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Fitopatologia Brasileira, Volume: 27, Número: 3, Publicado: 2002
  • Efeito de infecções simples e dupla com Potato virus X e Tobacco mosaic virus sobre o desenvolvimento da doença, crescimento da planta e acumulação de vírus em tomate Articles

    BALOGUN, OLUSEGUN S.; XU, LEIXIN; TERAOKA, TOHRU; HOSOKAWA, DAIJIRO

    Resumo em Português:

    A cultivar de tomate (Lycopersicon esculentum) Fukuju nº 2 foi usada para estudar o efeito de infecçöes simples e duplas com o vírus X da batata (Potato virus X, PVX) e o vírus do mosaico do fumo (Tobacco mosaic virus, TMV). A infecção mista resultou em um aumento sinérgico da severidade da doença, mostrando maior redução no crescimento com inoculação simultânea do que com seqüencial. Entre cinco e 12 dias após a inoculação, o aumento da severidade da doença coincidiu com o incremento no acúmulo de vírus nas folhas jovens. A concentração de PVX nas folhas nº 5 e 7 de plantas com infecção mista foi três a seis vezes mais que a observada com apenasPVX, conforme determinado por DAS-ELISA. A infecção mista com a estirpe L resultou em maior incremento de PVX do que com L11A. A concentração do TMV-L foi mais baixa em infecção dupla e significativamente mais alta do que a de TMV-11A, tanto em infecção simples como em dupla. Análises da OR F2 de PVX por Western Blot e Northern hybridization revelaram o padrão de acúmulo da proteína 25 kDa e RNAs, respectivamente, seguindo aqueles dos viriões e capa proteica. A estirpe TMV-L11A venceu a resistência genética na cv GCR 237 (Tm-1). Na folha superior nº 8, a concentração de PVX foi três vezes maior nas plantas com infecção mista com T-MVL11A. As concentrações das estirpes L e OM de TMV, tanto na infecção simples como dupla foram muito baixas e não se observou efeito sinérgico na concentração de PVX.

    Resumo em Inglês:

    The tomato cv. Fukuju nº. 2 was used for studying the effect of single and double infections with Potato virus X (PVX) and Tobacco mosaic virus (TMV). Mixed infection resulted in a synergistic increase of disease severity, where more growth reduction was seen with simultaneous inoculations than with sequential inoculations at four-day intervals. At five and 12 days post-inoculation, the increased severity of the disease coincided with enhancement of virus accumulation in the rapidly expanding upper leaves. The PVX concentration in leaves nº 5 to 7 of doubly infected plants was three to six fold that of singly infected ones, as determined by DAS-ELISA. Mixed infection with the L strain led to higher enhancement of PVX than with the TMV-L11A strain. The concentration of TMV-L was lower in double infection and significantly higher than TMV-L11A in both singly and doubly infected plants. Analyses of the PVX ORF2 by Western blot and Northern hybridization revealed the pattern of accumulation of the 25 kDa protein and the RNAs, respectively, following those of the virion and coat protein. The strain TMV-L11A overcame the resistance gene in cv. GCR 237 (Tm-1). In the upper leaf nº. 8, the concentration of PVX was three times higher in plants with mixed infection than with L11A. The concentrations of the L and OM (TMV strains) in both singly and doubly infected plants were at very low levels, and the synergistic effect on PVX concentration and disease severity was not observed.
  • Detecção e caracterização parcial de um isolado de Groundnut ringspot virus em Solanum sessiliflorum Articles

    BOARI, ALESSANDRA J.; MACIEL-ZAMBOLIM, EUNIZE; LAU, DOUGLAS D.; LIMA, GAUS S. A.; KITAJIMA, ELLIOT W.; BROMMONSCHENKEL, SÉRGIO S. H.; ZERBINI, F. MURILO

    Resumo em Português:

    O cubiu (Solanum sessiliflorum), originário da Amazônia, é um fruto utilizado como alimento, medicamento e cosmético. Em um plantio experimental de cubiu, para a avaliação da sua adaptação nas condições da região Norte do Estado do Rio de Janeiro, observou-se plantas com sintomas de mosaico. Uma planta de cubiu foi coletada e analisada para a identificação do agente etiológico. Após a purificação biológica, o vírus foi inoculado via extrato foliar em uma série de plantas diferenciadoras. Foram observadas lesões locais cloróticas em Chenopodium quinoa, lesões locais necróticas em Gomphrena globosa, mosaico em S. sessiliflorum, necrose foliar e de caule em tomate (Lycopersicon esculentum) 'Rutgers' e mosaico e deformação foliar em Datura stramonium e Physalis floridana. O vírus ocasionou lesões locais necróticas e necrose sistêmica seguida de morte de quatro espécies de Nicotiana. Em cortes ultra-finos de folhas de cubiu foram observadas partículas de formato circular envolvidas por membrana, típicas de tospovírus. A análise em SDS-PAGE da proteína do nucleocapsídeo concentrada a partir de folhas de cubiu revelou uma banda com aproximadamente 28 kDa, valor esperado para tospovírus. Um fragmento de aproximadamente 0,8 bp correspondente ao gene N (proteína do nucleocapsídeo) foi amplificado por RT-PCR, clonado e seqüenciado. Foi constatada homologia de seqüência de aminoácidos de 95% entre a proteína N do isolado do cubiu e de Groundnut ringspot virus (GRSV). Para as demais espécies a homologia foi inferior a 85%. Este é o primeiro relato da ocorrência natural do GRSV (ou qualquer outro vírus) em plantas de cubiu.

