Técnica simples, rápida e barata de isolamento e multiplicação de Phytophthora infestans

RESUMO:

Neste estudo, apresentamos técnica de isolamento e multiplicação de Phytophthora infestans, oomiceto fitopatogênico de isolamento desafiador. O procedimento teve início com folhas de batata naturalmente infectadas, as quais foram higienizadas em água corrente por 30 minutos. Posteriormente, tubérculos de batata saudáveis foram lavados com detergente neutro, esterilizados em álcool e flambados. Em seguida, foram cortadas rodelas de 4 mm do tubérculo. As rodelas foram usadas para cobrir pedaços de 2 x 4 mm da borda de lesões foliares de P. infestans com dois dias, em placas de Petri vazias e esterilizadas. As placas foram seladas e transferidas para câmaras de crescimento do tipo BOD, mantidas a 18 ºC no escuro por cinco dias. Após esse período, observou-se o crescimento de micélio ralo de cor branca sobre as rodelas de batata. Utilizando alça de Drigalski, o micélio visível foi transferido para meio de centeio e ágar. Após o preenchimento da placa por P. infestans, estimou-se com câmara de Neubauer a concentração de 1,79 x 10⁴ esporângios mL^-1, com taxa de germinação variando entre 69 e 78%. Essa técnica de isolamento simplifica o processo de obtenção in vitro de P. infestans, contribuindo significativamente para pesquisas relacionadas a essa importante doença.

Palavras-chave:
hemibiotrófico; produção massiva de inóculo; requeima