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Alteração topográfica da curvatura corneana após aplicação de radiofreqüência em modelo animal

Corneal topographic alteration after radiofrequency application to an animal model

Resumos

OBJETIVOS: Verificar as alterações topográficas em córneas de olhos suínos enucleados após aplicações de radiofreqüência. MÉTODOS: Foi utilizado um protótipo produtor de radiofreqüência, com 10 diferentes possibilidades de potência. Para cada potência foram utilizados 10 olhos de porco enucleados que foram topografados pré e pós-aplicação de radiofreqüência seguindo nomograma com 8 pontos na primeira fase, 16 pontos na segunda fase, e 24 pontos na terceira fase, somando 3 fases para cada olho, num total de 300 aplicações e 400 topografias. RESULTADOS:Ocorreram variações da curvatura corneana após as aplicações de radiofreqüência para todas as potências utilizadas, demonstradas pela variação das médias de KM (dioptria mínima) inicial e KM final (35,78 e 37,37, respectivamente) com uma variação de 1,59 dioptrias (p< 0,001). A potência que apresentou maior regularidade foi de 0,625W/s (65ºC). CONCLUSÃO: Os valores topográficos obtidos demonstram que na média houve aumento da curvatura corneana central após aplicação de radiofreqüência em olhos de porco enucleados, e que quanto maior a energia utilizada e maior número de aplicações, maior foi o encurvamento corneano, porém não respeitando um padrão homogêneo.

Topografia da córnea; Erros de refração; Enucleação ocular; Ondas de rádio; Suínos; Modelos animais de doenças


PURPOSE: To verify the topographical alterations in enucleated pig eye cornea after radiofrequency application. METHODS: A prototype radiofrequency modulator with 10 different energy possibilities was used. For each energy we used 10 enucleated pig eyes that were topographed before and after applyng radiofrequency, following a nomogram with 8 spots in step one, 16 spots in step 2, and 24 spots in step 3, in a total of 3 steps for each eye, 300 applications and 400 topographies. RESULTS: Corneal curvature variation occurred after radiofrequency applications for all utilized selections, demonstrated by the mean variation of initial KM (minimum dioptry) and final KM (35.78 and 37.37 respectively) with 1.59 dioptries of variation (p<0.001). The energy that demonstrated more stability was 0.625W/s (65ºC). CONCLUSION: The obtained topographic values demonstrated that the central corneal curvature increased after radiofrequency application, and the higher the energy and the more spots used, more curved became the cornea, despite homogeneity.

Corneal topography; Refractive errors; Eye enucleation; Radio waves; Swine; Disease models, animal


ARTIGO ORIGINAL

Alteração topográfica da curvatura corneana após aplicação de radiofreqüência em modelo animal

Corneal topographic alteration after radiofrequency application to an animal model

Leonardo Verri PaulinoI; Eduardo PaulinoII; Rodrigo Andrade de BarrosIII; Álvaro Gonçalves de SallesIV; José Ricardo Carvalho Lima RehderV

IMédico Colaborador dos Setores de Córnea e Catarata do Departamento de Oftalmologia da Faculdade de Medicina do ABC (FMABC). Santo André (SP)

IIMédico Colaborador do Setor de Cirurgia Refrativa do Departamento de Oftalmologia da FMABC. Santo André (SP)

IIIMédico Colaborador dos Setores de Cirurgia Refrativa e Catarata do Departamento de Oftalmologia da FMABC. Santo André (SP)

IVMédico Residente do Departamento de Oftalmologia da FMABC. Santo André (SP)

VProfessor Titular e Chefe da Disciplina de Oftalmologia da FMABC. Santo André (SP) e Professor Adjunto Doutor da Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP). São Paulo (SP)

Endereço para correspondência Endereço para correspondência Leonardo Verri Paulino Av. Araguaia, 437 São Bernardo do Campo (SP) CEP 09830-110 E-mail: leonardovpaulino@hotmail.com

RESUMO

OBJETIVOS: Verificar as alterações topográficas em córneas de olhos suínos enucleados após aplicações de radiofreqüência.