    Resumo em Inglês:

    The cubiu (Solanum sessiliflorum) fruit, originating in the Amazon basin, is commonly used in that region for food, medicine, and cosmetics. In an experimental culture of cubiu, in order to evaluate its adaptation to conditions in the Northern region of the state of Rio de Janeiro, it was observed plants with mosaic symptoms. A cubiu plant was collected and analyzed to identify the etiological agent. After mechanical passage through a local lesion host, a host range test was performed. The virus induced chlorotic local lesions in Chenopodium quinoa, necrotic local lesions in Gomphrena globosa, mosaic in S. sessiliflorum, leaf and stem necrosis in tomato (Lycopersicon esculentum) 'Rutgers', mosaic and leaf distortion in Datura stramonium and Physalis floridana, and necrotic local lesions followed by systemic necrosis and plant death in four Nicotiana species. Electron microscopic observations of ultra thin sections from infected cubiu leaves showed the presence of spheroidal, membrane-bound particles typical of tospovirus species. Analysis of the nucleocapsid protein from concentrated virus particles indicated the presence of a 28 kDa protein. RT-PCR was performed after total RNA extraction from infected IPA-6 tomato leaves. A fragment of approximately 0,8 kbp corresponding to the N gene was amplified, cloned and sequenced. The N protein from the cubiu isolate was 95% homologous to the Groundnut ringspot virus (GRSV) protein, and no more than 85% homologous to those from Zucchini lethal chlorosis virus (ZLCV) and Chrysanthemun stem necrosis virus (CSNV), Tomato spotted wilt virus (TSWV), and Tomato chlorotic spot virus (TCSV). This is the first report of the occurrence of GRSV (or any other plant virus) in cubiu.
  • Solarização para controle de Phytophthora parasitica em mudas de citros Artigos

    MAY-DE MIO, LOUISE L.; GHINI, RAQUEL; KIMATI, HIROSHI

    Resumo em Português:

    O uso de solarização tem-se mostrado eficiente para o controle de fitopatógenos habitantes do solo. No caso de Phytophthora parasitica, agente causal de podridão de raízes em viveiros de citros (Citrus spp.), utiliza-se, normalmente, desinfestação com brometo de metila, produto altamente tóxico ao homem e à comunidade microbiana do solo. Neste trabalho, verificou-se a eficiência da solarização em substrato pré-colonizado com P. parasitica por meio de dois métodos: sacos plásticos e coletor solar. Os experimentos foram realizados no inverno e no verão. No inverno, o delineamento foi em blocos ao acaso com oito tratamentos (coletor solar por 24 h e 48 h, saco plástico por 24 h e 48 h, coletor solar por 48 h + Trichoderma spp., Trichoderma spp., testemunha à sombra inoculada e não inoculada) e quatro repetições com 15 plantas. A avaliação foi feita pelo teste de isca para recuperação do patógeno e pelo desenvolvimento das plântulas de citros após três meses do transplantio para os tubetes. No verão, os tratamentos foram um, dois, sete e 14 dias de solarização em sacos plásticos, e a avaliação foi feita apenas pelo teste de isca para recuperação do patógeno. A solarização do substrato para produção de mudas em coletor solar (tubos com 10 cm de diâmetro) por 24 h (inverno e verão) e em sacos plásticos (20 x 25 x 4 cm³) por 48 h no verão eliminou P. parasitica propiciando melhor desenvolvimento das mudas.

    Resumo em Inglês:

    Solarization has been efficient in controlling soil borne pathogens. Phytophthora parasitica, the causal agent of root rot in citrus (Citrus spp.) nurseries, is usually treated by using methyl bromide for soil disinfestations. This product is highly toxic to man as well as to the soil microbial community. Solarization was efficient in both winter and summer P. parasitica pre-colonized substratum. The winter experiment was arranged in a randomized block design with eight treatments (solar collector 24 h and 48 h, plastic bag 24 h and 48 h, solar collector 48 + Trichoderma spp., Trichoderma spp., inoculated and non-inoculated control at shadow), with four repetitions using 15 plants/parcel. Inoculated treatments were solarized and used to fill the containers where seedlings were transplanted. Evaluation was made by means of bait test for recovering pathogen and by citrus seedling development three months later. For summer solarization, the effect in plastic bags was evaluated at one, two, seven and 14 days. This evaluation was made by bait test. Results showed that the solarization of substratum for seedling production eliminates P. parasitica in solar collectors (10-cm-diameter containers) for 24 h in winter as well as in summer (allowing a better seedling growth), and in plastic bags (20 x 25 x 4 cm³) for 48 h in summer.
  • Análise genética de isolados de Rhizoctonia solani de Phaseolus vulgaris da região da Mata Atlântica de São Paulo, Brasil Articles

    MEINHARDT, LYNDEL W.; WULFF, NELSON A.; BELLATO, CLÁUDIA M.; TSAI, SIU M.

    Resumo em Português:

    A diversidade genética de 18 isolados de Rhizoctonia solani de feijoeiro (Phaseolus vulgaris) cultivado na Mata Atlântica de São Paulo, Brasil foi avaliada através da análise do espaçadores transcritos internos (ITS), microssatélites e iniciadores ("primers") específicos para sequências teloméricas. A análise de restrição da região ribossomal ITS1/5,8S/ITS2 produziu um padrão de bandas específico para o grupo de anastomose 4 (GA 4) e seus subgrupos. O padrão obtido com ITS/RFLP, microsatélites e os iniciadores teloméricos permitiram identificar cinco a 11 genótipos entre os isolados de R. solani. Enquanto todos os isolados foram patogênicos em feijoeiro, não houve correlação entre patogenicidade e diferenças genotípicas. Os diferentes iniciadores para PCR revelaram que muitos isolados são geneticamente similares, análise esta que pode ser confirmada por mais de um conjunto de iniciadores, fortalecendo a relação deste agrupamento.

