Variantes no gene da interleucina 8 e a resposta a broncodilatadores inalatórios na fibrose cística<sup>,</sup>

Furlan, Larissa Lazzarini; Ribeiro, José Dirceu; Bertuzzo, Carmen Sílvia; Salomão, João Batista; Souza, Dorotéia Rossi Silva; Marson, Fernando Augusto Lima

doi:10.1016/j.jped.2017.03.005

Larissa Lazzarini Furlan

Faculdade de Medicina de São José do Rio Preto, São José do Rio Preto, SP, Brasil

José Dirceu Ribeiro

Universidade Estadual de Campinas (Unicamp), Faculdade de Ciências Médicas, Departamento de Pediatria, Campinas, SP, Brasil

Carmen Sílvia Bertuzzo

Universidade Estadual de Campinas (Unicamp), Faculdade de Ciências Médicas, Departamento de Genética Médica, Campinas, SP, Brasil

João Batista Salomão Junior

Faculdade de Medicina de São José do Rio Preto, Hospital Universitário, Departamento de Pediatria, São José do Rio Preto, SP, Brasil

Faculdade de Medicina de São José do Rio Preto, Hospital Universitário, Departamento de Pneumologia Pediátrica, São José do Rio Preto, SP, Brasil

Dorotéia Rossi Silva Souza

Faculdade de Medicina de São José do Rio Preto, Centro de Pesquisa de Bioquímica e Biologia Molecular, Departamento de Biologia Molecular, São José do Rio Preto, SP, Brasil

Fernando Augusto Lima Marson ^** Autor para correspondência. E-mail:fernandolimamarson@hotmail.com (F.A. Marson).

Universidade Estadual de Campinas (Unicamp), Faculdade de Ciências Médicas, Departamento de Pediatria, Campinas, SP, Brasil

Universidade Estadual de Campinas (Unicamp), Faculdade de Ciências Médicas, Departamento de Genética Médica, Campinas, SP, Brasil

* Autor para correspondência. E-mail:fernandolimamarson@hotmail.com (F.A. Marson).

Conflitos de interesse

Os autores declaram não haver conflitos de interesse.

Faculdade de Medicina de São José do Rio Preto, São José do Rio Preto, SP, Brasil

Universidade Estadual de Campinas (Unicamp), Faculdade de Ciências Médicas, Departamento de Pediatria, Campinas, SP, Brasil

Universidade Estadual de Campinas (Unicamp), Faculdade de Ciências Médicas, Departamento de Genética Médica, Campinas, SP, Brasil

Faculdade de Medicina de São José do Rio Preto, Hospital Universitário, Departamento de Pediatria, São José do Rio Preto, SP, Brasil

Faculdade de Medicina de São José do Rio Preto, Hospital Universitário, Departamento de Pneumologia Pediátrica, São José do Rio Preto, SP, Brasil

Faculdade de Medicina de São José do Rio Preto, Centro de Pesquisa de Bioquímica e Biologia Molecular, Departamento de Biologia Molecular, São José do Rio Preto, SP, Brasil

Figuras (1)
Tabelas (3)

