Resumo em Português:

A aderência é considerada como um importante fator de virulência de Candida albicans por determinar a colonização dessas leveduras em diversas regiões do hospedeiro. É a causa inicial da infecção. Neste trabalho estudamos a aderência de C. albicans (sorotipos A e B) em culturas de células Hela e Vero, com leveduras cultivadas por 18 e 30 horas em meio YNB adicionado de fontes de carboidrato como glicose, sacarose, maltose, galactose e manose (500 mM). Cada ensaio foi realizado em triplicata. Os melhores resultados foram obtidos no meio adicionado de glicose. A aderência foi maior em culturas de 18 horas, incubadas a 37ºC no tempo de contato com as células de 1 hora. O estudo da interação entre as leveduras e a cultura de células foi realizado utilizando-se a microscopia eletrônica de varredura.

Resumo em Inglês:

The adherence of Candida albicans is considered an important virulence factor since it determines the colonization of the yeast in various regions of the host, being the initial cause of the infection. In this work we studied the adherence of C. albicans (serotypes A and B) to HeLa and Vero cells after culture for 18 h and 30 h in chemically defined medium (YNB) plus carbohydrate sources such as glucose, sucrose, maltose, galactose and mannose (500 mM). Each assay was performed in triplicate. The best results were obtained with the medium containing glucose. The adherence was greatest in 18 h cultures at 37ºC and at 1 h contact time. The interaction of yeast cells with the host cells was studied by scanning microscopy.

Resumo em Português:

Analisou-se o comportamento de 34 linhagens de Lentinula edodes, quando submetidas a diferentes condições de cultivo micelial (pH e temperatura), e a variabilidade das linhagens através de marcadores moleculares RAPD. A caracterização das linhagens foi realizada observando-se o comportamento de cada uma delas quando submetidas a três pHs (5, 6 e 7) e quatro temperaturas diferentes (16, 25, 28 e 37ºC), em função da taxa de desenvolvimento e da retenção de água pelo micélio in vitro. O cultivo micelial foi bem sucedido em todos os pHs utilizados. Já para o fator temperatura, foi estabelecido como faixas ideais para cultivo micelial, aquelas compreendidas entre 25 e 28ºC. O conteúdo hídrico foi menor nas linhagens cultivadas a 37ºC. O padrão de RAPD foi determinado e foram testados 20 primers OPA (Operon Technologies, Inc.), dos quais 17 forneceram boa fonte de polimorfismo (OPA01 a OPA05, OPA07 a OPA14, OPA17 a OPA20). O agrupamento das linhagens baseado nos coeficientes de similaridade permitiu a separação de dois grupos de procedências geográficas distintas.

Resumo em Inglês:

The growth of thirty-four Lentinula edodes strains submitted to different mycelial cultivation conditions (pH and temperature) was evaluated and strain variability was assessed by RAPD molecular markers. The growth at three pH values (5, 6 and 7) and four different temperatures (16, 25, 28 and 37ºC) was measured using the in vitro mycelial development rate and water retention as parameters. Mycelial cultivation was successful at all pH tested, while the ideal temperature for mycelial cultivation ranged between 25 and 28ºC. The water content was lower in strains grown at 37ºC. Among 20 OPA primers (Operon Technologies, Inc.) used for the RAPD analyses, seventeen presented good polymorphism (OPA01 to OPA05, OPA07 to OPA14, OPA17 to OPA20). The clustering based on similarity coefficients allowed the separation of strain in two groups with different geographic origins.

Resumo em Português:

Cinco espécies de cogumelos comestíveis, Lentinula edodes, Pleurotus ostreatus, Pholiota nameko, Macrolepiota bonaerensis e Agaricus blazei foram avaliadas quanto ao seu potencial em inibir o crescimento "in vitro" da levedura patogênica Candida albicans. Apenas a espécie L. edodes apresentou efeito fungistático sobre este patógeno humano. O composto inibitório foi produzido intra e extracelularmente em cultivo submerso de L. edodes e também estava presente em basidiocarpos frescos e desidratados do cogumelo. O composto fungistático é termossensível e perde sua atividade após 72 horas.

Resumo em Inglês:

Five species of edible mushrooms, Lentinula edodes, Pleurotus ostreatus, Pholiota nameko, Macrolepiota bonaerensis and Agaricus blazei, were tested for their potential to inhibit the in vitro growth of the pathogenic yeast Candida albicans. Only L. edodes had a fungistatic effect on this human pathogen. The inhibitory compound was produced intra and extracellularly in submersed L. edodes culture, and was also present in fresh and dehydrated mushroom basidiocarps. The fungistatic compound was heat sensitive and lost activity after 72 hours.

