Resumos
Um experimento foi realizado com o objetivo de verificar o efeito de dietas simples e complexas sobre a morfo-fisiologia gastrintestinal de leitões, nas fases de maternidade (7 aos 21 dias) e pós-desmame (21 aos 35 dias de idade). Utilizaram-se 96 leitões mestiços (machos e fêmeas), distribuídos em delineamento de blocos casualizados, com quatro tratamentos, seis repetições e quatro leitões por unidade experimental. As dietas usadas foram: duas simples - uma com 16 e a outra 19% de proteína (PB) - e duas complexas - uma à base de milho, farinha de peixe, leite em pó e glúten de milho, sem o uso de farelo de soja (CSFS), e a outra à base de milho, farinha de peixe, leite em pó, farelo de soja e sem glúten de milho (CCFS), ambas com 19% de PB. Os leitões foram abatidos aos 14, 21, 28 e 35 dias de idade. Houve redução dos pesos absoluto e relativo do fígado e do peso relativo do pâncreas, com a utilização da dieta CSFS. O pH da ingesta estomacal e da digesta intestinal não foi influenciado pelo tipo de dieta. Os animais que consumiram a dieta simples com 16% de PB e complexa CSFS obtiveram maior profundidade de cripta (PC) aos 21 e 35 dias de idade, respectivamente, não tendo efeito sobre a altura das vilosidades (AV) e relação vilosidade:cripta (RVC). A PC aumentou linearmente, enquanto a AV e RVC diminuíram quadraticamente até 27 e 30 dias de idade, respectivamente. As dietas simples ou complexa, em razão da qualidade e quantidade dos ingredientes, afetaram a profundidade das criptas do intestino delgado e o peso dos órgãos auxiliares da digestão, mas não influenciaram o pH do conteúdo estomacal e intestinal de leitões desmamados aos 21 dias de idade.
desmame; histologia; intestino; leitão; nutrição; pH
An experiment was conducted with objective to evaluate the effect of the simple and complex diets on the morpho-fisiologycal gastrointestinal of young pigs, on their pre nursery (7th to 21st day) and nursery phases (21st to 35nd of age). Ninety six crossbreed young pigs (male and females) were allotted to a randomized block design with four treatments, six replications and four young pigs for each experimental unit. It were used diets: two simple; a with 16 and the other with 19% the protein (CP) and two complex; a to the base corn, fish meal, dried milk, corn gluten without the use of soybean meal (CSFS) and the other to the base corn, fish meal, dried milk, soybean meal, without the use of corn gluten (CCFS), both with 19% the CP. The pigs were slaughtered at 14, 21, 28 and 35 days of age. There was reduction of liver absolute and relative weights and of pancreas relative weights, by using CSFS diet. pH of the stomach and intestine contents was not influenced by the diet . The animals fed simple diet with 16% of CP and complex CSFS showed larger crypt depth (CD) at 21 and 35 days of age, respectively, but did not show effect on the villous height (VH) and villous:crypt relation (VCR). CD it increased linearly, while VH and RVC decreased quadraticly until 27th and 30th days of age, respectively. The simple or complex diet, concerning quality and quantity of ingredients, affected the crypts depth of the small intestine and the auxiliary organs weight of the digestion, but did not affect the stomachal pH and intestine contents of pigs weaned at 21 days of age.
