Surface modification of ZnAl_1.9Eu_0.05O₄ aiming to obtaining ZnAl_1.9Eu_0.05O₄/SiO₂ hybrid for use as a biosensor

ce Cerâmica Cerâmica 0366-6913 1678-4553 Associação Brasileira de Cerâmica Abstract This study aimed to investigate the influence of surface modification of ZnAl1.9Eu0.05O4 nanoparticles for obtaining hybrid ZnAl1.9Eu0.05O4/SiO2 for application as a biosensor. Initially ZnAl1.9Eu0.05O4 nanoparticles were synthesized by combustion reaction and, subsequently, their surfaces were modified with silane agent. The samples were characterized by X-ray diffraction, scanning electron microscopy (SEM), Fourier transform infrared (FTIR) spectroscopy, and excitation and emission spectroscopy. The results showed formation of ZnAl2O4 as the major phase. By SEM, hard agglomerates, irregularly shaped in the form of plaques, with the presence of few irregular and variables pores were observed. The surface modification was confirmed by FTIR through the silanol and siloxane groups. The excitation and emission spectra revealed the presence of a broadband of ZnAl2O4 matrix, and fine and intense transitions from europium ion arising from doping of non-stoichiometric ZnAl2O4 with the europium. From the results of emission and excitation, it was observed that the luminescence of ZnAl1.9Eu0.05O4/SiO2 hybrid presented a small decrease in relation to the ZnAl1.9Eu0.05O4 nanoparticles. This decrease was almost insignificant in relation to the benefits of silanization caused by the introduction of functional groups that promote combination of hybrid ZnAl1.9Eu0.05O4/SiO2 with biomolecules, being this promising for application as a biosensor used in the biomedical field for the diagnosis and treatment of diseases. INTRODUÇÃO A nanotecnologia é um campo de rápido crescimento que está tendo um enorme impacto sobre biossensores e, por extensão, o diagnóstico, prognóstico e monitoramento de doenças 1)- (3. O biossensor pode ser de luminescência, fluorescência, colorimétrica ou de base interferométrica 3. Entre estes se destacam os biossensores ópticos que são baseados em sensores de luz que medem alterações nos comprimentos de onda de luz específicos. Entre os materiais que podem ser aplicados como biossensores destacam-se os óxidos de metais dopados com lantanídeos, a exemplo das nanopartículas luminescentes (NPLs) de ZnAl1,9Eu0,05O4. Esses materiais geralmente mostram propriedades fotoluminescentes superiores aos fósforos convencionais, como os sulfetos, por apresentarem a vantagem de exibir luminescência multicor sob UV (down-conversion e up-conversion), fornecendo tanto a alta resolução quanto a luminescência cromática 4), (5, além de transparência elevada, excelente resistência química, estabilidade térmica, brilho e alta luminescência 6), (7. Entretanto, estes materiais apresentam como desvantagem a sua hidrofobicidade e a falta de grupos funcionais para conexão direta com biomoléculas. Dessa forma, existe uma necessidade de modificar adequadamente a superfície destas nanopartículas para que, através da modificação da superfície, surjam pontos de conjugação biológica (grupos funcionais) capazes de se ligarem com biomoléculas 8), (11. Um material que vem sendo bastante utilizado como agente modificador de superfície é o agente silano, 3-aminopropiltrimetoxissilano, que apresenta