Resumo em Português:

Os dermatófitos formam um dos principais grupos de fungos patogênicos, caracterizados pela utilização da queratina do hospedeiro para sua nutrição. Por se constituírem um grupo de fungos intimamente relacionados, compartilham uma série de características comuns. Além disto, a morfologia de isolados de determinadas espécies pode ser atípica, tornando a identificação das espécies ainda mais difícil. Muitos métodos vêm sendo explorados na tentativa de distinguir dermatófitos, porém a associação de diferentes abordagens para a investigação da variabilidade intra e interespecífica de Trichophyton permanece escassa. Alguns trabalhos têm demonstrado que apesar de conservados, os fragmentos amplificados da seqüência correspondente à subunidade ribossomal menor 18S, contêm regiões conhecidas por sua variabilidade e capacidade de distinção entre espécies de levedura de importância médica, indicando que esta região também pode ser útil na diferenciação dos dermatófitos. Nesse estudo, a análise da seqüência do DNA ribossomal 18S foi combinada com critérios morfológicos e bioquímicos com o objetivo de se detectar possíveis diferenças genéticas entre sete isolados e estimar suas relações filogenéticas. Os resultados mostram que os isolados investigados pertencem ao grupo Trichophyton, o qual pode potencialmente conter o cluster Trichophyton rubrum.

Resumo em Inglês:

Dermatophytes, capable to use keratin of the host for nutrition, belong to one of the major groups of pathogenic fungi. Since dermatophytes are a closely related group they share various common features, and the morphology of isolates of a given species can be atypical, making species identification and differentiation even more difficult. Many methods have been explored in attempts to distinguish dermatophytes, but the combined use of different approaches for the investigation of the intraspecific and interspecific variability of Trichophyton continues to be scarce. Some studies have shown that amplified fragments of the small ribosomal DNA subunit 18S contains variable regions which can be used to discriminate between medically relevant yeast species, indicating that these regions could also be used for differentiation between dermatophytes. In our study, sequence analysis of the 18S-rDNA gene was combined with morphological and biochemical criteria in order to detect genetic differences between seven Trichophyton isolates and estimate their phylogenetic relationships. The results show that the isolates investigated belong to the Trichophyton group, which potentially contains the Trichophyton rubrum cluster.

Resumo em Português:

Este estudo foi feito com a finalidade de estabelecer efeitos comparativos da seca e da reidratação na assimilação do nitrato e atividade do nódulo relacionado com a fixação de N2 em planta de caupi [Vigna unguiculata L. (Walp.)] previamente inoculada com Bradyrhizobium spp., estirpe BR-3256 (CB-756), na presença de NO-3 (5 mol m-3). Aos 28 dias após a emergência, as plantas noduladas foram submetidas à seca, durante 4 dias sucessivos e, depois, reidratadas com solução nutritiva durante 2 dias. A seca causou um aumento rápido no conteúdo de nitrato da raiz e uma acentuada redução na atividade da redutase do nitrato de folhas (NR). Em contraste, no nódulo esta atividade foi aumentada ligeiramente pelo déficit de água. Concomitantemente, nos nódulos das plantas estressadas, observou-se uma redução progressiva na concentração de leghemoglobina, atividade de glutamina sintetase (GS) e na concentração de ureídeos na seiva do xilema. A atividade da NR nas folhas aumentou rapidamente após a reidratação enquanto que o conteúdo de nitrato da mesma decresceu. Em contraste, a atividade de GS e a concentração de proteínas solúveis nos nódulos continuaram diminuindo nas plantas reidratadas. A concentração de leghemoglobina apresentou uma boa recuperação, enquanto que o conteúdo de ureídeos sofreu um leve aumento após a reidratação. Apesar da assimilação de nitrato em folhas e a atividade do nódulo terem sido severamente afetados pelo déficit de água, a rápida recuperação da atividade de redutase do nitrato nas folhas sugere que o primeiro processo seja menos susceptível ao ciclo de seca/reidratação quando plantas de caupi são noduladas em presença de nível moderado de nitrato.