histology; intestine; nutrition; pH; young pig; weaning
Efeito de dietas simples e complexas sobre a morfo-fisiologia gastrintestinal de leitões até 35 dias de idade1
Effect of simple and complex diets on the morpho-physiologycal gastrointestinal of young pigs at 35 days of age
Alexandre de Oliveira TeixeiraI; Darci Clementino LopesII; Aloízio Soares FerreiraII; Juarez Lopes DonzeleII; Izabel Regina S. CostaIII; Rita Flávia Miranda de OliveiraII; Vanusa Patrícia de Araújo FerreiraIV; André Viana C. de SouzaI
IZootecnistas e doutores em Zootecnia - UFV - Viçosa - MG - CEP: 36.571-000. E.mail: teixeira@alunos.ufv.br
IIProfessores do Departamento de Zootecnia - UFV - Viçosa - MG - CEP: 36.571-000
IIIProfessora do Departamento de Biologia Geral - UFV - Viçosa - MG - CEP: 36.571-000
IVProfessora da FEAD - Belo Horizonte - MG
RESUMO
Um experimento foi realizado com o objetivo de verificar o efeito de dietas simples e complexas sobre a morfo-fisiologia gastrintestinal de leitões, nas fases de maternidade (7 aos 21 dias) e pós-desmame (21 aos 35 dias de idade). Utilizaram-se 96 leitões mestiços (machos e fêmeas), distribuídos em delineamento de blocos casualizados, com quatro tratamentos, seis repetições e quatro leitões por unidade experimental. As dietas usadas foram: duas simples - uma com 16 e a outra 19% de proteína (PB) - e duas complexas - uma à base de milho, farinha de peixe, leite em pó e glúten de milho, sem o uso de farelo de soja (CSFS), e a outra à base de milho, farinha de peixe, leite em pó, farelo de soja e sem glúten de milho (CCFS), ambas com 19% de PB. Os leitões foram abatidos aos 14, 21, 28 e 35 dias de idade. Houve redução dos pesos absoluto e relativo do fígado e do peso relativo do pâncreas, com a utilização da dieta CSFS. O pH da ingesta estomacal e da digesta intestinal não foi influenciado pelo tipo de dieta. Os animais que consumiram a dieta simples com 16% de PB e complexa CSFS obtiveram maior profundidade de cripta (PC) aos 21 e 35 dias de idade, respectivamente, não tendo efeito sobre a altura das vilosidades (AV) e relação vilosidade:cripta (RVC). A PC aumentou linearmente, enquanto a AV e RVC diminuíram quadraticamente até 27 e 30 dias de idade, respectivamente. As dietas simples ou complexa, em razão da qualidade e quantidade dos ingredientes, afetaram a profundidade das criptas do intestino delgado e o peso dos órgãos auxiliares da digestão, mas não influenciaram o pH do conteúdo estomacal e intestinal de leitões desmamados aos 21 dias de idade.
Palavras-chave: desmame, histologia, intestino, leitão, nutrição, pH
ABSTRACT
An experiment was conducted with objective to evaluate the effect of the simple and complex diets on the morpho-fisiologycal gastrointestinal of young pigs, on their pre nursery (7th to 21st day) and nursery phases (21st to 35nd of age). Ninety six crossbreed young pigs (male and females) were allotted to a randomized block design with four treatments, six replications and four young pigs for each experimental unit. It were used diets: two simple; a with 16 and the other with 19% the protein (CP) and two complex; a to the base corn, fish meal, dried milk, corn gluten without the use of soybean meal (CSFS) and the other to the base corn, fish meal, dried milk, soybean meal, without the use of corn gluten (CCFS), both with 19% the CP. The pigs were slaughtered at 14, 21, 28 and 35 days of age. There was reduction of liver absolute and relative weights and of pancreas relative weights, by using CSFS diet. pH of the stomach and intestine contents was not influenced by the diet . The animals fed simple diet with 16% of CP and complex CSFS showed larger crypt depth (CD) at 21 and 35 days of age, respectively, but did not show effect on the villous height (VH) and villous:crypt relation (VCR). CD it increased linearly, while VH and RVC decreased quadraticly until 27th and 30th days of age, respectively. The simple or complex diet, concerning quality and quantity of ingredients, affected the crypts depth of the small intestine and the auxiliary organs weight of the digestion, but did not affect the stomachal pH and intestine contents of pigs weaned at 21 days of age.
Key Words: histology, intestine, nutrition, pH, young pig, weaning
Introdução
As dietas pré e pós-desmame têm sido freqüentemente estudadas, à medida que diminui a idade ao desmame, a fim de assegurar taxa ótima de crescimento. Todavia, o consumo de ração nessas fases é pequeno e variável, sendo insuficiente para atender as exigências de mantença dos leitões (Pluske et al., 1995).
O uso de dietas complexas com alta porcentagem de produtos lácteos, associados a fonte protéicas de origem animal e vegetal, baseia-se na melhoria da digestibilidade e no aumento dos níveis de ingestão de ração, sem predispor o leitão a problemas digestivos. Por outro lado, a utilização de rações simples diminui os custos e facilita o manejo da alimentação (Nelssen et al. 1997).
