Refrigerated storage of dusky grouper <i>Epinephelus marginatus</i> sperm

This study aimed to evaluate different extenders in refrigerated storage of dusky grouper sperm. Initially, motility rate, motility time, and sperm density were analyzed to characterize the fresh sperm quality. Different diluents were used in the refrigerated storage sperm at 4ºC in normal atmosphere and modified atmosphere (100% oxygen). The fresh sperm has a spermatozoa density of 3.1±0.2 x 10⁹ spermatozoa mL^-1, motility rate 90% and motility time of 3,060 seconds. In the experiment of refrigerated storage, the motility rate and the motility time were maintained appropriate for 144 hours for the extender A (70%; 3,100 seconds) in normal atmosphere. In the modified atmosphere, the sperm quality decreased drastically during the first 24 hours, independently of the diluent used, not propitiating advantages. The refrigerated sperm of dusky grouper is a viable alternative for the short-term storage, being possible, to maintain for up to 144 hours an appropriate sperm viability.

Keywords:
extenders; modified atmosphere; spermatic cooling; spermatozoid

Authorship

F.C. Silva

Instituto de Pesca ˗ Ubatuba, SPInstituto de PescaBrazilUbatuba, SP, BrazilInstituto de Pesca ˗ Ubatuba, SP

V.V. Kuhnen

Instituto de Pesca ˗ Ubatuba, SPInstituto de PescaBrazilUbatuba, SP, BrazilInstituto de Pesca ˗ Ubatuba, SP

E.G. Sanches ^**Autor para correspondência (corresponding author) E-mail: esanches@pesca.sp.gov.br

Instituto de Pesca ˗ Ubatuba, SPInstituto de PescaBrazilUbatuba, SP, BrazilInstituto de Pesca ˗ Ubatuba, SP

*Autor para correspondência (corresponding author) E-mail: esanches@pesca.sp.gov.br

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Tables (4)

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Tabela 1
Taxa de motilidade (%; média ± desvio-padrão) do sêmen de Epinephelus marginatus (n=10 machos, três replicatas/tratamento) submetido à refrigeração a 4°C, diluído 1:3 (v/v) em diferentes diluentes⁽¹⁾

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Tabela 2
Duração da motilidade (segundos; média ± desvio-padrão) do sêmen de Epinephelus marginatus (n=10 machos, três replicatas/tratamento) submetido à refrigeração a 4°C, diluído 1:3 (v/v) em diferentes diluentes⁽¹⁾

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Tabela 3
Taxa de motilidade (%; média ± desvio-padrão) do sêmen de Epinephelus marginatus (n=10 machos, três replicatas/tratamento) submetido à refrigeração a 4°C, em atmosfera modificada (100% oxigênio), diluído 1:3 (v/v) em diferentes diluentes⁽¹⁾

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Tabela 4
Duração da motilidade (segundos; média ± desvio-padrão) do sêmen de Epinephelus marginatus (n=10 machos, três replicatas/tratamento) submetido à refrigeração a 4°C, em atmosfera modificada (100% oxigênio), diluído 1:3 (v/v) em diferentes diluentes⁽¹⁾

Tabela 1 Taxa de motilidade (%; média ± desvio-padrão) do sêmen de Epinephelus marginatus (n=10 machos, três replicatas/tratamento) submetido à refrigeração a 4°C, diluído 1:3 (v/v) em diferentes diluentes⁽¹⁾

Diluentes⁽²⁾	Tempo de resfriamento (h)
Diluentes⁽²⁾	0	12	24	48	72	144
A (pH 6,1)	100 ± 0aA	90 ± 0aA	90 ± 0aA	70 ± 0aB	70 ± 5aB	32 ± 3aC
B (pH 7,8)	100 ± 0aA	90 ± 0aA	90 ± 0aA	60 ± 0aB	50 ± 5aB	5 ± 1 bC
C (pH 8,2)	100 ± 3aA	90 ± 0aA	70 ± 0bB	20 ± 0bC	3 ± 0bD	0 ± 0cD
Sêmen não diluído	100 ± 3aA	40 ± 3bB	0 ± 0cC	-	-	-

^*
¹⁾Médias seguidas por letras distintas, minúsculas na coluna e maiúsculas na linha, diferem significativamente pelo teste de Tukey a 5% de probabilidade.
^*
²⁾Diluente A (g/L) = NaCl, 7,89; KCl, 1,19; CaCl₂, 0,2; MgCl₂, 0,4266; pH 6,1; 158 mOsm; diluente B (g/L) = NaCl, 6,5; KCl, 3,0; CaCl₂, 0,3; NaHCO₃, 0,2; pH 7,8; 157 mOsm; diluente C (g/L) = NaCl, 7,89; KCl, 1,19; CaCl₂, 0,22; MgCl₂, 0,72531; NaH₂PO₄, 0,0805; NaHCO₃, 0,84; pH 8,2; 172mOsm.

