Open-access HPLC/DAD determination of rosmarinic acid in Salvia officinalis: sample preparation optimization by factorial design

A sálvia (Salvia officinalis) contém altos teores de ácido rosmarínico (RA), uma substância bioativa, bem como outros polifenóis. RA é facilmente oxidável e pode sofrer degradação durante a preparação da amostra para análise. O objetivo deste trabalho foi desenvolver e validar um método analítico para a determinação do RA em sálvia, usando planejamento fatorial para a otimização da preparação de amostras. Inicialmente foram determinadas as variáveis estatisticamente significativas para melhorar o rendimento da extração do RA, as quais foram depois otimizadas usando planejamento composto central (CCD). O método analítico foi validado e aplicado na análise de amostras comerciais de sálvia. O procedimento otimizado consistiu na extração com metanol aquoso (40%) contendo uma mistura antioxidante (ácido ascórbico e ácido etileno diamino tetracético (EDTA)), com sonicação a 45 ºC por 20 min. As amostras foram injetadas em um sistema contendo coluna C18, usando metanol (A) e ácido fosfórico aquoso 0.1% (B) em gradiente (45A:55B, 0-5 min; 80A:20B, 5-10 min) com fluxo de 1.0 mL min-1 e deteção em 330 nm. Utilizando estas condições, as concentrações do RA foram 50% maiores quando comparadas com extração na ausência de antioxidante (recuperação de 98,94 ± 1,07%). Auto-oxidação do RA durante a preparação da amostra foi evitada pelo uso de antioxidante levando a resultados analíticos mais confiáveis. O método foi então aplicado na análise de amostras comerciais de sálvia.


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