    Resumo em Inglês:

    Rhizoctonia solani isolates obtained from common beans (Phaseolus vulgaris) grown in the mountainous Atlantic Rainforest (Mata Atlântica) region of São Paulo, Brazil, were analyzed to determine their genetic diversity using internal transcribed spacer (ITS), microsatellite and telomere sequence-based PCR primers. Restriction digestion of the ITS1/5.8S/ITS2 ribosomal regions yielded unique banding patterns specific for AG4 and its subgroups. The ITS restriction digestion (ITS/RFLP), telomere and microsatellite primers identified five to 11 genotypes within the isolates of R. solani. While all isolates were pathogenic on beans, there was no correlation found between genotypic differences and pathogenicity. The different PCR primers revealed a number of isolates that were genetically similar. Some of these genetic groups were supported by more than one of the primers utilized in this study, thus confirming their relationship.
  • Efeito da interação temperatura-tensão de água sobre a germinação de microescleródios de Macrophomina phaseolina Artigos

    VIANA, FRANCISCO M. P.; SOUZA, NILTON L. DE

    Resumo em Português:

    Em regiões tropicais e de temperaturas elevadas, Macrophomina phaseolina é agente de podridão em raízes, caule, ramos, e frutos em mais de 500 espécies de plantas cultivadas.Entretanto, pouco se sabe acerca da influência da temperatura e da umidade sobre a germinação dos microescleródios desse fungo. O objetivo deste trabalho foi estudar o efeito da interação temperatura-tensão de água na areia sobre a germinação dos microescleródios do fungo. Os trabalhos foram conduzidos em condições de laboratório, tendo sido realizados em duas etapas. Em um primeiro experimento, avaliou-se a interação de cinco temperaturas com duas tensões de água. Os resultados obtidos subsidiaram um segundo experimento no qual avaliou-se a interação de duas temperaturas com seis tensões de água no substrato. O delineamento experimental para ambos experimentos foi o inteiramente casualizado com quatro repetições, em esquema fatorial, com arranjo combinatório 5x2 e 2x6, respectivamente, para o primeiro e segundo experimentos. Os resultados mostraram (P<=0,05) que os maiores percentuais de germinação ocorreram às temperaturas de 30 ºC e 33 ºC. Na tensão de água de -1.500 kPa ocorreu germinação em todas as temperaturas testadas. A tensão de água de -80 kPa tendeu a proporcionar o maior percentual de germinação, embora não tenha diferido das tensões de -8, -300 e -1.500 kPa. Os microescleródios não germinaram em areia seca ao ar, porém germinaram em 0 kPa, embora em menor percentual que a -8, - 80, -300 e -1.500 kPa. O efeito isolado da tensão de água sobre a germinação foi importante apenas quando se considerou os níveis extremos desse fator.

    Resumo em Inglês:

    In tropical regions and warm temperature regions, Macrophomina phaseolina is a causal agent of root, stem, and fruit decay in more than 500 cultivated plants species. However, not much is known about the influence of temperature and soil humidity in the germination of microsclerotia. The objective of this study was to evaluate the effect of temperature-water tension interaction in the sand substract on the germination of microsclerotia of the fungus. This work was carried out under laboratory conditions and involved two phases. In the first phase the effect of the interaction of five temperatures with two water tension levels was evaluated. In the second phase, the effect of the interaction of two temperatures with six water tension levels was evaluated. A completely randomized design with factorial arrangement and four replications was used for both experiments. The results showed (P<0.05) that the greatest percents of germination occurred at 30 ºC and 33 ºC. At water a tension of -1,500 kPa microesclerotia germination occurred at all temperatures tested. The water tension of -80 kPa tended to show the highest percent of germination, although it did not differ from -8, -300 and -1,500 kPa water tensions. The microsclerotia did not germinate when sand dried at air temperature; however, they germinated at water tension of 0 kPa, although at a lower rate than the germination at the other water tensions studied. The isolated effects of water tension on the microsclerotia germination were important only when the extremes values of this factor were considered.
  • Efeito de níveis populacionais de Heterodera glycines raça 3 sobre a área foliar, fotossíntese e produção de soja Articles

    ASMUS, GUILHERME L.; FERRAZ, LUIZ CARLOS C. B.

    Resumo em Português:

    Os efeitos do parasitismo de Heterodera glycines sobre a fotossíntese, a área foliar e a produção da soja (Glycine Max) foram estudados em casa de vegetação. Dois experimentos foram realizados: Experimento 1, em recipientes menores, até 45 dias após as inoculações e Experimento 2, em recipientes maiores, até o final do ciclo vegetativo da soja . Plantas com nove dias da germinação foram individualmente inoculadas com 0, 1.200, 3.600, 10.800, 32.400 ou 97.200 juvenis J2 (= Pi). A cada dez dias após a inoculação, foram tomadas medidas da taxa fotossintética, condutância estomática, fluorescência da clorofila a, cor das folhas, teor de clorofila e área foliar. Ao final dos experimentos, foram determinadas a massa fresca do sistema radicular, massa seca total da parte aérea, produção de grãos (Experimento 2) e taxa reprodutiva dos nematóides. Nos dois experimentos, os tratamentos foram dispostos em blocos ao acaso, com dez repetições. Ocorreram marcantes reduções da taxa fotossintética e do teor de clorofila foliar e observou-se intenso amarelecimento das folhas. Mesmo na menor densidade populacional (1.200), o nematóide causou expressivas reduções na área foliar, na massa fresca das raízes e na produção de massa seca total da parte aérea e de grãos. A produção da soja parasitada por H. glycines apresentou alta correlação com a integral da área foliar, podendo-se cogitar do uso dessa variável na elaboração de modelos de previsão de danos que levem em consideração a fisiologia de produção de plantas infectadas por nematóides.