dois grupos reativos que funcionam como pontes entre os substratos inorgânicos, a exemplo das nanopartículas luminescentes de ZnAl1,9Eu0,05O4 e as biomoléculas orgânicas 12)-(14. Os híbridos oferecem a oportunidade de combinar as propriedades desejáveis do agente silano, tais como a introdução de grupos funcionais, aumento da dispersão, diminuição de aglomerados, redução da toxidade e aumento da biocompatibilidade, com as propriedades das NPLs de ZnAl1,9Eu0,05O4, tais como rigidez, resistência química, estabilidade térmica, química e propriedades luminescentes 15. Desta forma, o desenvolvimento de nanopartículas de ZnAl2O4 dopadas com íons lantanídeos, como európio, e com modificação da sua superfície com agente silano permite a obtenção de híbridos luminescentes (sensores biológicos) que apresentam as propriedades de estabilidade química e luminescente da matriz cerâmica ZnAl1,9Eu0,05O4 e as propriedades de conjugação biológica com células alvo, o que pode ser considerado como um grande avanço clínico e tecnológico para aplicações na medicina no diagnóstico por imagem, o que vem facilitar o tratamento de doenças e ocasiona a melhoria da qualidade de vida do ser humano. Vários métodos de síntese têm sido utilizados para obtenção do ZnAl2O4 como matriz hospedeira para íons lantanídeos. Dentre os métodos, a síntese por reação de combustão destaca-se por ser uma técnica proeminente para a preparação de ZnAl2O4 dopado com Eu3+, com elevado grau de pureza, pequeno tamanho de partículas e possibilidade de produção em escala piloto 5), (16. Portanto, o objetivo deste trabalho foi de investigar a modificação da superfície do ZnAl1,9Eu0,05O4 visando a obtenção do híbrido ZnAl1,9Eu0,05O4/SiO2 para aplicação como biossensor. MATERIAIS E MÉTODOS Os reagentes utilizados neste trabalho foram: nitrato de alumínio [Al(NO3)3.9H2O]; nitrato de zinco [Zn(NO3)3.9H2O]; ureia [CO(NH2)2]; e óxido de európio (Eu2O3). Todos os reagentes utilizados apresentaram pureza igual ou superior a 98%. Para a síntese por reação de combustão utilizou-se um cadinho de sílica vítrea como recipiente e uma base cerâmica com resistência espiral exposta a atmosfera (temperatura máxima na resistência foi de aproximadamente 600 oC). A estequiometria da fase desejada ZnAl1,9Eu0,1O4 foi determinada com base na teoria dos propelentes e explosivos, usando as valências dos elementos reativos, de modo a favorecer a relação oxidante/redutor =1 17. Após síntese, o material foi desaglomerado em um almofariz, peneirado em peneira malha 325 mesh (44 μm) e as partículas tiveram suas superfícies modificadas com o aminossilano do tipo 3-aminopropiltrimetoxissilano (Aldrich) de acordo com a metodologia proposta por 18. As amostras foram analisadas quanto à estrutura por difração de raios X (DRX), em um difratômetro (LAB X-Ray Difractometer 6000, Shimadzu) com varredura de 5 a 75° em 2θ ,velocidade de 2 omin-1 e radiação CuKα (λ =1,5418 Å).Os espectros de infravermelho com transformada de Fourier (FTIR) foram obtidos em um espectrofotômetro (400 FT-IR/FT-NIR, Perkin Elmer) entre 4000 e 650 cm-1, com resolução de 4 cm-1 e 20 varreduras. As análises de microscopia eletrônica de varredura (MEV) foram obtidas no equipamento SSX 550 Superscan, Shimadzu. Os espectros de excitação e de emissão foram obtidos usando-se uma