Tabela 2 Duração da motilidade (segundos; média ± desvio-padrão) do sêmen de Epinephelus marginatus (n=10 machos, três replicatas/tratamento) submetido à refrigeração a 4°C, diluído 1:3 (v/v) em diferentes diluentes⁽¹⁾

Diluentes⁽²⁾	Tempo de resfriamento (h)
Diluentes⁽²⁾	0	12	24	48	72	144
A (pH 6,1)	3060 ± 600aB	3800 ± 400aA	3400 ± 300aA	3200 ± 300aA	3100 ± 200aA	2900 ± 200aB
B (pH 7,8)	3060 ± 600aB	3600 ± 400aA	3200 ± 400aA	2500 ± 300bB	2000 ± 200bC	1500 ± 200bD
C (pH 8,2)	3060 ± 600aB	3600 ± 400aA	3000 ± 300bB	1200 ± 200cC	600 ± 300cD	0 ± 0cE
Sêmen não diluído	3060 ± 600aA	600 ± 200bB	0 ± 0cC	-	-	-

^*
¹⁾Médias seguidas por letras distintas, minúsculas na coluna e maiúsculas na linha, diferem significativamente pelo teste de Tukey a 5% de probabilidade.
^*
²⁾Diluente A (g/L) = NaCl, 7,89; KCl, 1,19; CaCl₂, 0,2; MgCl₂, 0,4266; pH 6,1; 158mOsm; diluente B (g/L) = NaCl, 6,5; KCl, 3,0; CaCl₂, 0,3; NaHCO₃, 0,2; pH 7,8; 157mOsm; diluente C (g/L) = NaCl, 7,89; KCl, 1,19; CaCl₂, 0,22; MgCl₂, 0,72531; NaH₂PO₄, 0,0805; NaHCO₃, 0,84; pH 8,2; 172mOsm.

Tabela 3 Taxa de motilidade (%; média ± desvio-padrão) do sêmen de Epinephelus marginatus (n=10 machos, três replicatas/tratamento) submetido à refrigeração a 4°C, em atmosfera modificada (100% oxigênio), diluído 1:3 (v/v) em diferentes diluentes⁽¹⁾

Diluentes⁽²⁾	Tempo de resfriamento (h)
Diluentes⁽²⁾	0	12	24	48
A (pH 6,1)	100 ± 0aA	30 ± 10aB	10 ± 5aC	0 ± 0aC
B (pH 7,8)	100 ± 0aA	30 ± 10aB	10 ± 0aC	0 ± 0aC
C (pH 8,2)	100 ± 0aA	20 ± 5aB	10 ± 0aC	0 ± 0aC
Sêmen não diluído	100 ± 0aA	0 ± 0bB	-	-

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¹⁾Médias seguidas por letras distintas, minúsculas na coluna e maiúsculas na linha, diferem significativamente pelo teste de Tukey a 5% de probabilidade.
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²⁾Diluente A (g/L) = NaCl, 7,89; KCl, 1,19; CaCl₂, 0,2; MgCl₂, 0,4266; pH 6,1; 158mOsm; diluente B (g/L) = NaCl, 6,5; KCl, 3,0; CaCl₂, 0,3; NaHCO₃, 0,2; pH 7,8; 157mOsm; diluente C (g/L) = NaCl, 7,89; KCl, 1,19; CaCl₂, 0,22; MgCl₂, 0,72531; NaH₂PO₄, 0,0805; NaHCO₃, 0,84; pH 8,2; 172mOsm.

Tabela 4 Duração da motilidade (segundos; média ± desvio-padrão) do sêmen de Epinephelus marginatus (n=10 machos, três replicatas/tratamento) submetido à refrigeração a 4°C, em atmosfera modificada (100% oxigênio), diluído 1:3 (v/v) em diferentes diluentes⁽¹⁾

Diluente⁽²⁾	Tempo de resfriamento (h)
Diluente⁽²⁾	0	12	24	48
A (pH 6,1)	3060 ± 600aA	2100 ± 200aB	1000 ± 150aC	0 ± 0aD
B (pH 7,8)	3060± 600aA	2200 ± 300aB	1100 ± 200aC	0 ± 0aD
C (pH 8,2)	3060± 600aA	2000 ± 300aB	1000 ± 200aC	0 ± 0aD
Sêmen não diluído	3060± 600aA	0 ± 0bB	-	-

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¹⁾Médias seguidas por letras distintas, minúsculas na coluna e maiúsculas na linha, diferem significativamente pelo teste de Tukey a 5% de probabilidade.
^*
²⁾Diluente A (g/L) = NaCl, 7,89; KCl, 1,19; CaCl₂, 0,2; MgCl₂, 0,4266; pH 6,1; 158mOsm; diluente B (g/L) = NaCl, 6,5; KCl, 3,0; CaCl₂, 0,3; NaHCO₃, 0,2; pH 7,8; 157mOsm; diluente C (g/L) = NaCl, 7,89; KCl, 1,19; CaCl₂, 0,22; MgCl₂, 0,72531; NaH₂PO₄, 0,0805; NaHCO₃, 0,84; pH 8,2; 172mOsm.

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[1] *Autor para correspondência (corresponding author) E-mail: esanches@pesca.sp.gov.br