MÉTODOS: Foi utilizado um protótipo produtor de radiofreqüência, com 10 diferentes possibilidades de potência. Para cada potência foram utilizados 10 olhos de porco enucleados que foram topografados pré e pós-aplicação de radiofreqüência seguindo nomograma com 8 pontos na primeira fase, 16 pontos na segunda fase, e 24 pontos na terceira fase, somando 3 fases para cada olho, num total de 300 aplicações e 400 topografias.

RESULTADOS:Ocorreram variações da curvatura corneana após as aplicações de radiofreqüência para todas as potências utilizadas, demonstradas pela variação das médias de KM (dioptria mínima) inicial e KM final (35,78 e 37,37, respectivamente) com uma variação de 1,59 dioptrias (p< 0,001). A potência que apresentou maior regularidade foi de 0,625W/s (65ºC).

CONCLUSÃO: Os valores topográficos obtidos demonstram que na média houve aumento da curvatura corneana central após aplicação de radiofreqüência em olhos de porco enucleados, e que quanto maior a energia utilizada e maior número de aplicações, maior foi o encurvamento corneano, porém não respeitando um padrão homogêneo.

Descritores: Topografia da córnea; Erros de refração/cirurgia; Enucleação ocular; Ondas de rádio; Suínos; Modelos animais de doenças

ABSTRACT

PURPOSE: To verify the topographical alterations in enucleated pig eye cornea after radiofrequency application.

METHODS: A prototype radiofrequency modulator with 10 different energy possibilities was used. For each energy we used 10 enucleated pig eyes that were topographed before and after applyng radiofrequency, following a nomogram with 8 spots in step one, 16 spots in step 2, and 24 spots in step 3, in a total of 3 steps for each eye, 300 applications and 400 topographies.

RESULTS: Corneal curvature variation occurred after radiofrequency applications for all utilized selections, demonstrated by the mean variation of initial KM (minimum dioptry) and final KM (35.78 and 37.37 respectively) with 1.59 dioptries of variation (p<0.001). The energy that demonstrated more stability was 0.625W/s (65ºC).

CONCLUSION: The obtained topographic values demonstrated that the central corneal curvature increased after radiofrequency application, and the higher the energy and the more spots used, more curved became the cornea, despite homogeneity.

Keywords: Corneal topography; Refractive errors/surgery; Eye enucleation; Radio waves; Swine; Disease models, animal

INTRODUÇÃO

Com os conhecimentos compartilhados hoje pela comunidade oftalmológica, muito tem sido feito para a resolução dos problemas ópticos mais comuns, como a miopia, a hipermetropia e o astigmatismo(1).

Como o comprimento do globo ocular e o índice refrativo das estruturas oculares são unidades de difícil manipulação, a forma mais utilizada atualmente para a correção de ametropias é a modificação da curvatura corneana. No caso de um paciente com olho hipermétrope, a intenção é a de tornar a córnea mais curva centralmente(1-2). As primeiras tentativas experimentais de modificação da estrutura corneana foram realizadas a mais de 100 anos, quando Lendert Jan Lans, publicou em 1898* * Lans JL (1898). Experimental studies of astigmatic treatment with non perfurating corneal incisions. apud (3) seu trabalho e os conceitos básicos deste trabalho permitiram o desenvolvimento, em meados da década de 60, da técnica de ceratotomia radial(3).

A termoceratoplastia também teve sua origem em experimentos de Lans, que em 1890** ** Lans JL (1890) apud (4-5) demonstrou que a aplicação de queimaduras térmicas superficiais, em córneas de coelho, levava a alterações de sua curvatura(4-5). Com esta informação, 80 anos depois, estabeleceu-se que a temperatura ideal para aplicação corneana estava em torno de 65ºC. Esta temperatura levava a um encolhimento das fibras de colágeno de 30% a 50%(5-6).

Em 1979, na tentativa de minimizar os efeitos colaterais da aplicação térmica na superfície corneana, criou-se um aparelho denominado "The Los Alamos Termoceratoplasty Probe", que utilizava pela primeira vez a radiofreqüência, aquecendo o colágeno no centro de córneas com ceratocone com intuito de diminuir sua curvatura(7-8).