lâmpada de xenônio (150 W); dados referentes à excitação foram obtidos em um espectrofotômetro (H-10, Jobin Yvon Ramanor U1000), com monocromador duplo (U1000, Jobin Yvon) de 1 m. RESULTADOS E DISCUSSÃO A Fig. 1 apresenta os difratogramas de raios X para as NPLs de ZnAl1,9Eu0,05O4 e do híbrido ZnAl1,9Eu0,05O4/SiO2. As NPLs foram obtidas por reação de combustão que apresentou temperatura de ignição em cerca de 5,8 min e crescimento brusco até a temperatura máxima de 925 °C, com tempo de chama de 23 s. Em ambas as amostras pôde-se observar a formação majoritária da fase cristalina cúbica do espinélio normal ZnAl2O4 de acordo com o arquivo JCPDS 05-0669. Na Fig. 1b, referente às nanopartículas de ZnAl1,9Eu0,05O4, não foram observados picos de segunda fase, indicando que todo os íons de Eu3+ substituiu os íons de Al3+ na rede do ZnAl2O4 e, possivelmente, parte de íons de Eu3+ ocuparam as posições vazias devido à deficiência do Al3+ na rede do óxido não estequiométrico ZnAl1,9Eu0,05O4. Para o ZnAl1,9Eu0,05O4 a cristalinidade foi de 61% e o tamanho médio de cristalito de 34 nm, enquanto para o híbrido ZnAl1,9Eu0,05O4/SiO2 (Fig. 1c) a cristalinidade foi de 51% e o tamanho médio de cristalito de 25 nm. Dessa forma, observou-se que a silanização do ZnAl1,9Eu0,05O4 causou uma diminuição de 17% na cristalinidade e de 27% no tamanho médio de cristalito, pois as NPLs de ZnAl1,9Eu0,05O4/SiO2 apresentaram picos mais largos e de menor intensidade (Fig. 1c). A redução do tamanho médio de cristalito e da cristalinidade já era esperado, em relação ao híbrido ZnAl1,9Eu0,05O4/SiO2, quando comparado às NPLs de ZnAl1,9Eu0,05O4, visto que o revestimento das NPLs com o 3-aminopropiltrimetoxissilano, que é um material organometálico precursor da SiO2, reduz o tamanho das NPLs e aglomerados reduzindo assim o tamanho de partícula. Com relação ao híbrido, a redução da cristalinidade deu-se devido à presença do material organometálico 3-aminopropiltrimetoxissilano que promoveu o revestimento das NPLs cerâmicas de ZnAl1,9Eu0,05O4. Figura 1: Difratogramas de raios X de: (a) arquivo JCPDS 05-0669; (b) NPLs de ZnAl1,9Eu0,05O4; (c) híbrido ZnAl1,9Eu0,05O4/SiO2. Figure 1: XRD patterns of: (a) JCPDS 05-0669 file; (b) ZnAl1.9Eu0.05O4 NPLs; (c) ZnAl1.9Eu0.05O4/SiO2 hybrid. A Fig. 2 ilustra os gráficos de FTIR para as NPLs de ZnAl1,9Eu0,05O4 e ZnAl1,9Eu0,05O4/SiO2. Notou-se, em ambos os espectros, uma banda atribuída ao alongamento da H2O em 3700 a 3200 cm-1 e flexão da H2O em 1634 cm-1 e bandas de OH sobrepostas às bandas de Si-OH. As bandas de CO em torno de 2350 a 2400 cm-1 observadas são características do monóxido de carbono formado através da combinação de átomos dos precursores reagentes. Estas bandas também foram observadas por 19, quando observaram uma ampla banda de OH em torno de 3600 cm-1 característica de ligações de H2O e uma banda em cerca de 2300 cm-1, devido à presença de CO, formada como subproduto da reação de combustão. As bandas Si-OH e Si-O-Si observadas na Fig. 2 também foram reportadas por 20)-(22, quando relataram as bandas na região de 3100 a 4000 cm-1 provenientes dos grupos hidroxila da água formando o grupo (Si-OH); as bandas assimétricas devido ao alongamento do Si-O-Si em torno de 1040 a 1100 cm-1 foram também provenientes do agente silano. Assim, a adição do 