APLICAÇÃO DE NOVO PROTOCOLO DE PCR PARA AVALIAÇÃO E MONITORAMENTO DA INFECÇÃO DE BOMBYX MORI PELO VÍRUS DA NUCLEOPOLIEDROSE

RESUMO

A reação em cadeia pela polimerase (PCR) com primers complementares a uma região do gene da poliedrina foi usada para diagnosticar a infecção de B. mori pelo vírus da nucleopoliedrose (BmNPV). Infecções experimentais foram realizadas para a padronização do ensaio de PCR. Os produtos de PCR foram seqüenciados e a especificidade da amplificação foi confirmada por comparação com seqüências de nucleotídeos do BmNPV disponível no GenBank. Um grau de identidade ao redor de 99% foi observado quando tais produtos de PCR foram comparados com as seqüências de BmNPV conhecidas. O protocolo de amplificação do fragmento gênico viral proposto aqui é útil para o diagnóstico precoce da nucleopoliedrose na larva total, hemolinfa e ovos infectados ou em insetos assintomáticos. Além disso, o ensaio de PCR padronizado pode ser empregado como uma ferramenta para a vigilância e controle da nucleopoliedrose em criações de bicho-da-seda.

PALAVRAS-CHAVE:
Bombyx mori, diagnóstico; vírus da nucleopoliedrose; reação de PCR; seqüenciamento de nucleotídeo.