Resumo em Inglês:

This study was carried out to establish comparative effects of drought and recovery on the nitrate assimilation and nodule activity related to N2 fixation in cowpea plants [Vigna unguiculata L. (Walp.)] previously inoculated with Bradyrhizobium spp. BR-3256 (CB-756) strain in the presence of 5 mol m-3 NO-3. Twenty-eight-day-old nodulated plants were submitted to water deprivation during 4 consecutive days and afterwards resupplied with nutrient solution during 2 days. The water deprivation caused a rapid increase in the nitrate content in root and a marked reduction in leaf nitrate reductase (NR) activity. In contrast nodule NR activity was slightly increased by water deprivation. Concomitantly, in nodules of water stressed plants, leghemoglobin and glutamine synthetase (GS) activity declined and a progressive reduction in ureide-N concentration in xylem sap was observed. Leaf-NR activity increased rapidly after rehydration while leaf nitrate content declined. In contrast both GS activity and soluble protein content in the nodule continued to decline in rewatered plants. In addition the concentration of leghemoglobin recovered well, while the xylem ureide-N content experienced a slight increase after rehydration. Despite the nitrate assimilation in leaves and the nodule activity had been both severely affected by water stress, the rapid recovery of nitrate reductase activity suggests that the nitrate assimilation process is less sensitive to drought/rehydration cycle when cowpea plants are nodulated in presence of moderate nitrate level.

Resumo em Português:

Experimento em casa de vegetação foi conduzido com objetivo de estudar os efeitos do estresse hídrico nas atividades metabólicas dos nódulos de caupi nos diferentes estádios de desenvolvimento da fixação de N2. As plantas de caupi foram crescidas em vasos com solo Latossolo amarelo sob diferentes potenciais matriciais: -7,0 (control-S1), -70,0 (S2) e <-85,0 KPa (S3). O desenho experimental foi em blocos ao acaso com parcela sub-dividida, na parcela principal contendo os diferentes níveis de potencial matricial e a sub-parcela contendo os diferentes estádios de desenvolvimento: E1 (0-15), E2 (15-30), E3 (20-35) e E4 (30-45) dias após a emergência. Os tratamentos de estresse foram aplicados gradualmente através do sistema de cápsula porosa. O efeito do estresse de água foi mais prejudicial ao caupi quando aplicado no estádio E2 do que nos demais estádios. A relação parte aérea/raiz decresceu de 2,61 para 2,14 no potencial matricial <-85,0 e -70,0 KPa respectivamente. Foi observado pequeno decréscimo nas atividades da glutamina sintetase e fosfoenolpiruvato carboxilase com o aumento do estresse, enquanto que a glutamina sintase foi a enzima mais sensível ao estresse. A atividade da glutamato desidrogenase aumentou no potencial matricial mais negativo indicando que esta enzima é suficientemente ativa sob estresse hídrico.

Resumo em Inglês:

A greenhouse experiment was carried out aiming to study the effect of water stress on metabolic activity of cowpea nodules at different plant development stages. Cowpea plants were grown in pots with yellow latosol soil under three different matric potentials treatments: -7.0 (control-S1), -70.0 (S2) and <-85.0 KPa (S3). The experimental design was randomized blocks with sub-divided plots, each plot containing a different degree of water stress, divided in sub-plots for the four different developmental stages: E1 (0-15), E2 (15-30), E3 (20-35) and E4 (30-45) days after emmergence. Water stress treatments were applied by monitoring soil water potential using a set of porous cups. The effect of water stress was most harmful to cowpea when it was applied at E2 than at other symbiotic process stages. Shoot/root ratio decreased from 2.61 to 2.14 when matric potential treatment was <-85.0 and -70.0 KPa respectively. There was a reduction in the glutamine synthetase activity and phosphoenolpyruvate carboxilase activity with increased stress, while glutamine synthase activity was the enzyme most sensitive to water stress. Glutamate dehydrogenase activity increased in more negative matric potential, indicating that this enzyme is sufficiently activitye under water stress.

Resumo em Português:

Bactérias diazotróficas do tipo Herbaspirillum isoladas de bananeiras foram avaliadas pelas características morfológicas e fisiológicas de crescimento. Três grupos de bactérias foram estabelecidos, sendo dois relacionados às espécies de Herbaspirillum e diferentemente o terceiro grupo apresentou habilidade em crescer com poucos substratos orgânicos e produziu substância fluorescente em meio B de King. As bactérias dos três grupos eram bastonetes com flagelos mono ou bipolares, apresentaram reação negativa na coloração de Gram, expressaram atividade de catalase e oxidade, foram capazes de reduzir o nitrato e cresceram melhor em meio JNFb semi-sólido incubado a 31ºC. A atividade da nitrogenase, medida através da atividade de redução de acetileno, foi máxima em meio JNFb semi-sólido, após o ajuste de pH na faixa de 6,0 a 7,0 (grupos I e II) e 5,5 a 6,5 (grupo III). As bactérias diazotróficas associadas às bananeiras são diferentes das espécies de Herbaspirillum anteriormente identificadas em gramíneas.

