PESQUISA DO VÍRUS DA PESTE SUÍNA CLÁSSICA EM SUÍNOS SADIOS ABATIDOS EM MATADOUROS NO ESTADO DE SÁO PAULO

IDENTIFICATION OF HOG CHOLERA VIRUS IN NORMAL SWINE AT ABATTOIRS IN SÃO PAULO STATE

RESUMO

No presente estudo, que abrangeu o período de 1984 a 1998 foi pesquisado o vírus da Peste Suína Clássica (PSC) em tonsilas de suínos normais, colhidas em matadouros localizados nos municípios de Valinhos, Vinhedo, Suzano e Itapecirica da Serra, Estado de São Paulo, Brasil. As técnicas de diagnóstico utilizadas foram a imunofluorescência direta (IFD) em cortes de tonsilas e imunofluorescência indireta (IFI) em células da linhagem PK-15. Dos 341 materiais examinados 67 (19,64%), mostraram-se positivos ao teste de IFD. Os autores alertam para a presença de suínos portadores que podem disseminar a virose.

PALAVRAS-CHAVE:
Peste suína clássica; matadouros; imunofluorescência.

ABSTRACT

From 1984 to 1998, 341 swine tonsils collected in abattoirs from Valinhos, Vinhedo, Suzano e Itapecirica da Serra, in the state of São Paulo, Brazil, were examined for the diagnosis of swine fever. Sixthy seven (19,64%) samples were positive by direct immunofluorescent test (DIFT) on frozen tissue. This study showed the swine as carrier this viruses.

KEY WORDS:
Hog cholera; abattoirs; immunofluorescence.

INTRODUÇÃO

A peste suína clássica (PSC) é uma doença multisistêmica dos suínos, causada por um Pestivírus. A infecção ocorre pela via oro-nasal, sendo as tonsilas o primeiro sítio de replicação do vírus (DUNNE et al., 1959; MENGELING & PACKER, 1969; BERSANO et al., 1985; BIRONT et al., 1987), que em seguida, penetra na corrente circulatória alcançando linfonodos, baço, rins, porção distal do íleo e cérebro (SARMA & SARMA, 1996).

A presença de vírus infeccioso nos tecidos dos animais é o fator mais importante na disseminação da PSC e em certos estágios da infecção, pode escapar à detecção durante a rotina de inspeção antes e após a matança (WOOD et al., 1988).

Desde que a PSC foi descrita no Estado de São Paulo (PENHA, 1934), a forma típica, na qual estão envolvidas as cepas de alta virulência, tem sido a mais freqüentemente observada. Geralmente fatal, principalmente em leitões desmamados, foi responsável pela ocorrência de 208 focos, diagnosticados em diferentes regiões do estado de São Paulo, no período de 1983 a 1993 (BERSANO et al., 1994), o que demonstrou a ampla disseminação da enfermidade.

A existência de cepas de baixa e moderada virulência, ocasionando formas atípicas de PSC, tem sido descrito na literatura (CRIPPS, 1954; CARBREY et al., 1966; MENGELING & PACKER, 1969; KORN et al., 1969;DUNNE, 1973; NECOCHEA, 1974; AYNOUD, et al., 1977;VANNIER, 1981; MOENING & PLAGEMANN, 1992).

No Brasil, COSTA (1978) incriminou as formas atípicas pela morte de leitões apenas na fase de aleitamento. BERSANO et al. (1996) comprovaram o envolvimento de cepas de baixa virulência na etiologia de agenesia da primeira falange dos membros posteriores em leitões.

PLATEAU et al. (1980) também comprovaram através de experiências de campo e reprodução experimental que, a imunotolerância, responsável pelo nascimento de leitões persistentemente infectados, é induzida por amostras de vírus da PSC de baixa patogenicidade.

CARBREY et al. (1980) relataram que cerca de 6% dos animais respondem à agressão com diferentes cepas do vírus da PSC, apresentando uma infecção persistente, o que seria um indicador razoável da freqüência deste evento em condições de campo.

OIRSCHOT & TERPSTRA (1977), ao discorrerem sobre a patogenia da PSC, relataram que quando uma fêmea gestante é exposta a cepa de vírus de baixa virulência e este, ao ser transmitido ao feto pode dar origem a natimortos, leitegada de tamanho reduzido como também leitões aparentemente sadios mas, persistentemente infectados.

