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Transformation of the entomopathogenic fungi, paecilomyces fumosoroseus and paecilomyces lilacinus (deuteromycotina: hyphomycetes) to benomyl resistence

Os fungos entomopatogênicos Paecilomyces fumosoroseus e P. lilacinus foram transformados com o plasmídio pBT6, contendo o gene de <FONT FACE="Symbol">b</font>-tubulina modificado, isolado do fungo Neurospora crassa, o qual confere resistência ao fungicida benomil. Transformantes resistentes ao benomil, obtidos da P. lilacinus, apresentaram tolerância a concentrações superiores a 30 <FONT FACE="Symbol">m</font>g/ml, enquanto transformantes da P. fumosoroseus apresentaram tolerância a 20 <FONT FACE="Symbol">m</font>g/ml. Após 5 passagens seriadas dos transformantes em meio contendo benomil e 5 passagens seriadas em meio não seletivo, 100% dos transformantes da P. lilacinus apresentaram estabilidade mitótica, através do teste de germinação de conídios. Em contraste, somente 4 dos 9 transformantes obtidos para P. fumosoroseus foram mitoticamente estáveis. Análise de Southern blot dos DNA genômicos de ambas as espécies sugere que o mecanismo de transformação foi por substituição alélica do gene de <FONT FACE="Symbol">b</font>-tubulina, para todos os transformantes obtidos. As seqüências não homólogas do vetor não foram detectadas nos genomas dos transformantes.


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