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Figura 1
Associação das variantes rs4073 e rs2227306 da IL-8 (interleucina-8) à resposta a broncodilatadores inalatórios em pacientes com fibrose cística. A. Associação entre o volume expiratório forçado no 1° segundo (VEF₁) da capacidade vital forçada (CVF) e rs4073, modelo dominante e duas mutações identificadas no gene do RTFC (regulador da condutância transmembrana da fibrose cística) pertencente às classes I, II e/ou III (grupo RTFC-B) (p = 0,028; p^c-0,112). (AA + AT) n = 39; média de 4,77 ± 8,95; mediana de 4 (variação de −9 a 48). (TT) n = 21; média de 0,86 ± 5,42; mediana de −1 (variação de −6 a 15). B. Associação da proporção VEF1/CVF à variante rs4073, modelo superdominante e grupo RTFC-B (p = 0,029; pc = 0,116). (TT) n = 30; média de 0,86 ± 7,36; mediana de 0 (variação de −12 a 23). (AT) n = 29; média de 4,76 ± 7,58; mediana de 4 (variação de −9 a 32). C. Associação do fluxo expiratório forçado de 50% (FEF_50%) da CVF à variante rs4073, modelo dominante e grupo RTFC-B (p = 0,046; p^c = 0,184). (AA + AT) n = 37; média de 17,38 ± 24,18; mediana de 16 (variação de −20 a 89). (TT) n = 21; média de 4,95 ± 20,80; mediana de −2 (variação de −19 a 55). D. Associação do FEF_50% à variante rs2227306, modelo dominante e grupo RTFC-B (p = 0,050; p^c = 0,083). (CC) n = 15; média de 1,47 ± 17,22; mediana de 0 (variação de −20 a 29). (CT + TT) n = 44; média de 15,84 ± 25,04; mediana de 10,50 (variação de −28 a 89). E. Associação do FEF_50% à variante rs2227306, modelo superdominante e grupo RTFC-B (p = 0,033; p^c = 0,083). (CC + TT) n = 33; média de 6,06 ± 20,27; mediana de 4 (variação de −20 a 55). (CT) n = 23; média de 19,96 ± 26,43; mediana de 19 (variação de −28 a 89). F. Associação do fluxo expiratório forçado de 75% (FEF_75%) da CVF à variante rs4073, modelo codominante independentemente das mutações identificadas no gene do RTFC (grupo RTFC-A) (p = 0,044; p^c = 0,058). 1 ≠ 3. (AA) n = 28; média de 29,93 ± 39,98; mediana de 30 (variação de −47 a 142). (AT) n = 42; média de 24,81 ± 53,57; mediana de 14 (variação de −58 a 235). (TT) n = 28; média de 9,14 ± 36,95; mediana de 2,5 (variação de −35 a 119). G. Associação do FEF_75% à variante rs4073, modelo dominante e grupo RTFC-B (p = 0,024; p^c = 0,096). (AA + AT) n = 38; média de 33 ± 55,23; mediana de (variação de −27 a 235). (TT) n = 21; média de 5,43 ± 35,93; mediana de 2 (variação de −35 a 119). H. Associação do FEF_75% à variante rs4073, modelo dominante e grupo RTFC-A (p = 0,034; p^c = 0,058). (AA + AT) (n = 70; média de 26,86 ± 48,34; mediana de 18 (variação de −58 a 235). (TT) n = 28; média de 9,14 ± 36,95; mediana de 2,5 (variação de −35 a 119). I. Associação do FEF_75% à variante rs4073, modelo recessivo e grupo RTFC-A (p = 0,040; p^c = 0,058). (AA) n = 28; média de 29,93 ± 39,98; mediana de 30 (variação de −47 a 142). (AT + TT) n = 70; média de 18,54 ± 47,95; mediana de 10 (variação de −58 a 235). J. Associação do FEF entre 25 e 75% (FEF_25-75%) da CVF à variante rs4073, modelo codominante e grupo RTFC-B (p = 0,012; p^c = 0,024). TT ≠ AA e AT. (AA) n = 9; média de 25,78 ± 23,14; mediana de 30 (variação de −21 a 57). (AT) n = 29; média de 18,38 ± 29,04; mediana de 14 (variação de −33 a 117). (TT) n = 21; média de 2,14 ± 23,74; mediana de 0 (variação de −51 a 65). K. Associação do FEF_25-75% à variante rs4073, modelo dominante e grupo RTFC-B (p = 0,007; p^c = 0,024). (AA + ATT) n = 38; média de 20,13 ± 27,64; mediana de 18,50 (variação de −33 a 117). (TT) n = 23; média de 2,14 ± 23,74; mediana de 0 (variação de −51 a 65). L. Associação do FEF_25-75% à variante rs4073, modelo dominante e grupo RTFC-A (p = 0,029; p^c = 0,100). (AA + AT) n = 82; média de 15,48 ± 27,20; mediana de 15 (variação de −40 a 117). (TT) n = 33; média de 5,94 ± 27,33; mediana de 0 (variação de −51 a 76). M. Associação do FEF_25-75% à variante rs4073, modelo recessivo e grupo RTFC-B (p = 0,047; p^c = 0,063). (AA) n = 9; média de 25,78 ± 23,14; mediana de 30 (variação de −21 a 57). (AT + TT) n = 50; média de 11,56 ± 27,89; mediana de 8 (variação de −51 a 117). O ponto corresponde aos valores medianos e a barra corresponde a intervalo de confiança de 95%.

