MARCADORES HISTOLÓGICOS DE LA DEGENERACIÓN Y REGENERACIÓN DEL DISCO INTERVERTEBRAL HUMANO

Autoría SCIMAGO INSTITUTIONS RANKINGS

RESUMEN

Objetivo: Definir valores histológicos de degeneración del disco intervertebral que permitan la definición de las características morfológicas de la enfermedad y mejorar el conocimiento de la enfermedad degenerativa del disco lumbar mediante marcadores inmunohistoquímicos.

Métodos: Las coloraciones histológicas con hematoxilina y eosina, azul alcián/PAS, tricrómico de Masson y safranina O/FCF se utilizaron en secciones de los discos intervertebrales degenerados de pacientes con enfermedad degenerativa del disco lumbar. Los marcadores de proteínas definidos por inmunohistoquímica permitieron la evaluación de la proliferación celular (Ki-67), y la apoptosis (p53) .

Resultados: Los datos de la determinación permitieron establecer la tinción con safranina O/FCF como la más eficaz para evaluar parámetros tales como el área, diámetro y número de agrupaciones de condrocitos. Se determinó también la importancia del uso asociado de diversas tinciones, como safranina O/FCF, tricrómico de Masson, azul de alcián/PAS y hematoxilina y eosina, ya que son complementarias para la verificación histopatológica de la degeneración del disco intervertebral. Por la técnica de la expresión de proteína con análisis inmunohistoquímica, fue posible establecer dos etapas de la degeneración del disco: la proliferación de células con la formación de agrupaciones de condrocitos y la inducción de la apoptosis.

Conclusión: Este estudio permitió definir la caracterización histológica e inmunohistoquímica en la enfermedad degenerativa del disco lumbar y sus grados de evolución, mediante la determinación de nuevas puntuaciones de degeneración del disco.

Descriptores: Disco intervertebral; Histología; Inmunohistoquímica; Proliferación celular; Apoptosis

Stain	Purpose	Score-histology
Hematoxylin and Eosin (H&E)	Number of chondrocyte clusters in the NP	0- Absence
		1-Up to 50%
		2-50% up to 80%
		3->80%
	Mean horizontal line of the chondrocyte clusters in the NP	0-Absence
		1-Up to 9µm
		2->39µm up to 59µm
		3->59µm up to 79µm
		4->79µm
	Area of chondrocyte clusters in the NP	0-Absence
		1-Up to 1500µm²
		>1500µm² up to 2500 µm²
		>2500 µm² up to 3500 µm²
		>3500 µm² up to 4500 µm²
		>4500 µm²
	Fissure in the AF	0-Absence
		1-Presence
Safranin O/FCF	Number of chondrocyte clusters in the NP.	0-Absence
		1-Up to 50%
		2-50% up to 80%
		3->80%
	Mean Horizontal Line of the chondrocyte clusters in the NP	0-Absence
		1- Up to 39µm
		2->39µm up to 59µm
		3->59µm up to 79µm
	Area of the chondrocyte clusters in the NP	0-Absence
		1-Up to 1500µm²
		2->1500µm²up to 2500 µm²
		3->2500 µm² up to 3500 µm²
		4->3500 µm²up to 4500 µm²
		5->4500 µm²
Alcian/PAS (pH 2.1)	Acid mucopolysaccharide deposit around the chondrocyte clusters in the NP	0-Absence
		1-Rare
		2-Average
		3-Abundant
Masson Trichrome	Misalignment of the Collagen fibers around the clusters in the NP	0-Absence
		1-Rare
		2-Average
		3-Abundant