    Resumo em Inglês:

    The effect of Heterodera glycines on photosynthesis, leaf area and yield of soybean (Glycine max) was studied in two experiments carried out under greenhouse condition. Soybean seeds were sown in 1.5 l (Experiment 1) or 5.0 l (Experiment 2) clay pots filled with a mixture of field soil + sand (1:1) sterilized with methyl bromide. Eight days after sowing, seedlings were thinned to one per pot, and one day later inoculated with 0; 1.200; 3.600; 10.800; 32.400 or 97.200 J2 juveniles of H. glycines. Experiment 1 was carried out during the first 45 days of the inoculation while Experiment 2 was conducted during the whole cycle of the crop. Measurements of photosynthetic rate, stomatic conductance, chlorophyll fluorescence, leaf color, leaf area, and chlorophyll leaf content were taken at ten-day intervals throughout the experiments. Data on fresh root weight, top dry weight, grain yield, number of eggs/gram of roots, and nematode reproduction factor were obtained at the end of the trials. Each treatment was replicated ten times. There was a marked reduction in both photosynthetic rate and chlorophyll content, as well as an evident yellowing of the leaves of the infected plants. Even at the lowest Pi, the effects of H. glycines on the top dry weight or grain yield were quite severe. Despite the parasitism, soybean yield was highly correlated with the integrated leaf area and, accordingly, the use of this parameter was suggested for the design of potential damage prediction models that include physiological aspects of nematode-diseased plants.
  • Detecção e caracterização do gene da proteína capsidial de um isolado de Grapevine virus B de videiras do Sul do Brasil com intumescimento dos ramos Articles

    NICKEL, OSMAR; FAJARDO, THOR V. M.; ARAGÃO, FRANCISCO J. L.; CHAGAS, CÉSAR M.; KUHN, GILMAR B.

    Resumo em Português:

    Um isolado de Grapevine virus B (GVB), obtido por indexação de Vitis labrusca e V. vinifera na indicadora LN33, foi transmitido mecanicamente para várias espécies do gênero Nicotiana. O vírus foi parcialmente purificado de N. cavicola e a proteína capsídica foi estimada em 23 kDa por SDS-PAGE. Ao microscópio eletrônico, observou-se, em extrato foliar de N. occidentalis e N. cavicola, partículas flexuosas com estriações transversais, predominantemente medindo 750-770 x 12 nm, com comprimento modal de 760 nm. A decoração das partículas indicou reação clara e positiva com anti-soro contra GVB. Em DAS-ELISA, GVB foi detectado em extratos de Nicotiana spp. e de videira (Vitis spp.). Em Western blots foram observadas reações específicas e cruzadas, da proteína capsídica de GVB com os anti-soros contra GVB e GVA, respectivamente. A partir do RNA viral extraído de N. occidentalis, foi amplificado por RT-PCR um fragmento de 594 bp específico de GVB, que codificou 197 aminoácidos do gene da proteína capsídica. As seqüências de nucleotídeos e de aminoácidos deduzidos do gene da proteína capsidial apresentaram alta identidade com isolados italianos e japoneses de GVB.

    Resumo em Inglês:

    An isolate of Grapevine virus B (GVB), obtained by indexing Vitis labrusca and V. vinifera grapevines on the indicator LN33, was transmitted mechanically to several Nicotiana species. The virus was partially purified from N. cavicola and the coat protein estimated at 23 kDa by SDS-PAGE. In negatively stained leaf extracts of experimentally inoculated N. cavicola and N. occidentalis, flexuous particles with cross banding were observed, predominantly measuring 750-770 x 12 nm, with a modal length of 760 nm. Decoration indicated a clear, positive reaction against AS-GVB. In DAS-ELISA, GVB was detected in N. cavicola and grapevine extracts, and Western blots showed homologous and cross reaction of GVB and GVA antisera with GVB coat protein. Using specific primers for GVB, a fragment of 594 bp, comprising the coat protein gene coding for 197 amino acids, was amplified by RT-PCR with viral RNA extracted from GVB-infected N. occidentalis. The nucleotide and the deduced amino acid sequences of the coat protein gene showed high identities with Italian and Japanese isolates of GVB.
  • Caracterização do Tomato chlorotic spot virus isolado de jiló no Vale do Paraíba, Estado de São Paulo Artigos

    EIRAS, MARCELO; CHAVES, ALEXANDRE L. R.; COLARICCIO, ADDOLORATA; HARAKAVA, RICARDO; ARAUJO, JANSEN DE; CHAGAS, CÉSAR M.