Berto et al. (1996), estudando o fornecimento de dietas simples e complexas na fase inicial de leitões desmamados aos 28 dias de idade, não encontraram diferença sobre espessura da mucosa, altura das vilosidades e coeficientes de digestibilidade da matéria seca, proteína bruta e energia digestível e metabolizável. Berto et al. (1997) observaram que dietas simples adequadamente formuladas proporcionaram desempenho semelhante, ao obtido com as complexas, independentemente do sistema de alimentação e sem reflexo negativo no desempenho dos leitões nas fases de crescimento e terminação.
Mascarenhas et al. (1999) verificaram que dietas simples ou complexas, com 19% de proteína, proporcionaram desempenho semelhante, constatando que a diminuição do teor de proteína (16%) em rações simples e a presença de glúten de milho nas rações complexas refletiram negativamente no desempenho de leitões desmamados aos 21 dias de idade, sendo insignificante o consumo diário de ração (CDR) até o desmame.
Ao desmame, o sistema digestivo de leitões passa por modificações até que esteja preparado para a digestão de ingredientes de origem vegetal. A primeira delas é o aumento na produção de enzimas pancreáticas e dos órgãos auxiliares da digestão (Makkink et al., 1994ab). A variação do pH gástrico, devido à dieta, tem importância decisiva no estado sanitário e digestivo (Wilson & Leibholz, 1981). Segundo o autor, elevando-se o pH, diminui-se atividade proteolítica e bactericida no estômago.
Segundo Manners et al. (1962), comparada ao leite da porca, as proteínas da soja têm maior ação tamponante no estômago do leitão e o aumento do pH reduz a atividade da pepsina, transferindo para o intestino delgado maior quantidade de proteínas intactas.
Sabe-se que a mucosa intestinal tem grande importância no processo absortivo e digestivo e as alterações histopatológicas estão relacionadas à imaturidade dos enterócitos, à diminuição da altura das vilosidades e ao aumento das mitoses nas criptas, do número de placas de Peyer, entre outras. Nas vilosidades, a renovação dos enterócitos pode demorar 3 a 4 dias (Moon, 1971) e, quando a proliferação das células for maior que a descamação, haverá hipertrofia da mucosa; o contrário, predispõe à atrofia.
A etiologia dessas alterações é complexa, decorrendo de fatores como: imaturidade imunológica (Li et al., 1990), substituição do leite da porca, que possui fatores intrínsecos a IgA, fator de crescimento epidermal, poliaminas e glutamina (Pluske et al., 1997), estresse ao desmame (Berto et al., 1996), consumo das dietas (Pluske et al., 1996a). Thomaz et al. (1996) destacaram a importância das fontes protéicas da dieta; Abreu (1994), do nível de farelo de soja; Bertol et al. (1997ab), do tipo de processamento do alimento; Jin et al. (1994), do teor de fibra; Hall & Byrne (1989), da forma física da ração, entre outros.
Avaliou-se o efeito de dietas simples e complexas, usadas nos períodos pré e pós-desmame dos leitões desmamados aos 21 dias de idade, sobre a morfo-fisilogia do trato gastrintestinal dos leitões até 35 dias de idade.
Material e Métodos
O experimento foi conduzido no Setor de Suinocultura, do Departamento de Zootecnia, do Centro de Ciências Agrárias, da Universidade Federal de Viçosa - MG, no período de maio a setembro de 1996.
Foram utilizados 96 leitões mestiços (48 machos castrados e 48 fêmeas), distribuídos em um delineamento experimental de blocos ao acaso com quatro tratamentos e seis repetições. Adotou-se como critério, na formação dos blocos, a data do parto das porcas. Utilizaram-se as seguintes instalações: maternidade (7 aos 21 dias de idade) e creche (21 aos 35 dias). Na maternidade, utilizaram-se 24 leitegadas uniformes, mantendo-se nove leitões por porca, com peso de 2,05 ± 0,573 kg aos sete dias. Na fase de creche, a unidade experimental foi constituída de três leitões, distribuídos em função dos tratamentos recebidos quando lactentes.