Resumo em Inglês:

Diazotrophic bacteria isolated from banana plants were characterized by morphological and physiological aspects. Three different groups of these plant-bacteria could be established. Two of them showed similarity to species of the Herbaspirillum genus. The third one was different because used only a few carbon substrates and produced water diffusible compounds that fluoresced under UV light. All three bacterial groups were thin rods with mono or bipolar flagella, presented negative reaction in Gram stain, showed catalase activity, were able to reduce nitrate and grew better in semi-solid JNFb medium at 31ºC. The nitrogenase activity was detected in semi-solid N-free JNFb medium and expressed higher values when pH ranged from 6.5 to 7.0 (groups I and II) and 6.0 to 6.5 (group III). The diazotrophs isolated from banana plants were distinct from species of Herbaspirillum previously identified in gramineous plants.

Resumo em Português:

A atividade antibacteriana de 35 isolados de Lentinula edodes (shiitake) contra Bacillus subtilis foi avaliada pela técnica de difusão em sobrecamada de ágar semi-sólido. Todos os isolados avaliados inibiram o crescimento de B. subtilis sendo o isolado Le1 o que apresentou maior halo de inibição. L. edodes Le1 também inibiu o crescimento de bactérias patogênicas e deterioradoras de alimentos, especialmente as Gram-positivas. Maior atividade antibacteriana do filtrado da cultura de L. edodes em meio líquido foi observada entre 18-25 dias de incubação, a 25ºC. O fracionamento do filtrado da cultura com acetato de etila e água permitiu evidenciar a atividade antagonista somente na fase orgânica, sugerindo que as substâncias inibitórias apresentam baixa poloridade. A cromatografia em camada fina, com o sistema de solventes clorofórmio - acetona - acetato de etila - metanol = 40:5:5:2, definiu a região de Rf entre 0,63-0,80 como a que apresenta atividade antibacteriana contra B. subtilis. A atividade inibitória de L. edodes foi detectada em filtrado da cultura após o tratamento térmico de 100ºC por 10 minutos e após estocagem a 4ºC por 120 dias.

Resumo em Inglês:

The antibacterial activity of 35 isolates of Lentinula edodes, a shiitake mushroom, against Bacillus subtilis was evaluated by diffusion technique in agar with a semi-solid overlay. All isolates inhibited B. subtilis and the isolate Le1 promoted the formation of the largest inhibition zone. L. edodes Le1 also presented antibacterial activity against foodborne pathogens and food contaminant bacteria, particularly Gram-positive species. The antibacterial activity of the culture filtrate after 18-25 days of cultivation of L. edodes in broth at 25ºC was high. The inhibitory activity was observed only in the organic layer when the culture filtrate was partitioned between ethyl acetate and water, suggesting that the inhibitory substances have low polarity. The silica gel thin-layer zone at Rf values of 0.63-0.80, developed in chloroform - acetone - ethyl acetate - methanol = 40:5:5:2, was responsible for the antibacterial activity against B. subtilis. The inhibitory activity of L. edodes was detectable in the culture filtrate after heat treatment at 100ºC for 10 min and after storage at 4ºC for 120 days.

Resumo em Português:

O cogumelo comestível Oudemansiella canarii (Jungh.) Höhn., é comum no território brasileiro, sendo encontrado em diferentes biomas, onde colonizam várias espécies vegetais. Neste estudo, o cultivo deste basidiomiceto foi realizado em sacos plásticos contendo bagaço de cana-de-açúcar (200 g) ou serragem de eucalipto (200 g) suplementados com farelo de trigo (50 g). Os substratos foram esterilizados a 121ºC por 1 hora, inoculados com 3 g de grãos de trigo colonizados por micélio do fungo e permaneceram incubados a 25ºC até a formação dos primórdios dos basidiomas. Os cogumelos, colhidos após a abertura do píleo, apresentaram tamanhos variados chegando a atingir 9 cm de diâmetro por 10 cm de altura. Os cogumelos frescos apresentaram paladar suave e consistência macia e quando mantidos a 4ºC permaneceram com bom aspecto e boa consistência por 7 dias. A maior produção de basidiomas, no período de 60 dias, foi obtida no composto com bagaço de cana-de-açúcar, sendo observadas as maiores médias de produtividade (4,47% ± 1,34), eficiência biológica (55,66% ± 20,41) e consumo do composto (38,78% ± 4,59). A análise estatística não paramétrica de Wilcoxon, utilizada para comparar a produção de biomassa nos dois substratos, apresentou diferenças estatisticamente significativas ao nível de 5%.