    Resumo em Português:

    Os tospovírus são responsáveis por perdas significativas em diversas culturas, principalmente solanáceas. No município de São José dos Campos (SP), plantas de jiló (Solanum gilo) apresentando sintomas de mosaico, bolhosidades, nanismo e queda acentuada da produção foram coletadas para análise. Visando a caracterização do agente causador dos sintomas, testes biológicos, elétrono microscópicos, sorológicos e moleculares foram realizados. Através de inoculação mecânica em plantas indicadoras das famílias Amaranthaceae, Chenopodiaceae e Solanaceae obtiveram-se resultados típicos aos esperados para tospovírus. Ao microscópio eletrônico de transmissão, observaram-se, em contrastação negativa, partículas pleomórficas com diâmetro entre 80 e 110 nm e em cortes ultra-finos partículas presentes em vesículas do retículo endoplasmático. Através de DAS-ELISA, identificou-se o Tomato chlorotic spot virus (TCSV). A partir de RNA total extraído de folhas infetadas, amplificaram-se, via RT-PCR, fragmentos correspondentes ao gene da proteína do capsídeo (cp) os quais foram seqüenciados e comparados com outros depositados no "GenBank". A homologia de nucleotídeos e aminoácidos deduzidos foi respectivamente de 99 e 95% quando comparada com seqüências de isolados de TCSV. A comparação com as outras espécies do gênero Tospovirus apresentou valores de homologia entre 72 e 84%. Estes resultados confirmam a identidade deste vírus como pertencente à espécie TCSV, que é predominante no Estado de São Paulo e importante patógeno de outras plantas cultivadas. Além disso, variedades de jiló quando inoculadas foram susceptíveis tanto ao TCSV como às espécies Tomato spotted wilt virus (TSWV) e Groundnut ringspot virus (GRSV).

    Resumo em Inglês:

    Tospoviruses are responsible for important losses in most crops, mainly Solanaceae. Gilo (Solanum gilo) plants showing mosaic, blistering, stunting and 100% production losses were collected for analysis from São José dos Campos in the State of São Paulo. Biological, electron microscopy, serological and molecular tests were carried out in order to characterize the virus isolate. The mechanical inoculation on Amaranthaceae, Solanaceae and Chenopodiaceae plants showed typical tospovirus-induced symptoms. Pleomorphic particles from 80 to 110 nm were observed in negatively stained preparations and in vesicles of the endoplasmic reticulum of infected cells. Tomato chlorotic spot virus (TCSV) was identified by DAS-ELISA. DNA fragments were amplified by RT-PCR, with specific primers designed to the nucleocapsid gene (N) of the main Tospovirus species, sequenced and compared with others in the GenBank. The nucleotide and amino acid deduced sequences homology was 99 and 95%, respectively, with TCSV. Comparison with other Tospovirus species presented values between 74 and 81%. These results confirmed the identity of this virus isolate as TCSV, the main tospovirus species in São Paulo that also damages other Solanaceous crops. Varieties of gilo have been inoculated showing susceptibility to TCSV, Tomato spotted wilt virus (TSWV) and Groundnut ringspot virus (GRSV).
  • Propriedades moleculares de um isolado brasileiro do Southern bean mosaic virus Artigos

    MOREIRA, ANDREIA E.; GASPAR, JOSÉ O.

    Resumo em Português:

    Um isolado do Southern bean mosaic virus (SBMV), gênero Sobemovirus, encontrado em feijoeiro (Phaseolus vulgaris) no Estado de São Paulo, foi purificado e algumas de suas propriedades moleculares determinadas. As partículas virais apresentam diâmetro de 28-30 nm e proteína capsidial com massa molecular estimada em 30 kDa. Das partículas virais foi extraído RNA de vários tamanhos (4,2 Kb, 3,1 Kb, 2,65 Kb, 2,15 Kb, 1,64 Kb, 1,36 Kb e 1,0 Kb) sendo aquele de 4,2 Kb o RNA genômico e o de 1,0 Kb supostamente um subgenômico que codifica para a proteína capsidial. Ácidos ribonucleicos de mesmo tamanho foram também detectados in vivo, indicando estar associados à replicação viral. Na análise do RNA de fita dupla (dsRNA), somente duas espécies foram detectadas (4,2 Kpb e 1,0 Kpb) correspondendo às formas replicativas do RNA genômico e do subgenômico para proteína capsidial. Os resultados indicam que somente estes dois RNA são replicados por meio de formas replicativas (RFs), enquanto os demais devem ser formados talvez por iniciação interna da fita negativa do RNA genômico. O SBMV-B SP apresentou propriedades moleculares análogas àquelas do SBMV descrito na América do Norte.

    Resumo em Inglês:

    An isolateof the Southern bean mosaic virus (SBMV), genus Sobemovirus, found in the State of São Paulo, Brazil, was purified and some of its molecular properties determined. The virus particles are 28-30 nm in diameter and the coat protein has a molecular mass of 30 kDa. A heterogeneous population of RNAs (4.2 Kb, 3.1 Kb, 2.65 Kb, 2.15 Kb, 1.64 Kb, 1.36 Kb and 1.0 Kb) was extracted from virus particles, where those of 4.2 Kb and 1.0 Kb are, respectively, the genomic and the putative subgenomic RNA for coat protein. RNAs of the same size were also extracted from infected common bean (Phaseolus vulgaris) leaves, indicating that they must have some function in the virus replication cycle. Only two species of double-stranded RNAs (dsRNA) were extracted from infected tissues (4.2 Kbp and 1.0 Kbp), corresponding to the replicative forms of the genomic RNA and the subgenomic RNA for coat protein. These results indicate that only these two RNAs replicate by means of replicative forms (RF) while the others are probably synthesized by an internal initiation of the negative strand of the genomic RNA. The SBMV-B SP showed molecular properties analogous to the SBMV described in North America.
  • Cytopathological characterization of Mal de Río Cuarto virus in corn, wheat and barley Articles

    ARNEODO, JOEL D.; LORENZO, EUGENIA; LAGUNA, IRMA G.; ABDALA, GUILLERMINA; TRUOL, GRACIELA A.