As dietas experimentais fornecidas aos leitões do sétimo ao 35o dia de idade foram: complexa à base de milho, farinha de peixe, leite em pó e glúten de milho, com 19% de PB (Complexa sem farelo de soja - CSFS); simples à base de milho e farelo de soja, com 19% de proteína bruta (simples milho e soja - SMS); complexa à base de milho, farinha de peixe, leite em pó e farelo de soja, com 19% de PB (complexa com farelo de soja - CCFS); simples à base de milho, farelo de soja e farelo de trigo, com 16% de PB (simples lactação - SL).
As dietas foram formuladas para atender as exigências nutricionais dos leitões, conforme recomendações de Rostagno et al. (1992), cujas composições centesimal e nutricional calculadas estão apresentadas na Tabela 1.
Foram consideradas dietas complexas as que continham fontes protéicas de origem animal e vegetal e simples, as que continham apenas farelo de soja como ingrediente protéico.
Os leitões foram desmamados às 14 h, aos 21 dias de idade, fornecendo-se água e dietas sólidas à vontade. Após o desmame, os animais foram alojados em sala de creche construída em alvenaria, com piso de concreto, forro de madeira rebaixado, janelas de vidro tipo basculante, contendo gaiolas metálicas suspensas, medindo 1,60 x 1,0 x 0,56 m, providas de piso em plástico expandido, laterais em tela metálica, comedouros semi-automáticos e bebedouros tipo chupeta. Durante o experimento, a ventilação e a temperatura ambiente foram efetuadas controlando-se as janelas e as lâmpadas de aquecimento sobre as gaiolas.
Aos 14, 21, 28 e 35 dias de idade, um leitão de cada unidade experimental foi selecionado aleatoriamente, pesado, abatido por sangramento e eviscerado. O fígado e pâncreas foram pesados e o intestino delgado, esticado e medido o comprimento. Foram feitas medições de pH na ingesta da região pilórica do estõmago e da região proximal do intestino delgado, coletada na região correspondente a 25% do comprimento total do intestino. A aferição do pH foi efetuada com peagâmetro elétrico padronizado à temperatura de 25°C e 95% de sensibilidade.
Amostras de 2 cm de comprimento foram retiradas nas regiões correspondentes a 25, 50 e 75% do intestino delgado. O material foi lavado em solução fisiológica, fixado em BOUIN por 24 horas, desidratado em álcool etílico, diafanizado em xilol e incluído em parafina.
Em cada lâmina foram colocadas quatro secções com 7 mm de espessura. Na seleção de uma secção e a subseqüente, foram desprezadas outras 30 secções. Os corantes utilizados foram a hematoxilina e eosina. Para as análises morfométricas, foi utilizado o microscópio óptico OLYMPUS BX50 (aumento 40X) acoplado ao analisador de imagem "Image-Pro Plus 1.3.2" (1994). Foram selecionadas e medidas 30 vilosidades e 30 criptas, bem orientadas e seccionadas longitudinalmente. Observou-se também a integridade da mucosa, ocorrência e aspecto das Placas de Peyer.
Os dados foram submetidos à análise de variância utilizando-se o programa SAEG, desenvolvido na Universidade Federal de Viçosa -MG (UFV, 1997) e as médias comparadas pelo teste de Newman-Keuls, em nível de 5% de probabilidade. Para altura das vilosidades, da profundidade das criptas e da relação vilosidade:cripta, também foram observadas as curvas de regressão, em razão da idade ao abate.
Resultados e Discussão
Os resultados de pesos ao abate, pesos absolutos e relativos do fígado e do pâncreas e comprimentos absolutos e relativos do intestino delgado dos leitões aos 14, 21, 28 e 35 dias de idade, em razão das dietas experimentais, encontram-se na Tabela 2.
Os tratamentos influenciaram (P<0,05) os pesos relativo e absoluto do fígado e relativo do pâncreas somente aos 35 dias de idade. Os animais que consumiram a dieta CSFS tiveram órgãos mais leves. Não foi observada influência da dieta (P>0,05) sobre o peso absoluto do pâncreas e os comprimentos absoluto e relativo do intestino delgado.
