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Purificação e determinação da massa molecular de uma proteína transportadora de lipídeos exsudada de sementes de Vigna unguiculata

Plantas exsudam uma variedade de substâncias através de sua superfície, especialmente de raízes e sementes germinantes. Algumas dessas substâncias parecem apresentar atividades inibitórias contra determinados patógenos vegetais. Proteínas transportadoras de lipídeos (LTPs) são peptídeos catiônicos básicos de 9 kDa, ricos em cisteína e que possuem a função de proteção de plantas contra infecções microbianas. O objetivo deste trabalho foi o isolamento e a determinação da massa molecular de uma LTP presente em exsudatos de sementes embebidas de feijão-de-corda (Vigna unguiculata). Para indução da exsudação, 50 sementes foram submersas em 50 mL de tampão acetato de sódio, 100 mmol.L-1, pH 4,5 e mantidas a 30 ºC sob agitação por 24 h. O exsudato foi submetido à precipitação por sulfato de amônio e o precipitado formado entre 0 e 70 % de saturação foi dialisado, recuperado por liofilização e submetido a cromatografias para a purificação e determinação da massa molecular da LTP. Todas as etapas foram monitoradas por eletroforese em gel de tricina e por Western blotting, usando-se anticorpo produzido contra LTP isolada de sementes de feijão-de-corda. A proteína transportadora de lipídeo purificada apresentou massa molecular de 9 kDa.

Exsudatos de sementes; LTP; proteínas de defesa


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