3-aminopropiltrimetoxissilano como fonte de SiO2 na formação do híbrido ZnAl1,9Eu0,05O4/SiO2 resultou em um material com característica hidrofílica, biocompatível e possivelmente não tóxico. O fato atribuído que a presença do agente silano pode atuar de forma a tornar as nanopartículas não tóxicas foi reportado por Furtado et al.23 quando promoveram a silanização do ZnAl1,95(Yb:Er)0,05O4 com o 3-aminopropiltrimetoxissilano. As bandas em aproximadamente 1383 cm-1 podem ser atribuídas ao ânion nitrato, o que sugeriu que a reação de combustão não chegou à conclusão. Figura 2: Espectros de FTIR das NPLs de ZnAl1,9Eu0,05O4 e híbrido de ZnAl1,9Eu0,05O4/SiO2. Figure 2: FTIR spectra of ZnAl1.9Eu0.05O4 NPLs, and ZnAl1.9Eu0.05O4/SiO2 hybrid. A Fig. 3 ilustra a morfologia das amostras das NPLs em estudo. Nas Figs. 3a e 3b, respectivamente, são evidenciadas as micrografias de MEV das NPLs de ZnAl1,9Eu0,05O4 e do híbrido ZnAl1,9Eu0,05O4/SiO2. Em ambas as micrografias foram observadas a formação de aglomerados de aspecto duro, com formato irregular na forma de placas, com presença de poucos poros irregulares e variáveis que provavelmente foram causados pela liberação de gases durante a síntese. Entretanto, o híbrido ZnAl1,9Eu0,05O4/SiO2 (Fig. 3b) apresentou uma superfície mais regular, com menos poros; isto se deveu ao agente de acoplamento amino silano que favoreceu uma maior adesão entre as NPLs. Figura 3: Micrografias obtidas por microscopia eletrônica de varredura: (a) NPLs de ZnAl1,9Eu0,05O4, (b) híbrido de ZnAl1,9Eu0,05O4/SiO2. Figure 3: SEM images: (a) ZnAl1.9Eu0.05O4 NPLs, (b) ZnAl1.9Eu0.05O4/SiO2 hybrid. As Figs. 4 e 5 ilustram, respectivamente, os espectros de excitação e de emissão das NPLs de ZnAl1,9Eu0,05O4 e do híbrido ZnAl1,9Eu0,05O4/SiO2. O comportamento dos materiais luminescentes foi analisado por espectros de emissão e excitação em temperatura ambiente e em estado sólido. Os espectros de excitação das NPLs de ZnAl1,9Eu0,05O4 (Fig. 4), obtidos por monitorização da λEm=615 nm, evidenciaram as transições típicas do íon Eu3+ na faixa de 350 a 550 nm, que foi correlacionada com a intraconfiguração 4F6 do íon lantanídeo. Ao lado notou-se a presença de uma banda larga centrada em 297 nm que foi associada com a transferência de carga entre os íons de O2- para o íon Eu3+. Para o espectro de excitação das NPLs de ZnAl1,9Eu0,05O4 (Fig. 4a), pôde-se observar uma banda larga de máxima intensidade em 297 nm. A partir de aproximadamente 368 nm foram observados os máximos de intensidade das transições intraconfiguracionais finas do íon Eu3+ entre os níveis 7F0→5D4, 7F0→5L6, 7F0→5D3, 7F0→5D2 e 7F0→5D1 características na região vermelha do espectro eletromagnético; estas transições ocorreram em 382, 393, 412, 462 e 529 nm, respectivamente, e suas intensidades máximas podem ser observadas na Tabela I. Por meio da Fig. 4b, para o híbrido ZnAl1,9Eu0,05O4/SiO2, pode-se observar uma banda larga de intensidade máxima de 2,16x106 em 297 nm. Já as linhas espectrais finas do íon Eu3+ deram-se entre os níveis 7F0→5D4, 7F0→5L6, 7F0→5D3, 7F0→5D2 e 7F0→5D1 e ocorreram em 380, 392, 411, 462 e 527 nm, respectivamente. Figura 4: Espectro de excitação de: (a) NPLs de ZnAl1,9Eu0,05O4, (b) híbrido de ZnAl1,9Eu0,05O4/SiO2. Figure 4: Excitation spectrum of: (a) Zn1.9Eu0.05O4 NPLs, (b) ZnAl1.9Eu0.05O4/SiO2 