Com relação ao peso absoluto do pâncreas, constatou-se que, apesar de não-significativo (P>0,05), o tratamento CSFS proporcionou aos animais pesos de pâncreas com valores variando de 32,2 a 37,6%, menores que aqueles que receberam as dietas SMS, CCFS e SL, aos 35 dias de idade. Constatou-se que os valores dos órgãos foram baixos quando comparados aos de Pluske et al. (1996b) e Makkink et al. (1994a).
Observou-se que a dieta CSFS prejudicou o crescimento e aumento do peso dos órgãos digestivos, provavelmente devido à baixa ingestão de matéria seca, decorrente da inclusão do glúten de milho, informação que pode ter suporte nos dados de Mascarenhas et al. (1999), que, em experimento paralelo de desempenho, utilizando os mesmos tratamentos (Tabela 3), verificaram que a inclusão do glúten de milho em dietas reduziu o consumo e o ganho de peso dos leitões. Outro fator seria a ausência do farelo de soja, que possui os antígenos glicinina e b-conglicinina, pois, segundo Makkink et al. (1994b) e Ferreira (1999), estes fatores demandam maior produção de enzimas pancreáticas, para a realização da digestão, interferindo no tamanho do órgão.
Os resultados de pH do conteúdo estomacal e intestinal de leitões aos 14, 21, 28 e 35 dias de idade, em razão das dietas experimentais, são apresentados na Tabela 4.
Não foi verificado efeito (P>0,05) das dietas sobre o pH do conteúdo estomacal e intestinal, nas idades analisadas. Observou-se que o pH da ingesta do estômago nas diferentes rações e idades está dentro da faixa ótima para atuação da pepsina (2 a 4) proposta por Passos Jr. (1997). Todavia, os valores de pH do intestino delgado foram baixos (5,68 a 6,23), quando comparados com o pH ideal para a ação da tripsina e quimotripsina (7,8 a 8,1), segundo Makkink et al. (1994a).
Segundo Lopes et al. (1986), o pH estomacal diminui com a idade e a hidrólise de proteína da soja começa a aumentar gradativamente, a partir dos 28 dias de idade; logo, pode-se deduzir que o aproveitamento de alimentos sólidos pelos leitões antes de 21 dias é reduzido em razão do baixo consumo e da pequena capacidade de hidrólise dos alimentos sólidos por estes animais.
Segundo Ferreira (1986), têm-se obtido resultados controversos entre os pesquisadores, com relação ao pH gastrintestinal, devido a uma série de fatores, tais como: a região onde foram feitas as determinações, o tipo de técnica usada para detectar HCl livre, o tempo após a ingestão do alimento, entre outros.
Os resultados de altura das vilosidades, profundidade das criptas e relação vilosidade:cripta do intestino delgado dos leitões, aos 14, 21, 28 e 35 dias de idade, em razão das regiões do intestino delgado, encontram-se apresentados na Tabela 5.
Não houve interação (P>0,05) entre a região do intestino delgado e as dietas experimentais. Também não houve diferença (P>0,05) entre as três regiões do intestino delgado de leitões, para todos parâmetros analisados, o que está de acordo com os estudos feitos por Abreu (1994) e Hampson (1986b).
Os resultados de altura das vilosidades (AV), profundidade das criptas (PC) e relação vilosidade:cripta (RVC) do intestino delgado dos leitões aos 14, 21, 28 e 35 dias de idade, encontram-se apresentados na Tabela 6.
Não se observou efeito (P>0,05) das dietas experimentais sobre a AV e a RVC, nas idades analisadas. Todavia, aos 21 e 35 dias de idade, observou-se efeito (P<0,05) das dietas sobre a PC, sendo que os animais que consumiram as dietas SL e CCFS apresentaram criptas mais profundas, aos 21 e 35 dias de idade, respectivamente. Observaram-se criptas 21,8% mais profundas nos animais que consumiram a dieta CCFS em relação à dieta CSFS.
Os resultados desta pesquisa diferem dos encontrados por Berto et al. (1996), que não observaram efeito de dietas simples ou complexa sobre a morfologia intestinal de leitões desmamados aos 28 dias de idade.