Resumo em Inglês:

The edible mushroom Oudemansiella canarii (Jungh.) Höhn is common in the Brazilian territory, being found in different biomas, where they colonize several plant species. In this study, the O. canarii cultivation was evaluated in polypropilene bags containing sugar-cane bagasse (200 g) or eucalyptus sawdust (200 g) supplemented with wheat bran (50 g). The composts were sterilized at 121ºC for 1 hour, after cooling they were inoculated with 3 g of spawn and then remained incubated at 25ºC until the basidiomata primordia formation. The mushrooms, harvested after the pilei opening, presented varied sizes reaching 9 cm of diameter and 10 cm of height. The fresh mushrooms presented mild taste and soft consistency. When kept at 4ºC, they maintained good appearance and good consistency for 7 days. In a period of 60 days, the largest basidiomata production was obtained in the compost with sugar-cane bagasse, showing greater productivity (4.47% ± 1.34), biological efficiency (55.66% ± 20.41) and compost consumption (38.78% ± 4.59) averages. Wilcoxon's non-parametric statistical analysis used to compare the biomass production in the two composts, showed significant differences at 5% significance level.

Resumo em Português:

A caracterização parcial de proteases extracelulares de Streptomyces clavuligerus foi investigada. A produção da enzima foi realizada pela fermentação em batelada utilizando farinha de soja como fonte de nitrogênio. O máximo rendimento foi obtido após 96 horas de fermentação com um pH inicial de 7,0. A enzima foi purificada parcialmente por precipitação com sulfato de amônia. Ambas enzimas reteram 37% de sua atividade inicial a pH 8,0, após 2 horas de incubação a 25ºC. O tempo de meia-vida das enzimas foi de 40,30 e 53,32 minutos, respectivamente para ambos 3585 e 644 (extrato parcialmente purificado) a pH 8,0 e 60ºC. Com relação ao pH, a atividade ótima foi alcançada a pH 7,0-8,0 e 8,4 para enzimas produzidas pelas amostras 3585 e 644 (extrato bruto) respectivamente e 8,4 e 8,0 para as enzimas obtidas a partir dos extratos parcialmente purificados das amostras 3585 e 644, respectivamente. A temperatura ótima para o extrato bruto foi de 21ºC para S. clavuligerus NRRL 3585 e 644. Contudo, para a preparação parcialmente purificada, a temperatura ótima foi de 50 e 40ºC para amostras S. clavuligerus NRRL 3585 e 644 respectivamente.

Resumo em Inglês:

The partial characterization of extracellular proteases from Streptomyces clavuligerus NRRL 3585 and 644 mutant was investigated. The enzyme production was carried out in batch fermentation using soy bean filtrate as nitrogen source. Maximum activity was obtained after 96h of fermentation with an initial pH of 7.0. The enzyme was partially purified by ammonium sulphate precipitation. Enzymes from the two strains retained 37% of their initial activities at pH 8.0 after 2 h incubation at 25ºC. Enzyme half-life at pH 8.0 and 60ºC was 40.30 and 53.32 min, respectively for both strains (partially purified extract). The optimum pH was obtained at pH 7.0-8.0 and 8.4 for enzymes produced for 3585 and 644 strains (crude extract), respectively, and 8.4 and 8.0 for enzymes from the partially purified extract 3585 and 644 strains, respectively. The optimum temperature for the crude extract was 21ºC for both strains. However, for the partially preparation the optimum temperature was 50ºC and 40°C for S. clavuligerus NRRL 3585 and 644 strains respectively.

Resumo em Português:

Foram estudados os efeitos da imobilização no crescimento e na atividade respiratória das células de Candida guilliermondii UFMG-Y65 imobilizadas por encapsulamento, utilizando-se gel de Ba-alginato. As taxas máximas de utilização de oxigênio apresentadas pelas células imobilizadas em matriz contendo 4% de alginato foram 5,2 e 23% inferiores às taxas apresentadas pelas células imobilizadas em 2% de alginato e livres, respectivamente A resistência à transferência de massa oferecida pela matriz e o crescimento das células foram responsáveis pela baixa taxa de crescimento. Como conseqüência, observou-se uma distribuição heterogênea da biomassa, com aumento da densidade celular progressivamente do interior para regiões periféricas da matriz. A concentração do polímero afetou a taxa de utilização máxima de oxigênio pelas células da levedura imobilizada.

Resumo em Inglês:

Yeast cells immobilized by entrapment in Ba-alginate gel were investigated for growth pattern and respiratory activity. The oxygen uptake rates (OUR) of cells entrapped in gels with 4% alginate were 5.2 and 23% lower than the OUR of 2% alginate and free cells, respectively. The mass-transfer resistance offered by the matrix and growth of the entrapped cells determine a gradient of nutrients throughout the gel which is responsible for both a lower specific growth rate of immobilized cells with respect to that of free ones, and a heterogeneous biomass distribution, with progressively increasing cellular density from the inside to the outside of the matrix. Gel-matrix polymer concentration affected the maximum oxygen uptake of immobilized growing yeast cells.