hybrid. Figura 5: Espectro de emissão de: (a) NPLs de ZnAl1,9Eu0,05O4, (b) híbrido de ZnAl1,9Eu0,05O4/SiO2. Figure 5: Emission spectrum of: (a) Zn1.9Eu0.05O4 NPLs, (b) ZnAl1.9Eu0.05O4/SiO2 hybrid. Tabela I Intensidade máxima da banda larga referente à transição entre os íons O2-→Eu3+ e das transições intraconfiguracionais finas do Eu3+ nos espectros de excitação das NPLs de ZnAl1,9Eu0,05O4 e do híbrido ZnAl1,9Eu0,05O4/SiO2. Table I Maximum intensity of broadband related to the transition between the ions O2 -→Eu3+ and of the fine intraconfigurational transitions of Eu3+ at the excitation spectra of ZnAl1.9Eu0.05O4 NPLs and ZnAl1.9Eu0.05O4/SiO2 hybrid. Amostra Banda larga 7F0→5D4 7F0→5L6 7F0→5D3 7F0→5D2 7F0→5D1 ZnAl1,9Eu0,05O4 3,84x107 4,02x107 1,17x108 2,11x107 7,21x107 1,80x107 ZnAl1,9Eu0,05O4/SiO2 2,16x106 3,29x106 1,30x107 1,94x106 7,98x106 1,94x106 A Fig. 5a mostra o espectro de emissão das NPLs de ZnAl1,9Eu0,05O4 através da qual se pode visualizar uma banda larga de emissão na faixa de 371 a 569 nm que apresentou intensidade máxima em 444 nm. Mediante o mesmo espectro observou-se ainda que as linhas espectrais finas estavam localizadas em 577, 591, 615, 654 e 703 nm, concernentes, respectivamente, às transições 5D0→7F0, 5D0→7F1, 5D0→7F2, 5D0→7F3 e 5D0→7F4, do íon Eu3+. Os espectros de emissão das NPLs de ZnAl1,9Eu0,05O4 e do híbrido ZnAl1,9Eu0,05O4/SiO2 foram obtidos por excitação das transições 7F0→5L6 (λEx=395 nm) e 5D0→7FJ, com J= 0, 1, 2, 3 e 4, que são as transições de emissão típicas do íon Eu3+. O padrão espectral não mostrou alteração significativa com o revestimento com o SiO2 (ZnAl1,9Eu0,05O4/SiO2). No entanto, notou-se que as modificações aplicadas às NPLs de ZnAl1,9Eu0,05O4 não favoreceram as taxas de perdas não radiativas, que podem ser compreendidas pelo aumento do valor Arad de 447,08 para as NPLs de ZnAl1,9Eu0,05O4 para 469,60 para o híbrido ZnAl1,9Eu0,05O4/SiO2. Devido a isto, o comportamento luminescente qualificou o híbrido ZnAl1,9Eu0,05O4/SiO2 como um material luminescente biossensor. Na Fig. 5b apresenta-se o espectro de emissão do híbrido ZnAl1,9Eu0,05O4/SiO2, onde se pode observar uma banda larga em 440 nm e linhas espectrais finas localizadas em 575, 588, 614, 652 e 700 nm, concernentes, respectivamente, às transições 5D0→7F0, 5D0→7F1, 5D0→7F2, 5D0→7F3 e 5D0→7F4, do íon Eu3+; as intensidades máximas estão detalhadas na Tabela II. Tabela II Intensidade máxima da banda larga referente à transição entre os íons O2-→Eu3+ e das transições intraconfiguracionais finas do Eu3+ nos espectros de emissão das NPLs de ZnAl1,9Eu0,05O4 e do híbrido ZnAl1,9Eu0,05O4/SiO2. Table II Maximum intensity of broadband related to the transition between the ions O2 -→Eu3+ and of the fine intraconfigurational transitions of Eu3+ at the emission spectra of ZnAl1.9Eu0.05O4 NPLs and ZnAl1.9Eu0.05O4/SiO2 hybrid. Amostra Banda larga 5D0→7F0 5D0→7F1 5D0→7F2 5D0→7F3 5D0→7F4 ZnAl1,9Eu0,05O4 7,63x105 4,81x106 8,15x106 3,84x107 4,10x106 1,62x107 ZnAl1,9Eu0,05O4/SiO2 5,92x105 3,07x105 4,41x105 1,97x106 2,11x105 7,75x105 Através dos dados obtidos nos espectros de emissão e excitação observou-se que ocorreu a silanização. A comparação entre os sistemas das NPLs de ZnAl1,9Eu0,05O4 e o híbrido ZnAl1,9Eu0,05O4/SiO2 revelou que o revestimento com SiO2 não favoreceu a