYLOR et al., 1991). Os bovinos podem se infectar com qualquer dos sorotipos de leptospiras patogênicas que existam no seu meio ambiente, podendo esta infecção ocorrer direta ou indiretamente através de 2 fontes: de outros bovinos portadores ou outros hospedeiros que habitem o mesmo ambiente (ELLIS et al., 1976).

Os diferentes sorotipos foram classificados por ELLIS (1984) em amostras adaptadas e mantidas pelos bovinos, e amostras não adaptadas que causam infecções acidentais, pois são mantidas por outras espécies domésticas, silvestres e/ou cinantrópicos. Assim, os anticorpos detectados neste trabalho, contra os sorotipos icterohaemorrhagiae, pomona, bataviae e autumnalis entre outros, parecem estar relacionados a infecções acidentais devido ao contato direto ou indireto dos bovinos com outras espécies animais que atuam como reservatórios destes sorotipos. A partir da década de 80, pesquisadores de vários países, inclusive do Brasil, têm verificado, principalmente através de provas sorológicas, a predominância do sorotipo hardjo em bovinos (RIBEIRO et al., 1988; MILLER et al., 1991; MOREIRA et al., 1993; BROD et al., 1995; RICHARDSON, 1995; TEDESCO, 1997). Este sorotipo foi considerado como uma amostra adaptada e mantida pelo próprio bovino (ELLIS, 1984), e tem sido, dentre os sorotipos de L. interrogans, o maior responsável por problemas reprodutivos nessa espécie animal (ELLIS, 1984; MOREIRA et al., 1994).

Neste trabalho, anticorpos contra o sorotipo hardjo foram detectados somente em 18 animais de 2 propriedades. ELLIS et al. (1981) e MOREIRA et al. (1994) afirmaram que a transmissão direta entre bovinos seria o mecanismo mais importante para a disseminação do sorotipo hardjo entre animais e rebanhos. Coincidentemente essas duas propriedades eram as únicas que realizavam a compra freqüente de animais, sendo consideradas propriedades abertas e, portanto, a entrada de animais seria, provavelmente, a responsável pela introdução desse sorotipo nestas propriedades.

FONTE DE AQUISIÇÃO

Antígeno para diagnóstico de brucelose: TECPARInstituto de Tecnologia do Paraná. Rua dos Funcionários, 1357- Curitiba-Pr. CEP-80035-050.

² Médico Veterinário, Doutor, Professor Titular, Departamento de Medicina Veterinária Preventiva e Patologia Animal, UEL.

³ Médico Veterinário, Doutor, Professor Titular, Departamento de Medicina Veterinária Preventiva e Patologia Animal, UEL, CP. 6001, 86051-970, Londrina, Paraná. E-mail: [e-mail]. Autor para correspondência.

Recebido para publicação em 07.07.98. Aprovado em 07.10.98

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¹

Médico Veterinário, Acadêmico do Curso de Mestrado em Sanidade Animal, Depatamento de Medicina Veterinária Preventiva e Patologia Animal, Universidade Estadual de Londrina (UEL).

Datas de Publicação

• Publicação nesta coleção
  15 Dez 2006
• Data do Fascículo
  Jun 1999

Histórico

• Aceito
  07 Out 1998
• Recebido
  07 Jul 1998