De acordo com MOENING & PLAGEMANN (1992), do ponto de vista epidemiológico e econômico, as infecções uterinas são o maior perigo atribuído aos pestivirus, em virtude de originar suínos persistentemente infectados.

O estado de portador inaparente, foi também citado por AYNAUD (1976), que associou o evento ao uso de vacina cristal violeta que, segundo o autor, conferia proteção imperfeita ao rebanho.

Muito embora a PSC tenha sido erradicada em alguns países como Austrália, Canadá, Inglaterra, Islândia, Irlanda, Nova Zelândia, países escandinavos, Suíça e Estados Unidos, naqueles onde a enfermidade ainda ocorre, há carência de relatos relacionados a pesquisa do vírus em suínos encaminhados a matadouros.

O presente relato tem por objetivo assinalar a existência de suínos aparentemente sadios mas, persistentemente infectados que, ao albergarem o vírus nas tonsilas, constituem-se em importante fonte de disseminação da PSC, contribuindo assim para a perpetuação desta enfermidade em todo Estado.

MATERIAIS E MÉTODOS

Os materiais foram colhidos durante o período de 1984 a 1998, na linha de abate de matadouros localizados, nos municípios de Valinhos, Vinhedo, Suzano e Itapecirica da Serra, no Estado de São Paulo, Brasil. Foram utilizadas 341 amostras de tonsilas de suínos adultos, sem histórico de vacinação, sem sinais da enfermidade e, provenientes de propriedades localizadas em regiões próximas aos matadouros trabalhados.

Das tonsilas obtiveram-se em criostato, cortes de 4µm de espessura, que foram aderidos a lâminas de vidro, fixados em acetona PA durante 10 minutos e recobertos com conjugado policlonal anti PSC, marcado com isotiocianato de fluoresceína, produzido no Instituto Biológico e na diluição de l:50 em Azul de Evans, adotando-se na seqüência, os procedimentos descritos por AIKEN et al. (1964).

Foram também preparadas, suspensões de 18 destes materiais em meio E-MEM, a 20% peso/ volume e inoculadas em tubos de Leighton contendo lamínulas cultivadas com células PK-15, as quais foram submetidas à técnica de imunofluorescência indireta (MENGELING, 1963). Utilizou-se imunoglobulina anti PSC e conjugado de referência (anti espécie), produzidos no LARA (Laboratório Regional de Apoio Animal) em Pedro Leopoldo, MG. Os materiais positivos foram novamente submetidos à mesma técnica, desta feita utilizando-se anticorpo monoclonal e conjugado anti-mouse (produzidos por Veterinary Laboratories Agency - Weibridge, Inglaterra), visando a diferenciação com o vírus da BVD (Diarréia a Vírus dos Bovinos), uma vez que existe estreita relação antigênica entre ambos (WENSVOORT et al., 1989; KATZ et al., 1993).

RESULTADOS E DISCUSSÃO

Desde os anos 60, quando foi desativado o Plano de Combate a PSC iniciado em 1946 e que contemplava um Programa de Controle e Erradicação da enfermidade, que medidas sanitárias substitutivas não foram adotadas. Decorreram-se várias décadas sem vacinação sistemática e obrigatória, sem controle de focos e, sem sacrifício de doentes, o que facilitou a disseminação da enfermidade. Muitas criações, principalmente as de pouca importância econômica, localizadas em regiões pobres do Estado de São Paulo utilizavam a vacina apenas em focos, como medida paliativa, preocupados em minimizar as perdas e os prejuízos econômicos, enquanto o restante do plantel permanecia susceptível.

Esta proteção parcial do rebanho, aliado a existência de vírus circulante e de cepas de baixa virulência, pode ter contribuído para o elevado número de animais portadores constatados nesta pesquisa.

Observou-se através de IFD, que dos 341 cortes de tonsilas examinados em 67 (19,64%), foi possível evidenciar positividade para o vírus da PSC, através da visualização de fluorescência intracitoplasmática específica nas células infectadas (Fig. 1).

Esta técnica de diagnóstico foi empregada até 1966, quando a partir de então, passou-se a utilizar também cultivo de células PK 15 que de acordo com ORDAS et al. ( 1977), aumenta a eficiência em 15%.

As amostras estocadas por vários anos, quando inoculadas em cultivo, mostraram-se tóxicas para as células, mesmo após várias passagens o que resultou em algumas perdas. Somente 18 das amostras estocadas por um curto período de tempo (três meses), comportaram-se satisfatoriamente.

