Tumores malignos são a causa de milhões de falecimentos no mundo todos os anos, porém a detecção da doença em seu estágio inicial pode salvar vidas. Biomarcadores tumorais permitem diagnósticos mais precoces e menos invasivos, portanto são vitais no tratamento do câncer. Os nucleosídeos têm sido pesquisados como um grupo potencial de biomarcadores tumorais presentes em fluidos biológicos. Neste trabalho, um método para a análise de nucleosídeos por eletroforese capilar com detecção UV (CE-UV) em amostras de soro sanguíneo foi desenvolvido e validado de acordo com a legislação vigente no Brasil. A separação de dez nucleosídeos mais o padrão interno foi atingida em ca. 25 min. O método pode contribuir para o diagnóstico precoce e preciso de casos de câncer.