DETERMINAÇÃO DE POLIMORFISMOS NO GENE DO HORMÔNIO DO CRESCIMENTO EM TRÊS POPULAÇÕES DE SUÍNOS

DETERMINATION OF POLYMORPHISMS IN THE GROWTH OF THE HORMONE GENE IN THREE POPULATIONS OF PIGS

DETERMINAÇÃO DE POLIMORFISMOS NO GENE DO HORMÔNIO DO CRESCIMENTO EM TRÊS POPULAÇÕES DE SUÍNOS

DETERMINATION OF POLYMORPHISMS IN THE GROWTH OF THE HORMONE GENE IN THREE POPULATIONS OF PIGS

Maurício Machaim Franco¹ Bárbara Amélia Aparecida Santana² Luiz Ricardo Goulart Filho³ Robson Carlos Antunes⁴ Maurício Borges⁵

- NOTA -

RESUMO

Dois polimorfismos (GHC e GHD) no gene que codifica para o hormônio do crescimento foram determinados em um total de 96 animais de três raças de suínos (Pietrain, Large White e Landrace), através da PCR-RFLP. As freqüências alélicas observadas para GHC foram C₁ 0,42, C₂ 0,0, C₃ 0,06 e C₄ 0,52 para Landrace; C₁ 0,0, C₂ 0,03, C₃ 0,14 e C₄ 0,83 para Large White e C₁ 0,02, C₂ 0,25, C₃ 0,28 e C₄ 0,45 para Pietrain. Para GHD, as freqüências alélicas observadas foram D₁ 0,69 e D₂ 0,31 para Landrace; D₁ 0,25 e D₂ 0,75 para Large White e D₁ 0,72 e D₂ 0,28 para Pietrain.

Palavras-chave: suíno, polimorfismo, pGH.

SUMMARY

Two polymorphisms (GHC and GHD) in the growth hormone gene were evaluated in the ninety-six (96) animals of three breeds of pigs (Pietrain, Large White, and Landrace), through PCR-RFLP. Allele frequencies observed for the GHC polymorphism were: C₁ 0.42, C₂ 0.0, C₃ 0.06 and C₄ 0.52 for Landrace; C₁ 0.0, C₂ 0.03, C₃ 0.14 and C₄ 0.83 for Large White and C₁ 0.02, C₂ 0.25, C₃ 0.28 and C₄ 0.45 for Pietrain. The GHD polymorphism presented the following allele frequencies:. D₁ 0.69 and D₂ 0.31 for Landrace; D₁ 0.25 and D₂ 0.75 for Large White and D₁ 0.72 and D₂ 0.28 for Pietrain.

Key words: pig, polymorphism, pGH.

A associação do gene que codifica para o hormônio do crescimento (GH) com características quantitativas tm sido citada na literatura. VIZE e WELLS (1987) isolaram e caracterizaram o gene em suínos. SCHELLANDER et al.. (1994) estudaram sua variação molecular.

O objetivo do trabalho foi identificar dois polimorfismos dentro do gene GH.

DNA de 96 animais das raças Pietrain, Landrace e Large White foi extraído de sangue segundo A Workshop on DNA Technologies and Selection of Animal Genetic Resources (1992), com modificações (BORGES, 1997).