Resumo em Português:

Comunicam-se algumas características de cultivo e a produção de plasmídios por Escherichia coli JM109 transformada com pCB01, um plasmídio que codifica os genes da adesina fimbrial de E. coli K88ab e de resistência à ampicilina. A cepa foi cultivada em Infuso de Cérebro e Coração (BHI) e em caldo de Luria (LB), em Erlenmeyers agitados e em fermentador de bancada. A taxa de perda de plasmídios foi estimada pela diferença de contagens em meio com e sem ampicilina. Os rendimentos de plasmídios das culturas em Erlenmeyer variaram de 0,9 a 67 µg/ml de meio, entanto as cultivadas em fermentador alcançaram 62 µg/ml após 8 horas de cultivo. Células sem plasmídio superaram às transformadas de 5 a 1,2 vezes durante o cultivo. Os tempos de geração da população total e das células transformadas foram 33 e 61 minutos no fermentador, e 36 e 121 minutos em Erlenmeyers, respectivamente. O mesmo inoculo produziu 62 e 33 µg de plasmídio por ml de meio no fermentador e em Erlenmeyers, respectivamente. As concentrações de bactérias e o rendimento de plasmídios foram superiores em BHI que em LB. O rendimento de plasmídios obtidos do mesmo cultivo foram 1,7 vezes maiores quando a purificação foi feita pelo método de ultracentrifugação em gradientes de césio-brometo de etídio do que com colunas comerciais.

Resumo em Inglês:

Growth characteristics and plasmid yields of Escherichia coli JM109 transformed with pCB01, a plasmid that encodes genes for the fimbrial adhesin of E. coli K88ab and for ampicillin resistance, grown in two culture media in agitated flasks and in fermentor, are reported. The rate of plasmid loss during growth was estimated by the differential counts in media with and without ampicillin. Plasmid yields of cultures grown in flasks varied from 0.9 to 67 µg/ml of medium, while those grown in fermentor attained 62 µg/ml of medium after 8 hours of culture. Plasmid bearing cells were outgrown by plasmid free cells in proportions varying from 5 to 1.2 non-transformed for each transformed cell during growth. Generation times of total population and plasmid bearing cells were 33 and 61 minutes, and 36 and 121 minutes, for fermentor and flask grown cultures, respectively. The same culture grown in fermentor and in flasks produced 62 and 33 µg of plasmid DNA per ml of medium, respectively. Bacterial concentrations and plasmid yields were higher in BHI than in LB medium. Yields of plasmid DNA obtained from the same batch were 1,7 times higher with cesium chloride-ethidium bromide gradients than with commercial columns.

Resumo em Português:

Os flavonóides apresentam, entre outras, uma notável atividade bacteriostática. Neste trabalho determinaram-se as concentrações inibitórias mínimas de 5,7,4'-trihidroxiflavanona (naringenina), 5,7-dihidroxiflavona e 2',4',4-trihidroxichalcona (isoliquitirigenina) frente a Staphylococcus aureus ATCC 25 923 e comparadas com valores obtidos para outras chalconas e flavanonas investigadas previamente. As velocidades específicas de crescimento e as MICs foram avaliadas por um método cinético-turbidimétrico. A sequência observada MICflavanona(inactiva) >MIC7-hidroxiflavanona (197,6 µgml-1) > MIC5,7,4'-trihidroxiflavanona (120 µgml-1) mostrou que a introdução de um grupo doador de elétrons (-OH) provoca um aumento da bioatividade. Por outro lado, MIC5,7,4'-trihidroxiflavanona (120 µg ml-1) >>> MIC2',4',4-trihidroxichalcona (29 µg ml-1) e MIC5,7-dihidroxiflavona (105 µg ml-1) >>> MIC2',4'-dihidroxichalcona (28,8 µg ml-1) permitiram concluir que a estrutura chalcona é a mais favorável para a atividade bacteriostática dentro da família dos flavonóides.

Resumo em Inglês:

Among other properties, flavonoids present a notable bacteriostatic activity. In this paper, minimal inhibitory concentrations (MICs) of 5,7,4'-trihydroxyflavanone (naringenin), 5,7-dihydroxyflavone and 2',4',4- trihydroxychalcone (isoliquitirigenin) against Staphylococcus aureus ATCC 25 923 were determined and compared to values obtained for other chalcones and flavanones previously investigated. Specific growth rates and MICs were determined by a turbidimetric kinetic method. The observed sequence MICflavanone (inactive) >MIC7-hidroxyflavanone (197.6 µgml-1)>MIC5,7,4'-trihydroxyflavanone (120 µgml-1) showed that the introduction of an electron donating group (-OH) causes an increase in bioactivity. On the other hand, the comparisons MIC5,7,4'-trihydroxyflavanone (120 µgml-1) >>> MIC2',4',4-trihydroxychalcone (29 µgml-1) and MIC5,7-dihydroxyflavone (105 µgml-1) >>> MIC2',4'-dihydroxychalcone (28.8 µgml-1) indicated that the chalcone structure is the most favourable for bacteriostatic activity within the flavonoid family.

