As concentrações de diosgenina em uma coleção de tubérculo de Dioscorea polygonoides do Eje Cafetero (EC, Colombia) foram determinadas por cromatografia líquida de alta eficiência. Os teores obtidos variaram de 0,02 a 2,64%. A maior concentração de diosgenina (2,64%) foi obtida de um tubérculo coletado perto de Salento (Quindio). A média de recuperação desta foi de 97%. A identificação foi feita por cromatografia gasosa-espectrometria de massas (CG-EM) e por coeluição com o padrão autentico. Os resultados destes estudos foram importantes uma vez que os teores de diosgenina obtidos se mostraram superiores quando comparados aqueles relatados para outras espécies medicinais de Dioscorea, tornando Dioscorea polygonoides uma fonte potencial de diosgenina.