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Tabela 1
Distribuição dos pacientes com fibrose cística para genótipo do RTFC e classes de mutações identificadas.^a a Todos os pacientes avaliados neste estudo foram incluídos (grupo RTFC-A).

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Tabela 2
Análise descritiva dos marcadores clínicos e laboratoriais de pacientes com fibrose cística

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Tabela 3
Distribuição de genótipos, alelos e haplótipo das variantes do gene da IL-8 (rs4073, rs2227306 e rs2227307) em pacientes com fibrose cística

Figura 1 Associação das variantes rs4073 e rs2227306 da IL-8 (interleucina-8) à resposta a broncodilatadores inalatórios em pacientes com fibrose cística. A. Associação entre o volume expiratório forçado no 1° segundo (VEF₁) da capacidade vital forçada (CVF) e rs4073, modelo dominante e duas mutações identificadas no gene do RTFC (regulador da condutância transmembrana da fibrose cística) pertencente às classes I, II e/ou III (grupo RTFC-B) (p = 0,028; p^c-0,112). (AA + AT) n = 39; média de 4,77 ± 8,95; mediana de 4 (variação de −9 a 48). (TT) n = 21; média de 0,86 ± 5,42; mediana de −1 (variação de −6 a 15). B. Associação da proporção VEF1/CVF à variante rs4073, modelo superdominante e grupo RTFC-B (p = 0,029; pc = 0,116). (TT) n = 30; média de 0,86 ± 7,36; mediana de 0 (variação de −12 a 23). (AT) n = 29; média de 4,76 ± 7,58; mediana de 4 (variação de −9 a 32). C. Associação do fluxo expiratório forçado de 50% (FEF_50%) da CVF à variante rs4073, modelo dominante e grupo RTFC-B (p = 0,046; p^c = 0,184). (AA + AT) n = 37; média de 17,38 ± 24,18; mediana de 16 (variação de −20 a 89). (TT) n = 21; média de 4,95 ± 20,80; mediana de −2 (variação de −19 a 55). D. Associação do FEF_50% à variante rs2227306, modelo dominante e grupo RTFC-B (p = 0,050; p^c = 0,083). (CC) n = 15; média de 1,47 ± 17,22; mediana de 0 (variação de −20 a 29). (CT + TT) n = 44; média de 15,84 ± 25,04; mediana de 10,50 (variação de −28 a 89). E. Associação do FEF_50% à variante rs2227306, modelo superdominante e grupo RTFC-B (p = 0,033; p^c = 0,083). (CC + TT) n = 33; média de 6,06 ± 20,27; mediana de 4 (variação de −20 a 55). (CT) n = 23; média de 19,96 ± 26,43; mediana de 19 (variação de −28 a 89). F. Associação do fluxo expiratório forçado de 75% (FEF_75%) da CVF à variante rs4073, modelo codominante independentemente das mutações identificadas no gene do RTFC (grupo RTFC-A) (p = 0,044; p^c = 0,058). 1 ≠ 3. (AA) n = 28; média de 29,93 ± 39,98; mediana de 30 (variação de −47 a 142). (AT) n = 42; média de 24,81 ± 53,57; mediana de 14 (variação de −58 a 235). (TT) n = 28; média de 9,14 ± 36,95; mediana de 2,5 (variação de −35 a 119). G. Associação do FEF_75% à variante rs4073, modelo dominante e grupo RTFC-B (p = 0,024; p^c = 0,096). (AA + AT) n = 38; média de 33 ± 55,23; mediana de (variação de −27 a 235). (TT) n = 21; média de 5,43 ± 35,93; mediana de 2 (variação de −35 a 119). H. Associação do FEF_75% à variante rs4073, modelo dominante e grupo RTFC-A (p = 0,034; p^c = 0,058). (AA + AT) (n = 70; média de 26,86 ± 48,34; mediana de 18 (variação de −58 a 235). (TT) n = 28; média de 9,14 ± 36,95; mediana de 2,5 (variação de −35 a 119). I. Associação do FEF_75% à variante rs4073, modelo recessivo e grupo RTFC-A (p = 0,040; p^c = 0,058). (AA) n = 28; média de 29,93 ± 39,98; mediana de 30 (variação de −47 a 142). (AT + TT) n = 70; média de 18,54 ± 47,95; mediana de 10 (variação de −58 a 235). J. Associação do FEF entre 25 e 75% (FEF_25-75%) da CVF à variante rs4073, modelo codominante e grupo RTFC-B (p = 0,012; p^c = 0,024). TT ≠ AA e AT. (AA) n = 9; média de 25,78 ± 23,14; mediana de 30 (variação de −21 a 57). (AT) n = 29; média de 18,38 ± 29,04; mediana de 14 (variação de −33 a 117). (TT) n = 21; média de 2,14 ± 23,74; mediana de 0 (variação de −51 a 65). K. Associação do FEF_25-75% à variante rs4073, modelo dominante e grupo RTFC-B (p = 0,007; p^c = 0,024). (AA + ATT) n = 38; média de 20,13 ± 27,64; mediana de 18,50 (variação de −33 a 117). (TT) n = 23; média de 2,14 ± 23,74; mediana de 0 (variação de −51 a 65). L. Associação do FEF_25-75% à variante rs4073, modelo dominante e grupo RTFC-A (p = 0,029; p^c = 0,100). (AA + AT) n = 82; média de 15,48 ± 27,20; mediana de 15 (variação de −40 a 117). (TT) n = 33; média de 5,94 ± 27,33; mediana de 0 (variação de −51 a 76). M. Associação do FEF_25-75% à variante rs4073, modelo recessivo e grupo RTFC-B (p = 0,047; p^c = 0,063). (AA) n = 9; média de 25,78 ± 23,14; mediana de 30 (variação de −21 a 57). (AT + TT) n = 50; média de 11,56 ± 27,89; mediana de 8 (variação de −51 a 117). O ponto corresponde aos valores medianos e a barra corresponde a intervalo de confiança de 95%.