    Resumo em Espanhol:

    La enfermedad denominada mal de Río Cuarto es causada por el Mal de Río Cuarto virus (MRCV) transmitido por Delphacodes kuscheli. Se reportan los resultados de un estudio de las alteraciones citopatológicas producidas por el MRCV en maíz (Zea mays), trigo (Triticum aestivum) y cebada (Hordeum vulgare), observadas en microscopio electrónico de transmisión. Las plantas de maíz fueron inoculadas con ejemplares infectivos de D. kuscheli colectados en la zona endémica de la enfermedad. Para la transmisión del virus a los cereales de grano fino se utilizaron insectos criados en laboratorio, siendo la fuente de inóculo plantas de trigo y cebada infectadas con un aislamiento del virus obtenido en Río Cuarto y mantenido en invernáculo. Se colectaron muestras de hojas con síntomas conspicuos en maíz, y en cereales de grano fino. La infección viral fue corroborada mediante DAS-ELISA. Se encontraron viroplasmas, conteniendo partículas virales completas e incompletas y material fibrilar, en el citoplasma de las células infectadas en todas las especies. Los viriones maduros midieron entre 60 y 70 nm de diámetro. En trigo y cebada, los viroplasmas y partículas dispersas fueron observados sólo en el floema, mientras que en maíz también se encontraron viriones en las células de la vaina. En maíz, se detectaron partículas formando arreglos cristalinos en las células de las enaciones. Exclusivamente en las muestras de trigo, se encontraron inclusiones tubulares. Las tres especies mostraron anomalías en los cloroplastos de las células afectadas. Los resultados obtenidos ponen de manifiesto que la citopatología propia del MRCV presenta semejanzas con la de otros fijivirus y pequeñas diferencias dependiendo de la planta hospedante.

    Resumo em Inglês:

    The Mal de Río Cuarto disease is caused by Mal de Río Cuarto virus (MRCV) transmitted by Delphacodes kuscheli. Comparative studies were carried out on the cytopathological alterations produced by MRCV in corn (Zea mays), wheat (Triticum aestivum) and barley (Hordeum vulgare), as seen with a transmission electron microscope. Corn plants were infected with viruliferous D. kuscheli collected from the endemic disease area (i.e. Río Cuarto County, Córdoba, Argentina). For the viral transmission to small grain cereal plants, laboratory rared insects were used. In this case, the inoculum source was wheat and barley plants infected with MRCV isolate grown in a greenhouse. Leaf samples with conspicuous symptoms were collected: enations and size reduction in corn; crenatures, swelling veins and dark green color in small grain cereals. Viral infection was corroborated by DAS-ELISA. Viroplasms containing complete and incomplete virus particles and fibrillar material were found in the cytoplasm of infected cells in all species. Mature virions were between 60 and 70 nm diameter. In wheat and barley, viroplasms and dispersed particles were observed only in phloem, while in corn virions were also found in cells of the bundle sheath. Crystalline arrays of particles were detected in corn enation constitutive cells. Tubular inclusions were found only in wheat samples. The three species showed abnormalities in the chloroplasts of affected cells. The results showed that MRCV cytopathology has similarities with other viruses from the genus Fijivirus, family family Reoviridae, but slight differences depending upon the host plant.
  • Caracterização isoenzimática de espécies de Oidium Comunicações

    SILVA, MARIA D. D.; ALFENAS, ACELINO C.; MAFFIA, LUIZ A.; ZAUZA, EDIVAL A. V.

    Resumo em Português:

    Isolados de Oidium oriundos de eucalipto (Eucalyptus urophylla) roseira (Rosa sp), dália (Dhalia sp.), feijoeiro (Phaseolus vulgaris) e urucunzeiro (Bixa orellana) foram comparados mediante écnicas de extração e eletroforese de isoenzimas, em gel de amido. Dentre 19 enzimas testadas, fosfatase ácida, enzima málica, alfa-esterase, 6-fosfoglucanato desidrogenase, fosfoglucose isomerase, hexoquinase e malato desidrogenase ofereceram atividade e resolução satisfatórias. Os isolados do patógeno oriundos de eucalipto e de roseira apresentaram um mesmo padrão de bandas com coeficiente de similaridade igual a 100%. Os demais isolados diferiram entre si e exibiram coeficiente de similaridade inferior a 43%. Os isolados obtidos de eucalipto e de roseira, além de morfologicamente similares, apresentaram um mesmo padrão isoenzimático sendo, portanto, anamorfos de Sphaerotheca pannosa.

    Resumo em Inglês:

    Isolates of Oidium spp. obtained from eucalyptus (Eucalyptus urophylla), Rosa sp, Dhalia sp., common bean (Phaseolus vulgaris) and Bixa orellana were compared by isozyme analysis on starch gel electrophoresis. Among 19 enzymes tested, acid phosphatase, malic enzyme, alpha-esterase, 6-phosphogluconate dehydrogenase, phosphoglucose isomerase, hexokinase, and malate dehydrogenase showed reproducible and distinct isozyme banding patterns. Based on isozyme analysis, the Oidium isolate from eucalypt showed identical profiles to that of rose and, therefore, was identified as anamorphs of Sphaerotheca pannosa.
  • Eliminação de vírus do complexo sorose dos citros por microenxertia associada a termoterapia Comunicações

    CARVALHO, SÉRGIO A.; SANTOS, FRANCISCA A.; MACHADO, MARCOS A.