O isolamento viral ocorreu em 15 (83,33), dos 18 materiais inoculados, sendo que em sete destes, a replicação do vírus somente pode ser observada em uma segunda passagem (Tabela 1).

Fig. 1
Antígeno viral de PSC, em células epiteliais de cripta de tonsila detectado por imunofluorescência direta.

Tabela 1
Resultado das passagens em cultivo de células da linhagem PK-15, de suspensão de tonsilas de suínos, colhidas em matadouros no Estado de São Paulo, no período de 1984 a 1998.

	Inoculação em cultivo
Município	Positivos		Negativos	Total examinado
	1a PAS	2a PAS
Valinhos	1	3	0	4
Vinhedo	1	2	1	4
Suzano	1	2	1	4
Itapecerica	2	3	1	6
Total	5	10	3	18

Tabela 2
Resultado da análise laboratorial de tonsilas de suínos, colhidas em matadouros do Estado de São Paulo, no período de 1984 a 1998.

Ano	Valinhos		Vinhedo		Suzano		Itapecerica
	Est.*	Pos.**	Est.	Pos.	Est.	Pos.	Est.	Pos.
1984	10	5			6	1	19	8
1985	8	-	-	-	-	-	9	3
1986	7	-	7	1	-	-	-	-
1987	14	6	7	2	11	2	34	18
1988	6	-	-	-	8	2	-	-
1989	6	-	8	1	-	-	10	-
1990	-	-	-	-	7	3	-	2
1991	5	-	7	2	-	-	-	-
1992	9	2	-	-	-	-	7	-
1993	6	-	-	-	-	-	8	2
1994	5	-	8	1	4	-	-	-
1995	3	1	3	-	1	1	4	1
1996	3	-	4	1	2	-	4	1
1997	2	1	1	-	1	-	3	-
1998	1	-	2	-	2	-	2	-
Total	85	15	47	8	42	9	100	35

• ^*
  = estudados;
• ^**
  = positivos

Constatou-se a presença de animais positivos em todos os matadouros trabalhados e, o maior número foi encontrado em Itapecirica da Serra (Tabela 2), sendo esta diferença estatisticamente significante (P= 0.0207). Este fato pode justificar-se tendo em vista o mesmo localizar-se em região de baixo poder econômico, situada na periferia da capital onde a PSC era de difícil controle.

O fato de não terem sido encontrados suínos positivos em 1998 (Tabela 2), pode estar relacionado com a vacinação obrigatória a que foi submetido todo o plantel suíno do Estado de São Paulo naquele ano. Observações semelhantes foram registradas no Rio Grande do Sul (GUIZZARDI et al., 1991), que não encontraram amostras de baços positivas dentre as 595 examinadas em matadouros, durante um período de vacinação sistemática do rebanho.

Os resultados encontrados nesta pesquisa estão de acordo com as observações feitas por VAN OIRSCHOT & TERPSTRA (1997), ao responsabilizarem as cepas de vírus da PSC de baixa virulência por infecções congênitas em leitões e, conseqüente nascimento de leitões virêmicos que podem sobreviver de 2 a 11 meses comportando-se como fonte de disseminação do vírus. Concordam também com os relatos de TERPSTRA & WENSVOORT (1997), que comprovaram a vida longa de suínos portadores da Diarréia Viral Bovina (BVD), também um pestivirus, ao observarem que de 13 suínos infectados congenitamente, três sobreviveram por mais de três meses sendo que, um deles permaneceu virêmico, excretando vírus pelo fluido oro - faríngeo, urina e sêmen até ao abate, aos 26 meses.

CONCLUSÕES

A identificação do vírus da PSC em tonsilas de animais sadios abatidos em matadouros, reveste-se de grande importância, pois comprova a existência de animais portadores que são verdadeiras fonte de infecção inaparente, facilitando a disseminação do vírus, ao mesmo tempo que ressalta a necessidade premente do controle e erradicação desta enfermidade.

Os dados obtidos deverão fornecer subsídios para o delineamento do Programa de Controle e Erradicação da peste suína clássica , uma vez que oferece dados importantes para o estudo epidemiológico da enfermidade no Estado de São Paulo.

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Datas de Publicação

• Publicação nesta coleção
  20 Set 2024
• Data do Fascículo
  Jan-Jun 2001

Histórico

• Recebido
  30 Ago 2000