Na década de 80, desenvolveu-se em Moscou um procedimento que era um híbrido das técnicas de queimadura térmica corneana com o "Los Alamos Probe" de Rowsey, denominada termoceratoplastia radial. A técnica consistia de múltiplas aplicações de uma agulha retrátil profundamente no estroma corneano, que por 40 milisegundos liberava 600ºC de calor; criando assim um encolhimento das fibras de colágeno que formava um cinturão circunferencial periférico, levando a um encurvamento central(9).

As técnicas de termoceratoplastia apresentam, em relação a ceratectomia fotorrefrativa, a vantagem da correção da hipermetropia sem manipular a zona óptica central. A desvantagem está relacionada à regressão progressiva do efeito da correção cirúrgica demonstrada com o passar dos anos(7-9).

Estatisticamente, segundo o "The Baltimore Eye Study" realizado por pesquisadores da John Hopkins University, a hipermetropia afeta aproximadamente 60 milhões de pacientes acima de 40 anos nos EUA (o dobro em relação à miopia na mesma faixa etária)(10).

Atualmente existem duas técnicas de termoceratoplastia liberadas para uso pelo FDA, o LTK (laser termal keratoplasty) com holmium:Yag laser e o CK (conductive keratoplasty) que utiliza radiofreqüência.

O objetivo deste trabalho é verificar as alterações topográficas em córneas de olhos enucleados de suínos após aplicações de radiofreqüência.

MÉTODOS

Este trabalho foi desenvolvido no Laboratório de Cirurgia Experimental do Departamento de Oftalmologia da Faculdade de Medicina da Faculdade de Medicina do ABC, entre o período de 15 de maio de 2002 a 15 de outubro de 2002, com o objetivo de verificar a previsibilidade das alterações topográficas após a aplicação de radiofreqüência em modelo animal, utilizando tecnologia nacional.

O objeto biológico utilizado no experimento foi o olho de porco enucleado. Para o emprego da radiofreqüência a empresa Loktal Medical Eletronics (São Paulo, SP) desenvolveu um aparelho experimental com as seguintes características:

• Freqüência de trabalho: 333 Khz

• Pólo ativo em uma caneta porta eletrodos

• Pólo passivo no blefarostato ou na placa de sucção

• Eletrodo ativo com filamento de aço inox nas dimensões de: comprimento 420 µ - diâmetro 90 µ

O topógrafo utilizado para a verificação das alterações de superfície corneana foi o modelo TMS-2 V2.2.3 da marca Tomey.

Para permitir uma reprodutibilidade da aplicação da radiofreqüência nos olhos de porco e sua avaliação pelo topógrafo foi desenvolvido um aparato de apresentação e transporte destes olhos. Este aparato constitui-se de uma caixa de isopor de 13,5 cm de altura por 15 cm de base e 7 cm de largura. Nesta caixa foi acoplada perpendicularmente, a 9 cm de altura e 4 cm no sentido horizontal, uma tampa plástica de bisnaga de centro cirúrgico ligada a uma seringa de 10 ml através de um tubo de borracha flexível. Nesta mesma tampa plástica foi acondicionada uma placa de sucção do aparelho de radiofreqüência, que está conectada ao fio condutor passivo e uma cânula de borracha ligada a uma seringa de 20 ml.

As duas seringas acopladas servem como mecanismo de fixação do olho de porco ao sistema possibilitando uma manipulação e transporte mais seguro.

A metodologia constitui-se em colocar o olho de porco enucleado no aparato de transporte com seu maior diâmetro corneano na horizontal (maior diâmetro representa a posição nasal/ temporal pela anatomia corneana normal(1)); injetar 0,5 ml de soro fisiológico 0,9 % (SF) em câmara vítrea através de punção escleral com agulha de insulina, realizar uma desepitelização mecânica e, depois de umedecida a córnea por colírio lubrificante, topografar o olho. O aparato por suas características encaixa-se perfeitamente no topógrafo utilizado. (Figura 1a e 1b).



Obtida a topografia inicial, olho é submetido a uma secagem com hastes flexíveis de algodão.

A marcação dos pontos de aplicação de radiofreqüência foi realizada no centro óptico da córnea, com 7,0 mm de diâmetro e 8 segmentos de raio. O marcador utilizado foi o de cirurgias refrativas incisionais de Fyodorov e o centro óptico foi determinado através de reflexo luminoso.