    Resumo em Português:

    A microenxertia de ápices caulinares tem sido utilizada com 100% de sucesso na eliminação do vírus da tristeza (Citrus tristeza virus) e dos viróides da exocorte (Citrus exocortis viroid - CEVd) e cachexia-xiloporose de materiais do Banco Ativo de Germoplasma de Citros do Centro de Citricultura Sylvio Moreira CCSM-IAC. Para o complexo da sorose, entretanto, esta técnica tem apresentado somente 60% de eficiência, indicando a necessidade de sua associação com termoterapia para garantir a eliminação viral. Para tanto, mudas originadas de borbulhas infetadas com sorose foram mantidas em câmara climática com 16 h de luz a 38 ºC e 8 h no escuro a 32 ºC e utilizadas para a obtenção dos ápices caulinares empregados na microenxertia. Após o pegamento, o conjunto micro porta-enxerto e brotação foi sobre-enxertado em limoeiro (Citrus limonia) 'Cravo' com sete meses de idade e mantido em condições de casa de vegetação. Clones de laranjeiras doces (Citrus sinsensis) 'Lima', 'Rubi', 'Piralima', 'Salustiana', 'João Nunes', 'Rosa' e 'Pêra Caire' tratados desta maneira, comprovaram eficiência de 100% de eliminação do complexo sorose, conforme indexação realizada empregando-se laranjeira 'Do Céu' como planta indicadora.

    Resumo em Inglês:

    Shoot-tip grafting has been 100% efficient in eliminating the Citrus tristeza virus (CTV), Citrus exocortis viroid (CEVd) and cachexia-xiloporosis viroid from varieties of the citrus germplasm bank at the Centro de Citricultura Sylvio Moreira CCSM-IAC. However, this technique has shown to be only 60% efficient in getting rido of the citrus psorosis virus complex, showing the necessity of association with thermotherapy to assure a complete virus-free condition. For this experiment, nursery trees were maintained in a climatic chamber at 38 ºC in 16 h light and 32 ºC 8 h darkness for 60 days, and the meristematic apices were used to shoot-tip graft. After the shooting of the meristematic part, this shoot tip graft was over grafted on seven-month old 'Rangpur' lime (Citrus limonia) seedlings, and developed under greenhouse conditions. Clones of sweet oranges (Citrus sinensis) 'Lima', 'Rubi', 'Piralima', 'Salustiana', 'João Nunes', 'Rosa' and 'Pêra Caire' treated this way had 100% success in psorosis virus elimination as shown by a biological index using 'Do Céu' sweet orange as the indicator plant.
  • Efeito da aplicação de terbufos nas populações de três fitonematóides ectoparasitos em cana-de-açúcar Comunicações

    BARROS, ANDREA C. B.; MOURA, ROMERO M.; PEDROSA, ELVIRA M. R.; MACEDO, MAURÍCIO E. A.; SILVA, ISRAEL P.

    Resumo em Português:

    Utilizando-se um experimento com microparcelas em condições de campo, a presente pesquisa teve por objetivo estudar os efeitos de duas diferentes doses do nematicida organofosforado sistêmico Terbufos (Counter 50G) sobre as populações dos fitonematóides ectoparasitos Helicotylenchus dihystera, Criconemella ornata e Paratrichodorus sp. em cinco variedades de cana-de-açúcar (Saccharum sp.), verificando-se, ao mesmo tempo, o potencial de reprodução desses nematóides nas mesmas variedades. O produto foi aplicado nas proporções de 60 e 80 kg do produto comercial por hectare (p.c./ha), no momento do plantio. As variedades estudadas foram SP70-1143, RB813804, SP78-4764, CB45-3 e SP79-1011. Com os dois tratamentos nematicidas, as parcelas testemunhas e as cinco variedades, formou-se um desenho experimental do tipo blocos ao acaso, em esquema fatorial, com cinco repetições. As avaliações fundamentaram-se nos níveis populacionais dos nematóides, com a determinação do fator de reprodução (FR) dos parasitos nas variedades, nas parcelas tratadas e não tratadas pelo nematicida. Pelos resultados obtidos concluiu-se que o produto nas duas dosagens empregadas não interferiu significativamente nos índices populacionais dos três nematóides 16 meses após o plantio, exceto para a combinação C. ornata x Terbufos 80 kg/ha, para a variedade SP70-1143. Não foi possível ser determinada a hospedabilidade das variedades estudadas em relação aos três nematóides, devido aos baixos fatores de reprodução (FR), provavelmente relacionados à longa estiagem ocorrente no ano do experimento.

    Resumo em Inglês:

    The effect of systemic organofosforate nematicide Terbufos (Counter 50G) application, on sugarcane (Saccharum sp.) in soil naturally infested with three ectoparasitic nematode populations Helicotylenchus dihystera, Criconemella ornata and Paratrichodorus sp. were evaluated in field microplots. Five sugarcane varieties (SP70-1143, RB813804, SP78-4764, CB45-3 and SP79-1011), two rates of nematicide application 60, and 80 kg of commercial product per hectare (c.p./ha) applied at planting, together with control plots, were arranged factorially with five replications in a complete randomized block design. Evaluations were based upon nematode population densities and reproductive factors (RF = Pf/Pi) of genotype x nematicide combinations in treated and non treated plots. Sixteen months after planting there were no significant differences in population densities at the nematicide rates considered, except for the C. ornata x Terbufos (80 kg/ha) combination, in the SP70-1143 variety. Due to the low RF, probably associated with a long dry season during the experiment, it was not possible to determine genotype fitness in relation to three nematodes.
  • Reação de porta-enxertos híbridos ao Citrus tristeza virus Comunicações

    MEISSNER FILHO, PAULO E.; SOARES FILHO, WALTER DOS S.; VELAME, KARINNA V. C.; DIAMANTINO, ELIZIO P.; DIAMANTINO, MARIA S. A. S.