Aumento na PC é compatível com incremento na produção de células e, sobretudo, a um estímulo na renovação das células do intestino delgado, e, segundo Pluske et al. (1996a), a PC e a AV está mais relacionado com o consumo de alimento do que algum efeito antigênico da dieta. Logo, criptas mais profundas aos 21 dias de idade podem estar relacionada com a diferença no consumo de leite da porca. Já aos 35 dias de idade, Mascarenhas et al. (1999), no experimento de desempenho (Tabela 3), observaram 64,2% a mais de consumo da dieta CCFS, em relação à dieta CSFS.
Observou-se efeito quadrático (P<0,01) para altura das vilosidades (Figura 1), efeito linear (P<0,01) para profundidade das criptas (Figura 2) e efeito quadrático (P<0,01) para relação vilosidade:cripta (Figura 3), em razão das idades de abate dos animais.
Aumento da PC em função da idade e redução da AV e RVC do 14o ao 27o e 14o ao 30o dia de idade, respectivamente, foram observados. O aumento da PC, principalmente após o desmame, e a tendência de recuperação da AV e RVC aos 35 dias de idade estão de acordo com Abreu (1994), Cera et al. (1988), Hoppe et al. (1990), Hampson (1986ab) e Miller et al. (1986). Entretanto, não se verificou diminuição drástica da altura das vilosidades com o desmame.
Segundo estes pesquisadores, as vilosidades são maiores no recém-nascido e diminuem gradualmente com a idade, apesar de os leitões ainda estarem mamando. A maior redução ocorre por ocasião do desmame, que pode estar relacionada diretamente com o período durante o qual o leitão, diminui o consumo de matéria seca, com reflexos diretos na taxa de crescimento.
Em revisão, Nabuurs (1995) concluiu que a suplementação de ração durante o período de amamentação é benéfica para prevenir o encurtamento das vilosidades. Teodoro et al. (1998) verificaram que o consumo e a composição da dieta pré e pós-desmame favorecem a produção de enzimas digestiva e a proliferação das células do epitélio intestinal, por meio de efeito trófico, impedindo a diminuição na altura das vilosidades após o desmame.
Os valores de AV obtidos neste trabalho estão abaixo dos achados de Abreu (1994), que, trabalhando no mesmo rebanho, encontrou vilosidades com, aproximadamente, 720, 570, 390 e 470 µm de altura, respectivamente, aos 14, 21, 28 e 35 dias de idades, nas mesmas regiões do intestino delgado, o que, segundo Pluske et al. (1997), pode ser atribuído a fatores como temperatura, sanidade ou manejo da maternidade.
O fornecimento de dieta contendo de 17 a 29% de farelo de soja no pré-desmame também pode ter contribuído para o desenvolvimento de tolerância aos antígenos (glicinina e ß conglicinina), evitando menor diminuição da altura das vilosidades pós-desmame (Li et al., 1990; Abreu, 1994). Por outro lado, Dunsford et al. (1989) observaram alterações morfológicas no intestino delgado de leitões, em razão de altas concentrações de farelo de soja nas dietas iniciais.
Nas análises qualitativas dos fragmentos intestinais, contatou-se que as células caliciformes estão localizadas preferencialmente nas criptas e na base das vilosidades. Não foram observadas descamações e mudança na forma das células epiteliais, em função dos tratamentos. Entretanto, no tratamento CSFS, as Placas de Peyer foram verificadas em todas as regiões, em maior número e tamanho.
Segundo Vega López & Stokes (1994), o tamanho das placas de Peyer pode ser determinado pela idade e pelo conteúdo microbiano do intestino, porém o número e a posição das placas individuais permanecem constantes.
Conclusões
O tipo de dieta, seja simples ou complexa, em razão da qualidade e quantidade dos ingredientes, afetou a profundidade das criptas do intestino delgado e o peso dos órgãos auxiliares da digestão, mas não influenciou o pH do conteúdo estomacal e intestinal de leitões desmamados aos 21 dias de idade.
Literatura Citada
Recebido em: 23/01/01
Aceito em: 10/02/02
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Datas de Publicação
-
Publicação nesta coleção
10 Dez 2003 -
Data do Fascículo
Ago 2003
Histórico
-
Aceito
10 Fev 2002 -
Recebido
23 Jan 2001