sensibilização da matriz para o íon Eu3+. A diminuição de luminescência observada nos espectros de excitação e emissão foi insignificante em comparação com os benefícios de silanização causados pela introdução de grupos funcionais que promovem a agregação de NPLs de ZnAl1,9Eu0,05O4 com biomoléculas, tais como proteínas, hidratos de carbono, lipídios, genes de DNA, anticorpos, enzimas e células 22)-(24. A aplicação de ZnAl1,9Eu0,05O4 como biossensor foi relatado por Wu et al.25, quando desenvolveram um novo sistema confinado de nanopartículas de európio para aplicações altamente luminescentes em bioimagem in vivo; já Peterson et al.26 utilizaram nanopartículas de óxido de ferro, tal como ferritina, como biossensor para a detecção da anemia e Mader et al.27 relataram o uso de nanopartículas luminescentes de conversão ascendente para uso em bioconjugação e bioimagem. CONCLUSÕES A síntese por reação de combustão foi favorável à preparação de nanopartículas luminescentes (NPLs) de ZnAl1,9Eu0,05O4 de elevadax pureza e luminescência. Tanto as NPLs de ZnAl1,9Eu0,05O4 quanto o híbrido ZnAl1,9Eu0,05O4/SiO2 foram formados pela fase majoritária cristalina cúbica do espinélio normal ZnAl2O4; não foram observados picos de segunda fase, indicando que todos os íons de Eu3+ substituíram os íons de Al3+ na rede do ZnAl2O4. A modificação da superfície das NPLs provocou uma redução no tamanho médio de cristalito e na cristalinidade devido a introdução da SiO2, que aumentou a dispersão das NPLs e reduziu o tamanho de partículas e aglomerados. A modificação da superfície das NPLs de ZnAl1,9Eu0,05O4 com o SiO2 proporcionou também a introdução de grupos funcionais reativos responsáveis pela conjugação biológica e pela biocompatibilidade das NPLs com biomoléculas e por consequência o híbrido ZnAl1,9Eu0,05O4/SiO2 apresenta propriedades mais promissoras para aplicação como biossensor quando comparado às NPLs de ZnAl1,9Eu0,05O4. Os resultados de luminescência indicaram que tanto as NPLs quanto o híbrido ZnAl1,9Eu0,05O4/SiO2 apresentaram propriedades de fotoluminescência interessantes para serem aplicados como biossensor. AGRADECIMENTOS Os autores agradecem ao CNPq, PNPD/CAPES e FINEP, pelo suporte financeiro. REFERÊNCIAS 1 1 D. Wawrzynczyk, A. Bednarkiewicz, M. Nyk, W. Strek, M. Samoc, J. 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Falcony, Opt. Mater. 42 (2015) 99. Carmona-Téllez S. Alarcón-Flores G. Meza-Rocha A. Zaleta-Alejandre E. Aguilar-Futis M. Murrieta H. Falcony S., C. Opt. Mater 42 2015 99 99 7 7 X. Du, L. Li, W. Zhang, W. Chen, Y. Cui, Mater. Res. Bull. 61 (2015) 64. Du X. Li L. Zhang W. Chen W. Cui Y. Mater. Res. Bull 61 2015 64 64 8 8 A. Gnach, A, Bednarkiewicz, Nano Today, 7 (2012) 532. Gnach A. Bednarkiewicz A Nano Today 7 2012 532 532 9 9 M. Larsson, W.-C. Huang, M.-H. Hsiao, Y.-J. Wang, M., Nydén, S.-H. Chiou, D.-M. Liu, Prog. Polym. Sci. 38 (2013) 1307. Larsson M. Huang W.-C. Hsiao M.-H. Wang Y.-J. Nydén M. Chiou S.-H. Liu D.-M. Prog. Polym. Sci 38 2013 1307 1307 10 10 S. Pramanik, B.M. Pingguan, N.A.A. Osman, J. Electrochem. Sci. 8 (2013) 8863. Pramanik S. Pingguan B.M. Osman N.A.A. J. Electrochem. Sci 8 2013 8863 8863 11 11 W. Hongli, W. Feng, Nanocrystalline Materials, 2nd ed., Ed. S.-C. Tjong, Elsevier, Oxford (2014) 121. Hongli W. Feng W. Nanocrystalline Materials 2nd ed S.