    Resumo em Português:

    A tristeza causada pelo vírus da tristeza dos citros (Citrus tristeza virus, CTV) é uma das principais viroses dos citros (Citrus spp.) no Brasil. Alguns autores têm utilizado a intensidade de caneluras produzidas nos ramos para selecionar plantas com resistência ao vírus. Neste trabalho foi avaliada a reação de porta-enxertos híbridos, provenientes do programa de melhoramento genético de citros da Embrapa Mandioca e Fruticultura ao CTV e elaboradas duas escalas, uma fotográfica e outra diagramática, para quantificação de resistência ao CTV. Entre os porta-enxertos avaliados, a maioria apresentou poucas caneluras, sendo portanto considerados resistentes à tristeza. Verificou-se a manutenção da resistência ao vírus nos híbridos produzidos a partir de progenitores que possuíam algum nível de resistência.

    Resumo em Inglês:

    Tristeza caused by Citrus tristeza virus (CTV) is one of the main virus diseases of citrus (Citrus spp.) in Brazil. Some authors have used the intensity of stem pitting symptoms to select resistant plants to tristeza. This work evalueated the reaction of hybrid rootstocks from the citrus breeding program of Embrapa Cassava and Tropical Fruits. Two scales, for hybrid rootstock evaluation of resistance to CTV were elaborated, one photographic and the other diagrammatic. The majority of the analyzed rootstocks showed a low number of stem pitting and was considered resistant to the virus. Resistance was maintained in hybrids when the parent plants presented resistance to CTV.
  • Ocorrência de doenças do pak choi no estado do Paraná, Brasil Comunicações

    DALLA PRIA, MARISTELLA; MARTINS, MARISE C.; REGHIN, MARIE Y.; MAIA, GERLIANE L.

    Resumo em Português:

    A cultura do pak choi (Brassica chinensis), hortaliça de origem Asiática, foi introduzida no Brasil há dois anos por empresas importadoras de sementes. No estado do Paraná vem se destacando na região de Curitiba, principalmente em condições de cultivo protegido. Realizou-se um levantamento da ocorrência de doenças na cultura na safra 1999/2000. Os experimentos foram conduzidos na Fazenda Escola "Capão da Onça" da Universidade Estadual de Ponta Grossa (UEPG), com a diagnose das doenças sendo realizada nos laboratórios de fitopatologia da UEPG e da ESALQ/USP. As doenças que apresentaram maior intensidade na safra de verão foram a Mancha de Alternaria (Alternaria sp.), a Podridão Mole (Erwinia sp.) e a Ferrugem Branca (Albugo candida). Na safra de outono, a Mancha de Alternaria e a Podridão Mole apresentaram baixa incidência e não se observou a ocorrência de Ferrugem Branca.

    Resumo em Inglês:

    Pak choi (Brassica chinensis) is a vegetable crop that was recently introduced in Brazil from Asia by seed importer companies. In the state of Parana this crop is becoming increasingly important in the Curitiba area, mainly under protected cultivation. A survey of diseases in this crop was performed during the growing period of 1999/2000, in the School Farm "Capão da Onça" of the Ponta Grossa State University. Materials collected were analyzed at the plant pathology laboratories of this university and at the University of São Paulo, at Piracicaba. In the summer crop, the most prevalent diseases were: Alternaria spot (Alternaria sp.), soft rot (Erwinia sp.) and white rust (Albugo candida). In the fall, there was a low incidence of Alternaria spot and soft rot and white rust did not occur at all.
  • Primeito relato de Uredo crepidis-japonicae e Septoria crepidis em Crepis japonica no Brasil Phytopathological Notes

    PEREIRA, OLINTO L.; CAVALLAZZI, JOSÉ R. P.; BARRETO, ROBERT W.
  • Ocorrência de Pestalotiopsis psidii e Lasiodiplodia theobromae causando podridão no caule da goiabeira no Ceará Notas Fitopatológicas

    CARDOSO, JOSÉ E.; MAIA, CLAUDIO B.; PESSOA, MARIA N. G.
  • Detecção de Phamerochaete salmonicolor em mogno africano no estado do Pará Notas Fitopatológicas

    POLTRONIERI, LUIZ S.; ALBUQUERQUE, FERNANDO C.; TRINDADE, DINALDO R.; DUARTE, M. LOURDES R.; CARVALHO, J. EDMAR U.; MULLER, CARLOS H.
  • Pyricularia grisea causando lesões necróticas em folhas de bananeira Notas Fitopatológicas

    TRINDADE, DINALDO R.; POLTRONIERI, LUIZ S.; ALBUQUERQUE, FERNANDO C.; MENEZES, ANTÔNIO JOSÉ E. A.
  • Sigatoka negra da bananeira no estado do Pará Notas Fitopatológicas

    TRINDADE, DINALDO R.; POLTRONIERI, LUIZ S.; MENEZES, ANTÔNIO JOSÉ E. A.
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