Para cada posição de chave (nível de potência) do aparelho foram avaliados dez olhos de porco obedecendo ao seguinte nomograma:

• Fase 1 - oito aplicações de 0,60 segundos cada, realizadas exatamente a 7,0 mm de diâmetro nos oito pontos de cruzamento de raio.

• Fase 2 - oito aplicações de 0,60 segundos cada, no diâmetro imediatamente externo dos mesmos pontos de raio, somando dezesseis aplicações.

• Fase 3 - oito aplicações de 0,60 segundos cada, no diâmetro imediatamente interno destes pontos de raio, totalizando vinte e quatro aplicações. (Figura 2 e 3).



Cada um dos 10 olhos passou pelas 3 fases de aplicação, sendo topografado antes da primeira fase, e entre cada fase. Portanto, para cada nível de potência foi realizado um total de 30 aplicações e 40 topografias (3 aplicações e 4 topografias para cada um dos 10 olhos), somando um total de 300 aplicações e 400 topografias ao final do trabalho.

A aplicação de SF antes do início do procedimento é necessária para aumentar a tonicidade do globo ocular que, pelo fato de ter sido enucleado 24 horas antes do procedimento, apresenta certa hipotonia. Isto possibilita a introdução da ponta de aplicação de radiofreqüência sem causar uma deformidade excessiva da córnea. O volume ideal desta infusão foi determinado por tonometria bidigital após testes de aplicação de variações volumétricas entre zero e 2 ml, com intervalos de 0,5 ml, realizados em 10 olhos não considerados no experimento.

A lubrificação ocular com o colírio regulariza a superfície corneana permitindo a realização da topografia com mais precisão, e a secagem é importante para que não ocorram perdas do poder energético da radiofreqüência por contato com o líquido durante a aplicação.

Entre cada uma das fases o olho foi umedecido, sendo submetido à nova secagem antes da próxima aplicação.

Foram montadas as planilhas de cada potência sendo inseridos os valores iniciais de K1 (dioptria mais curva), K2 (dioptria mais plana) e KM (dioptria mínima) para cada um dos dez olhos avaliados, e subseqüentemente, os valores obtidos após aplicação energética em 8 pontos, 16 pontos e 24 pontos, progressivamente. Abaixo destes valores foram demonstrados a média aritmética e o desvio padrão de cada coluna, além da variação encontrada após cada aplicação. Após as três fases cada olho foi desprezado.

A análise dos resultados foi realizada através dos programas Statistica 5.0 e SPSS 10.0 for Windows. As comparações entre os grupos foram realizadas usando o teste t de Student pareado devido as variáveis numéricas. Valores de p inferiores a 0,05 foram considerados significantes.

RESULTADOS

Os resultados topográficos obtidos pelos 10 olhos avaliados em cada potência testada estão demonstrados pela média aritmética e o desvio padrão de K1, K2 e KM, no início e após cada fase de aplicação (Tabela 1).

A média geral de KM inicial e KM após a terceira aplicação foi de 35,78 e 37,37, respectivamente, demonstrando uma variação positiva de curvatura de 1,59 dioptrias (p< 0,001).

Nas posições 0, 1, 2 e 4 da chave, ocorreram diminuição da curvatura central corneana em pelo menos uma das fases de aplicação. Este aplanamento verificado ocorreu de forma irregular e sem significância estatística.

Nas outras potências, em todas as aplicações, a curvatura corneana aumentou, porém as variações não se apresentaram de maneira uniforme.

A potência referente à posição "6" (0,625 W/s ou 65ºC) apresentou uma variação entre KM inicial e final de 1,15, mantendo a maior regularidade e significância estatística entre as medidas aferidas. Isto se demonstra pela correlação da análise pareada entre as variáveis após cada a aplicação (Tabela 2).

Nesta mesma potência, quando comparado a média de K1 inicial e K1 após a terceira aplicação a variação foi de 2,10 (p=0,007), de K2 inicial e K2 após a terceira aplicação variou 1,70 (p=0,009), e entre KM inicial e KM após a terceira aplicação foi de 3,10 (p=0,049).

