Quantificação de Dano em DNA em Diferentes Tecidos em Ratos com Insuficiência Cardíaca

Stefani, Giuseppe Potrick; Nunes, Ramiro Barcos; Rossato, Douglas Dalcin; Hentschke, Vitor Scotta; Domenico, Marlise Di; Lago, Pedro Dal; Rhoden, Cláudia Ramos

doi:10.36660/abc.20180198

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Sumário

Artigo Original • Arq. Bras. Cardiol. 114 (2) • Fev 2020 • https://doi.org/10.36660/abc.20180198 copiar

Quantificação de Dano em DNA em Diferentes Tecidos em Ratos com Insuficiência Cardíaca

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Resumo

Fundamento:

A insuficiência cardíaca crônica (ICC) é uma síndrome complexa que compreende alterações estruturais e funcionais no coração, mantendo demanda sanguínea adequada a todos os tecidos. Poucas investigações procuraram avaliar o dano oxidativo ao DNA na ICC.

Objetivo:

Quantificar o dano ao DNA utilizando o ensaio cometa no ventrículo esquerdo (VE), pulmões, diafragma, gastrocnêmio e sóleo em ratos com ICC.

Métodos:

Doze ratos Wistar machos (300 a 330 g) foram selecionados para o estudo: placebo (n = 6) e ICC (n = 6). Os animais foram submetidos a infarto do miocárdio através de ligadura da artéria coronária esquerda. Após seis semanas, os animais foram sacrificados. Foi realizada uma suspensão celular dos tecidos. O ensaio cometa foi realizado para avaliar as quebras de fita simples e dupla no DNA. Nível de significância (p) < 0,05.

Resultados:

O grupo ICC apresentou maiores valores de pressão diastólica final do ventrículo esquerdo (PDFVE), congestão pulmonar, hipertrofia cardíaca e menores valores de derivados máximos positivos e negativos da pressão do VE, pressão sistólica do VE (p < 0,05). O grupo ICC apresentou maior dano ao DNA (% de DNA da cauda, momento da cauda e momento da cauda de Olive) em comparação ao placebo (p < 0,001). O tecido com maior dano foi o sóleo, comparado ao VE e ao gastrocnêmio no grupo ICC (p < 0,05).

Conclusão:

Nossos resultados indicam que a ICC afeta todos os tecidos, de maneira central e periférica, sendo mais afetada no músculo esquelético (sóleo) e está positivamente correlacionada com a disfunção do VE.

Palavras-chave:
Insuficiência Cardíaca; Ratos; Ratos Endogâmicos; Distribuição Tecidual; Dano ao DNA; Ensaio Cometa

Variáveis	Placebo	ICC
Massa Corporal Inicial (g)	330,25 ± 17,24	328,29 ± 18,12
Massa Corporal Final (g)	400,50 ± 29,61	356,38 ± 32,23
Área Infartada (%)	---	36,39 ± 8,11
MM/BM (mg/g)	2,56 ± 0,08	3,29 ± 0,46^* * P < 0,05 comparado ao grupo placebo.
LV/BM (mg/g)	1,88 ± 0,21	2,36 ± 0,47^* * P < 0,05 comparado ao grupo placebo.
RV/BM (mg/g)	0,58 ± 0,12	1,40 ± 1,01^* * P < 0,05 comparado ao grupo placebo.
Congestão Pulmonar (%)	65,67 ± 9,34	87,31 ± 3,36^* * P < 0,05 comparado ao grupo placebo.
Congestão hepática (%)	70,46 ± 1,05	71,43 ± 1,07

Variáveis	Placebo	ICC
PAM (mmHg)	93,01 ± 14,70	76,78 ± 5,83*
PAD (mmHg)	73,54 ± 16,28	67,54 ± 7,15
PAS (mmHg)	99,75 ± 20,91	85,93 ± 5,51
Frequência cardíaca (bpm)	253,56 ± 70,84	245,19 ± 57,69
PDFVE (mmHg)	5,40 ± 2,26	32,55 ± 5,32*
PSVE (mmHg)	104,24 ± 6,03	89,15 ± 3,15*
+ dP/dt_max (mmHg/s)	6.264,33 ± 1.566,47	4.281,63 ± 708,75*
- dP/dt_max (mmHg/s)	5.209,63 ± 1.274,09	2.823,80 ± 540,65*

		Placebo			ICC
	% Cauda DNA	Momento da Cauda	Momento da Cauda de Olive	% Cauda DNA	Momento da Cauda	Momento da Cauda de Olive
Ventrículo esquerdo	7,65 ± 3,35	0,77 ± 0,44	1,37 ± 0,59	33,29 ± 7,70^* * = p < 0,01 versus placebo em relação à variável e seu tecido correspondente.	10,51 ± 3,31^* * = p < 0,01 versus placebo em relação à variável e seu tecido correspondente.	7,04 ± 1,71^* * = p < 0,01 versus placebo em relação à variável e seu tecido correspondente.
Pulmões	17,86 ± 3,93	6,76 ± 2,59	7,31 ± 2,15	36,20 ± 5,17^* * = p < 0,01 versus placebo em relação à variável e seu tecido correspondente.	23,30 ± 7,25^* * = p < 0,01 versus placebo em relação à variável e seu tecido correspondente.	19,10 ± 4,65^* * = p < 0,01 versus placebo em relação à variável e seu tecido correspondente.
Diafragma	6,86 ± 2,63	1,40 ± 0,93	1,82 ± 0,79	41,23 ± 13,86^* * = p < 0,01 versus placebo em relação à variável e seu tecido correspondente.	14,06 ± 6,51^* * = p < 0,01 versus placebo em relação à variável e seu tecido correspondente.	9,82 ± 3,03^* * = p < 0,01 versus placebo em relação à variável e seu tecido correspondente.
Gastrocnêmio	7,63 ± 4,66	1,04 ± 0,88	1,43 ± 0,70	28,07 ± 15,53^* * = p < 0,01 versus placebo em relação à variável e seu tecido correspondente.	8,69 ± 5,14^* * = p < 0,01 versus placebo em relação à variável e seu tecido correspondente.	6,17 ± 3,53^* * = p < 0,01 versus placebo em relação à variável e seu tecido correspondente.
Sóleo	11,54 ± 2,46	1,53 ± 0,96	1,84 ± 0,76	55,79 ± 11,53^* * = p < 0,01 versus placebo em relação à variável e seu tecido correspondente.	20,90 ± 5,32^* * = p < 0,01 versus placebo em relação à variável e seu tecido correspondente.	12,83 ± 3,68^* * = p < 0,01 versus placebo em relação à variável e seu tecido correspondente.

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[1] Correspondência: Giuseppe Potrick Stefani, Universidade Federal de Ciências da Saúde de Porto Alegre - Sarmento Leite street, 245. CEP 90050-170, Porto Alegre, RS - Brasil. Email: gpotrick@gmail.com