Resumo em Português:

Cinqüenta e oito cepas de Haemophilus influenzae foram isoladas da nasofaringe de crianças saudáveis que freqüentam uma creche, e através da técnica de Southern blot foi pesquisada nas cepas acapsuladas a presença de seqüências do gene capsular. Sete cepas (12%) caracterizadas sorologicamente como acapsuladas mostraram homologia com seqüências específicas da cápsula. Uma cepa foi caracterizada com uma linhagem H. influenzae tipo b cápsula deficiente.

Resumo em Inglês:

Fifty-eight nasopharyngeal isolates of Haemophilus influenzae were collected from healthy children at a day care center, and nontypeable isolates were examined by Southern blot for the presence of capsule gene sequences. Seven isolates (12%) demonstrated homology with capsule-specific sequences. One isolate was characterized as an H. influenzae type b capsule-deficient strain.

Resumo em Português:

Um caso de difteria ocorreu, em 1999, em mulher de 32 anos de idade. A paciente iniciou episódio de dor de garganta imediatamente após participação em reunião com profissionais europeus durante cinco dias consecutivos, no Rio de Janeiro. Ela declarou ter sido submetida ao esquema completo de imunização contra difteria (DTP-tríplice bacteriana) na infância e a doses de reforço (dT-dupla adulto) há dois anos. O diagnóstico clínico da doença só foi firmado após o laboratório de microbiologia ter confirmado a capacidade de produção de toxina pela amostra isolada de Corynebacterium diphtheriae var. gravis, biotipo não fermentador de sacarose comumente encontrado em diversos países europeus e responsável pela atual epidemia na região correspondente a antiga União Soviética. Na era da vacinação antidiftérica, indivíduos adultos de nossa comunidade podem apresentar-se potencialmente susceptíveis a difteria.

Resumo em Inglês:

In 1999, a case of diphtheria in a 32-year-old woman was reported. The patient developed a sore throat immediately after participating of a five-day meeting with European workers in Rio de Janeiro. Her history included complete pediatric immunization (DTP) and three doses of adult formulation tetanus and diphtheria toxoid (dT) two years earlier. Clinical diagnosis of diphtheria was not made until microbiologic examination of specimens confirmed toxigenicity of Corynebacterium diphtheriae var. gravis, a biotype currently found circulating within Europe where diphtheria remains epidemic. This case reinforces the potential susceptibility of Brazilian adults to epidemic diphtheria in the vaccine era.

Resumo em Português:

Foram obtidos anticorpos monoclonais contra o vírus do mosaico do tomateiro (ToMV) isolado no Brasil. O anticorpo 8G7G2 isotipado como IgG2b (cadeia leve kapa apresentou alta especificidade para o ToMV e baixa reação cruzada com o vírus do mosaico do tabaco (TMV) e poderá ser usado na identificação do ToMV.

Resumo em Inglês:

Monoclonal antibodies were obtained against Tomato mosaic tobamovirus (ToMV) isolated in Brazil. One antibody (8G7G2) isotyped as IgG2b (kappa light chain) showed strong specificity and very low cross reaction with the Tobacco mosaic virus (TMV). It can be used in identification of tomato mosaic virus (ToMV).

Resumo em Português:

Este trabalho teve como objetivos estudar a ocorrência da Malassezia pachydermatis e de outros agentes etiológicos em cães com otite externa e com conduto auditivo externo hígido; caracterizar a otomicose por M. pachydermatis. Foram analisadas 32 amostras de cães com o conduto auditivo hígido e 102 de otite externa. Todas as amostras foram submetidas ao exame direto, cultivo em ágar sangue e em ágar Sabouraud dextrose acrescido de cloranfenicol e cicloheximida. Ao exame direto 52.0% das amostras de otite apresentaram mais de dez células de M. pachydermatis. Somente 21.8% das amostras de orelhas hígidas apresentaram no exame direto células com esta morfologia (uma a dez células). M. pachydermatis foi isolada em 37.5% das amostras do conduto auditivo hígido e em 76.5% das amostras de otite (p<0.01). Foi freqüente a associação entre Malassezia pachydermatis e Staphylococcus aureus (p<0.01) enquanto a associação da levedura com Pseudomonas aeruginosa não foi comum (p>0.05). A infecção por M. pachydermatis foi prevalente em cães da raça Cocker Spainel, Pastor Alemão e Fila Brasileiro, não tendo sido demonstradas diferenças para idade, sexo e conformação do pavilhão auricular. A otomicose foi predominantemente ceruminosa e eritematosa. M. pachydermatis foi o agente com maior prevalência nas otites externas.