-C. Tjong Elsevier Oxford 2014 121 121 12 12 F.B. Materne, G. Wittucki, in Proc. 9th Int. Coatings Congress - ABRAFATI, S. Paulo (2005). Materne F.B. Wittucki G. Proc 9thInt. Coatings Congress ABRAFATI S. Paulo 2005 13 13 M. Moritz, M. Geszke-Moritz, Mater. Sci. Eng.: C 49 (2015) 114. Moritz M. Geszke-Moritz M. Mater. Sci. Eng. C 49 2015 114 114 14 14 I.Yu., G. Elena, S., Speranskaya, V.V. Goftman, D. Tang, S. De Saeger, Trends Anal. Chem. 66 (2015) 53. Yu I. Elena G. Speranskaya S. Goftman V.V. Tang D. De Saeger S. Trends Anal. Chem 66 2015 53 53 14 14 S. Wu, H. Zhang, Z. Shi, N. Duan, C. Fang, S. Dai, Z. Wang, Food Control 50 (2015) 597. Wu S. Zhang H. Shi Z. Duan N. Fang C. Dai S. Wang Z. Food Control 50 2015 597 597 15 15 F. Kurayama, S. Suzuki, T. Oyamada, T. Furusawa, M. Sato, N. Suzuki, J. Colloid Interface Sci. 349 (2010) 76. Kurayama F. Suzuki S. Oyamada T. Furusawa T. Sato M. Suzuki N. J. Colloid Interface Sci. 349 2010 76 76 16 16 L. Gama, M.A. Ribeiro, B.S. Barros, R.H.A. Kiminami, I.T. Weber, A.C.F.M. Costa, J. Alloy. Compoun. 483 (2009) 453. Gama L. Ribeiro M.A. Barros B.S. Kiminami R.H.A. Weber I.T. Costa A.C.F.M. J. Alloy. Compoun 483 2009 453 453 17 17 S.R. Jain, K.C. Adiga, P.V. Verneker, Combust. Flame 40 (1981) 71. Jain S.R. Adiga K.C. Verneker P.V. Combust. Flame 40 1981 71 71 18 18 J. Feng, B.D. Hammock, I.M. Kennedy, S. Goumin, A. Maquieira, USPTO 2003/0180780 Al (2003). Feng J. Hammock B.D. Kennedy I.M. Goumin S. Maquieira A. USPTO 2003/0180780 Al 2003 19 19 P.T.A. Santos, P.S. Melo, T.S. Barros, S.A. Júnior, M.V.L. Fook, A.C.F.M. Costa, in Anais do 9° Congresso Brasileiro de Polímeros (2007) 9. Santos P.T.A. Melo P.S. Barros T.S. Júnior S.A. Fook M.V.L. Costa A.C.F.M. Anais 9°Congresso Brasileiro de Polímeros 2007 9 9 20 20 L.F. Saliba, “Interação do complexo luminescente [Eu(tta)3] com sílica mesoporosa”, Diss. Mestrado, Faculdade de Engenharia, UNESP, S. Paulo (2009). Saliba L.F. Interação do complexo luminescente [Eu(tta)3] com sílica mesoporosa Diss. Mestrado Faculdade de Engenharia, UNESP S. Paulo 2009 21 21 R.Z. Zand, K. Verbekenb, A. Adriaensa, Prog. Org. Coat. 72 (2011) 709. Zand R.Z. Verbekenb K. Adriaensa A. Prog. Org. Coat. 72 2011 709 709 22 22 J. Zhao, M. Milanova, M.M.C.G. Warmoeskerkena, V. Dutschk, Colloids Surf., A: Physicochem. Eng. Aspects 4 (2012) 273. Zhao J. Milanova M. Warmoeskerkena M.M.C.G. Dutschk V. Colloids Surf., A: Physicochem. Eng. Aspects 4 2012 273 273 23 23 C.M. Furtado, P.M.A.G. Araújo, P.T.A. Santos, A.C.F.M. Costa, Mater. Sci. Forum 727-728 (2012) 263. Furtado C.M. Araújo P.M.A.G. Santos P.T.A. Costa A.C.F.M. Mater. Sci. Forum 727-728 2012 263 263 24 24 Y. Zhang, W. Wei, G.K. Das, T.T.Y. Tan, Photochem. Rev. 20 (2014) 71. Zhang Y. Wei W. Das G.K. Tan T.T.Y. Photochem. Rev. 20 2014 71 71 25 25 Y. Wu, M. Shi, L. Zhao, W. Feng, F. Li, C. Huang, Biomaterials 35 (2014) 5830. Wu Y. Shi M. Zhao L. Feng W. Li F. Huang C. Biomaterials 35 2014 5830 5830 26 26 R.D. Peterson, B.T. Cunningham, J.E. Andrade, Biosens. Bioelectron. 56 (2014) 320. Peterson R.D. Cunningham B.T. Andrade J.E. Biosens. Bioelectron 56 2014 320 320 27 27 H.S. Mader, P. Kele, S.M. Saleh, O.S. Wolfbeis, Curr. Opin. Chem. Biol. 14 (2010) 582. Mader H.S. Kele P. Saleh S.M. Wolfbeis O.S. Curr. Opin. Chem. Biol. 14 2010 582 582