Correlations Spearman-Rho
		Ages	Time of evolution	Force	Sensibility	Disc degeneration	Facet degeneration	Alcian/PAS	Trichrome Masson	Scores for average area1	Average area1	Scores average diameter1	Average diameter1	Scores for number of clusters 1
Ages	Rho	1.000	0.375	-0.093	-0.021	0.422*	0.543**	0.102	0.107	-0.107	-0.186	0.083	0.025	0.100
	Sign	.	0.078	0.672	0.926	0.045	0.007	0.643	0.628	0.628	0.395	0.707	0.911	0.650
Time of evolution	Rho	0.375	1.000	-0.045	0.000	0.650**	0.311	-0.167	-0.164	-0.122	-0.252	-0.105	-0.148	-0.151
	Sign	0.078	.	0.838	1.000	0.001	0.148	0.447	0.454	0.578	0.247	0.633	0.500	0.493
Force	Rho	-0.093	-0.045	1.000	0.422*	0.199	0.150	0.345	0.126	0.031	0.022	0.024	-0.015	0.080
	Sign	0.672	0.838	.	0.045	0.362	0.495	0.098	0.567	0.890	0.919	0.914	0.946	0.715
Sensibility	Rho	-0.021	0.000	0.422*	1.000	0.044	0.163	0.382	-0.028	-0.007	0.164	0.090	0.125	0.226
	Sign	0.926	1.000	0.045	.	0.843	0.458	0.072	0.900	0.976	0.454	0.682	0.570	0.299
Disc degeneration	Rho	0.422*	0.650**	0.199	0.044	1.000	0.451*	-0.067	-0.049	-0.179	-0.267	-0.277	-0.239	-0.084
	Sign	0.045	0.001	0.362	0.843	.	0.031	0.760	0.823	0.414	0.219	0.201	0.272	0.703
Facet degeneration	Rho	0.543**	0.311	0.150	0.163	0.451*	1.000	0.084	-0.031	-0.121	-0.191	-0.033	0.023	0.070
	Sign	0.007	0.148	0.495	0.458	0.031	.	0.702	0.899	0.582	0.382	0.880	0.918	0.752
Alcian/PAS	Rho	0.102	-0.167	0.354	0.382	-0.067	0.084	1.000	0.350	0.096	0.265	0.377	0.269	0.584**
	Sign	0.643	0.447	0.098	0.072	0.760	0.702	.	0.102	0.664	0.221	0.076	0.214	0.003
Masson Trichrome	Rho	0.107	-0.164	0.126	-0.028	-0.049	-0.031	0.350	1.000	0.368	0.416*	0.351	0.340	0.494*
	Sign	0.628	0.454	0.567	0.900	0.823	0.889	0.102	.	0.084	0.048	0.100	0.112	0.017
Scores for average area1	Rho	-0.107	-0.122	0.031	-0.007	-0.179	-0.121	0.096	0.368	1.000	0.880**	0.817**	0.779**	0.543**
	Sign	0.628	0.578	0.890	0.976	0.414	0.582	0.664	0.084	.	0.000	0.000	0.000	0.007
Average area1	Rho	-0.186	-0.252	0.022	0.164	-0.267	-0.191	0.265	0.416*	0.880**	1.000	0.752**	0.892**	0.477*
	Sign	0.395	0.247	0.919	0.454	0.219	0.382	0.221	0.048	0.000	.	0.000	0.000	0.021
Scores for average diameter1	Rho	0.083	-0.105	0.024	0.090	-0.277	-0.033	0.377	0.351	0.817**	0.752**	1.000	0.795**	0.670**
	Sign	0.707	0.633	0.914	0.682	0.201	0.880	0.076	0.100	0.000	0.000	.	0.000	0.000
Average diameter1	Rho	0.025	-0.148	-0.015	0.125	-0.239	0.023	0.269	0.340	0.779**	0.892**	0.795**	1.000	0.474*
	Sign	0.911	0.500	0.946	0.570	0.272	0.918	0.214	0.112	0.000	0.000	0.000	.	0.022
Scores for number of clusters 1	Rho	0.100	-0.151	0.080	0.226	-0.084	0.070	0.584**	0.494*	0.543**	0.477*	0.670**	0.474*	1.000
	Sign	0.650	0.493	0.715	0.299	0.703	0.752	0.003	0.017	0.007	0.021	0.000	0.022	.

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[TFN1] ¹
Safranin O/FCF. * Correlation is significant at 0.05 (2 ends). ** Correlation is significant at 0.01 level (2 ends).