Resumo em Inglês:

The purpose of this work was to evaluate the frequency of Malassezia pachydermatis infection and other infectious agents in dogs with external otitis and with healthy auditory tubes. Clinical manifestations of external otitis were evaluated. Samples from the auditory tube of 102 dogs with otitis and from 32 healthy dogs were submitted to direct microscopic examination and cultured in blood agar and Sabouraud dextrose agar with chloramphenicol and cycloheximide. Direct examination showed more than ten cells of M. pachydermatis in 52.0% of the samples from dogs with otitis, but in only 21.8% of the healthy auditory tube samples. M. pachydermatis was isolated in 37.5% of the samples from dogs with healthy auditory tube and 76.5% (p<0.01) of the samples from dogs with otitis. There was an association between M. pachydermatis and Staphylococcus aureus (p<0.01), but not with Pseudomonas aeruginosa (p>0.05). Infection by M. pachydermatis was prevalent in the following breeds: Cocker Spainel, German Shepherd and Brazilian Fila. No differences were found in frequency of the infection in relation to age, sex and ear anatomy of the dogs. Otomycosis were predominantly ceruminous and erythematous. M. pachydermatis was the most frequent agent in external otitis.

Resumo em Português:

Actinobacillus actinomycetemcomitans é um cocobacilo Gram negativo, periodontopatógeno clinicamente importante, que produz uma leucotoxina pertencente à família das citolisinas RTX. Neste estudo, avaliou-se a atividade leucotóxica de amostras de A. actinomycetemcomitans isoladas de seres humanos e de calitriquídeos pelos métodos de exclusão de azul de Tripan e quimioluminescência. Duas (P2.17 e P8.12) entre oito amostras de A. actinomycetemcomitans isoladas de seres humanos, e uma (M22.11) entre 8 amostras isoladas de sagüis se apresentaram como altamente produtoras de leucotoxina, como determinado pelo teste de exclusão de azul de Tripan. As amostras de referências de A. actinomycetemcomitans ATCC 29523 e FDC Y4 se comportaram como média e baixa produtoras de leucotoxina, respectivamente. O teste de quimioluminescência foi usado para avaliar a atividade leucotóxica das amostras M22.11 e P2.17 submetidas a diferentes condições de crescimento. A atividade leucotóxica foi detectada em células durante a fase logarítmica e foi similar sob crescimento em anaerobiose e microaerofilia. A atividade leucotóxica foi muito reduzida quando as células foram crescidas em concentrações de glicose mais baixa e mais alta que 0,75% (0,25% e 1,5%), em meio tioglicolato. A produção de leucotoxina, especialmente pela amostra M22.11, foi mais baixa em caldo BHI, enquanto em meio TSB a produção foi em nível similar a aquele em meio tioglicolato. Bicarbonato de sódio 10mM não afetou a produção de leucotoxina.

Resumo em Inglês:

Actinobacillus actinomycetemcomitans is a clinically relevant periodontopathogenic Gram-negative coccobacillus that produces a leukotoxin of the RTX cytolysin family. In this study, we evaluated the leukotoxic activity of A. actinomycetemcomitans strains isolated from human and marmosets by Trypan blue exclusion and by the chemiluminescence assays. Among eight A. actinomycetemcomitans human strains studied, two (P2.17 and P8.12) were classified as high leukotoxin producers and among eight marmoset strains, one (M22.11) showed high leukotoxin production, as determined by Trypan blue exclusion assay. The reference strains ATCC 29523 and FDC Y4 respectively behaved like moderate and low producers. The chemiluminescence assay was used to evaluate the leukotoxic activity of M22.11 and P2.17 strains submitted to different growth conditions. Leukotoxic activity was detected on cells at the logarithmic phase and was similar under anaerobic and microaerophilic growth conditions. It was greatly reduced when cells were grown at glucose concentrations lower or higher than 0.75% (0.25% and 1.5%) in thioglycolate medium. Leukotoxin production mainly by the M22.11 strain was low in BHI broth, whereas production in TSB medium showed a similar level as in thioglycolate broth medium. Sodium bicarbonate at 10 mM did not affect leukotoxin production.