A posição 8 (0,787W/s ou 67ºC), apesar de obter resultados de menor regularidade em relação à posição 6, apresentou significância estatística entre a diferença da média de K1, K2 e KM inicial com K1, K2 e KM após a terceira aplicação (respectivamente de 4,30 dioptrias (p=0,001), 5,00 (p=0,001) e 4,60 (p<0,001)).

Para melhor visualização dos resultados foi desenvolvido um gráfico linear considerando-se os valores médios de KM do início ao fim das aplicações para todas as potências. (Gráfico 1)


DISCUSSÃO

A ceratoplastia condutiva (CK) é um procedimento cirúrgico aprovado pelo FDA em 2002 para uso em hipermetropias entre +0,75 a + 3,25 dioptrias com até -0,75 de astigmatismo.

O conceito da CK é uma fusão dos conhecimentos adquiridos através da técnica de termoceratoplastia de Fyodorov com a tecnologia de radiofreqüência desenvolvida por JJ Rowsey. A primeira corrigia hipermetropias com queimaduras térmicas na periferia do estroma corneano, e a segunda utilizava um aplicador de radiofreqüência para aplanar o centro de ceratocones.

A utilização da radiofreqüência eleva a temperatura no estroma corneano de forma mais regular e controlada que a queimadura térmica, provocando um encolhimento das fibras de colágeno de forma mais duradoura, comprovado em pesquisas microscópicas(11) .Quando aplicada na periferia da córnea forma um cinturão circunferencial provocando um encurvamento central(9,12-13).

Este estudo demonstra, de forma semelhante ao resultado obtido por experimento realizado em 2002 nos E.U.A.(14), a possibilidade de aumento da curvatura corneana central após aplicação de radiofreqüência em sua periferia.

Observou-se que quanto maior a energia utilizada e maior número de aplicações, maior era o encurvamento corneano, porém não respeitando um padrão homogêneo. A potência que obteve maior regularidade no aumento de curvatura após as aplicações foi a de posição "6" (0,625 W/s ou 65ºC), que confirma os resultados obtidos no trabalho de termoceratoplastia de 1970(5).

Em algumas posições obtiveram-se variabilidades negativas após uma das aplicações de energia, além de diferentes respostas topográficas para aplicações de mesma potência em diferentes olhos de porco. Estas alterações justificam-se em função das condições peculiares de conservação de cada olho no momento do experimento, e da dificuldade técnica do exame topográfico dos mesmos.

CONCLUSÃO

Pelos dados obtidos no trabalho, seguindo a metodologia proposta, a média final das dioptrias demonstra um encurvamento corneano central em olhos suínos enucleados após a aplicação de radiofreqüência. Quanto maior a energia utilizada e maior número de aplicações, maior o encurvamento corneano, sem respeitar um padrão homogêneo.

AGRADECIMENTOS

À Lourdes da Conceição Martins, Auxiliar de Ensino do Departamento da Saúde da Coletividade da Faculdade de Medicina do ABC, pelo auxílio na análise estatística.

Recebido para publicação em 25.08.2004

Versão revisada recebida em 18.02.2005

Aprovação em 07.04.2005

Trabalho realizado no Departamento de Oftalmologia da Faculdade de Medicina do ABC.

Nota Editorial: Após concluída a análise do artigo sob sigilo editorial e com a anuência do Dr. Renato Ambrósio Jr sobre a divulgação de seu nome como revisor, agradecemos sua participação neste processo.

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  • Endereço para correspondência

    Leonardo Verri Paulino
    Av. Araguaia, 437
    São Bernardo do Campo (SP) CEP 09830-110
    E-mail:
  • *
    Lans JL (1898). Experimental studies of astigmatic treatment with non perfurating corneal incisions. apud
    (3)
  • **
    Lans JL (1890) apud
    (4-5)
  • Datas de Publicação

    • Publicação nesta coleção
      22 Nov 2005
    • Data do Fascículo
      Ago 2005

    Histórico

    • Aceito
      07 Abr 2005
    • Revisado
      18 Fev 2005
    • Recebido
      25 Ago 2004
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