Para a genotipagem, foi utilizado um par de primers desenhados por LARSEN e NIELSEN (1993). As condições no termociclador foram como se segue: 95⁰C por 3 minutos, 35 ciclos a 95⁰C por 45 segundos, 59⁰C por 45 segundos e 76⁰C por 1 minuto, e para extensão final 4 minutos a 76⁰C. As reações de PCR foram realizadas utilizando 50-150ng de DNA genômico, 1,5mM de MgCl₂, 10pmoles de cada primer, 8nmoles de dNTPs, 1U de Taq Polimerase e tampão da Taq (100mM Tris-HCl, 10mM KCl₂, 15mM MgCl₂, 1mg/m BSA) 1X concentrado. O DNA amplificado foi digerido com as enzimas HhaI e DdeI. Com a HhaI (GHC), 4 alelos são obtidos, sendo: C1 605pb, C₂ 497 e 108pb, C₃ 448 e 157pb, C₄ 448, 108 e 49pb (Figura 1). Com a DdeI (GHD), dois alelos são obtidos, sendo: D1335, 148 e 122pb e D2 457 e 148pb (Figura 2). A metodologia utilizada para verificar se as freqüências estavam em equilíbrio de Hardy-Weinberg foi o teste do Qui-quadrado, utilizando a correção de Yates.

As tabelas 1 e 2 mostram as freqüências genotípicas e alélicas para os genótipos GHD e GHC.

Os genótipos de GHD na raça Large White não estão em equilíbrio (P< 0,05), mostrando um maior número de indivíduos heterozigotos. Para o polimorfismo GHC observa-se que nas raças Landrace e Pietrain há um desvio do equilíbrio, com P = 0,05 e P < 0,01 respectivamente, mostrando um aumento no número de heterozigotos (C₁C₄ para Landrace e C₂C₄ para Pietrain). Essas populações estão sendo selecionadas para características reprodutivas, de performance e também contra o gene halotano, pelo DNA. Como o hormônio do crescimento está envolvido fisiologicamente com essas características, essa seleção pode estar influenciando suas freqüências genotípicas. HANDLER et al. (1996) estudando animais Landrace e Large White, mostraram uma maior freqüência do alelo C₃ ao passo que os estudados aqui apresentaram maior freqüência do alelo C₄. Isso pode ser devido à seleção para diferentes características, ou que os animais apresentam diferentes desempenhos para as mesmas características devido a diferenças ambientais.

² Mestrando em Genética e Bioquímica, CAPES, UFU.

³ Professor Titular - Departamento Genética e Bioquímica, UFU.

⁴ Doutorando em Genética e Bioquímica/Rezende Alimentos S/A - UFU.

⁵ Mestre em Genética e Bioquímica - Rezende Alimentos S/A.

Recebido para publicação em 16.11.99. Aprovado em 12.07.00

• A WORKSHOP on DNA technologies for the conservation and selection of animal genetic resources. Pratical Manual. Brisbane, Austrália : June 14^th to 26^th , compiled and presented by CSIRO Molecular Animal Genetics Centre and the Centre for Molecular Biology and Biotecnology at the University of Queensland, 1992. p.70-71.
• BORGES, M. Marcadores moleculares e seus efeitos sobre características quantitativas de bovinos de corte Uberlândia MG, 1997. 119p. Dissertação (Mestrado em Genética e Bioquímica) - Curso de Pós-graduação em Genética e Bioquímica, Universidade Federal de Uberlândia, 1997.
• HANDLER, J., SCHMOLL, F., STUR, I., et al Distribution of Apa I and Cfo I polymorphisms of the porcine growth-hormone (pGH) gene in two RYR 1 genotyped austrian pig breeds. J Anim Breed Genet, v.113, p.57-61, 1996.
• LARSEN, N.J., NIELSEN, V.H. Apa I and Cfo I polymorphisms in the porcine growth hormone gene. Animal Genetics, v.24, p.71, 1993.
• SCHELLANDER, K., PELI, J., KNEISSL, F., et al Variation of the growth hormone gene in RYR 1 genotyped austrian pig breeds. J Anim Breed Genet, v.111, p.162-166, 1994.
• VIZE, P.D., WELLS, J.R.E. Isolation and characterization of the porcine growth hormone gene. Gene, v.55, p.339-344, 1987.

Datas de Publicação

• Publicação nesta coleção
  23 Maio 2005
• Data do Fascículo
  Abr 2001

Histórico

• Aceito
  12 Jul 2000
• Recebido
  16 Nov 1999