Genótipo	N	%	Grupo de pacientes
- /-	55	29,6	Pacientes sem mutação no gene do RTFC ou com uma ou duas mutações pertences às classes IV, V ou VI
V562I/-	1	0,5
I507V/-	1	0,5
D110H/V232H	1	0,5
G576A/R668 C	1	0,5
p.Glu528G > A/TG11-5 T	1	0,5

F508del/-	23	12,4	Pacientes com uma mutação do RTFC pertencentes às classes I, II ou III e uma mutação não identificada ou pertencentes às classes IV, V ou VI
G542X/-	4	2,2
F508del/3272-26A > G	1	0,5
F508del/P205S	1	0,5
G542X/P205S	1	0,5
G542X/R334 W	1	0,5
3120 + 1G > A/L206 W	1	0,5
622-2A > G/711 + 1G > T	1	0,5
R1162X/-	1	0,5
G542X/I618 T	1	0,5

F508del/F508del	49	26,3	Pacientes com duas mutações do RTFC pertencentes às classes I, II e/ou III - Mutações G2 (grupo CFTR-B)
F508del/G542X	12	6,5
F508del/N1303 K	5	2,7
F508del/R1162X	3	1,6
F508del/R553X	3	1,6
F508del/1584-18672pbA > G	1	0,5
F508del/c.1717-1G > A	2	1
3120 + 1G > A/R1066 C	1	0,5
F508del/2183AA > G	1	0,5
F508del/2184insA	1	0,5
Duplicação do éxon F508del/6B a 16	1	0,5
F508del/G85E	1	0,5
F508del/S549R (T > G)	1	0,5
F508del/S4X	1	0,5
G542X/2183AA > G	1	0,5
G542X/R1162X	1	0,5
A561E/A561E	1	0,5
F508del/R1066 C	1	0,5
R1070Q; S466X/G542X	1	0,5
F508del/1812-1G > A	2	1
2183AA > G/2183AA > G	1	0,5
3120 + 1G > A/3120 + 1G > A	1	0,5

Variáveis	Distribuição^a a Os dados com distribuição categórica são apresentados da seguinte forma: n° de variáveis/n° total (percentual); os dados com distribuição numérica são apresentados da seguinte forma: tamanho da amostra; média ± desvio padrão; mediana (mínimo a máximo).
Sexo (masculino)	92/186 (49,5%)
Etnia (branca)	169/180 (93,9%)
Idade (meses)	169; 201,41 ± 171,98; 143 (7 a 932)
Início dos sintomas (meses)	159; 38,23 ± 114,03; 3 (0 a 720)
Diagnóstico (meses)	171; 87,90 ± 158,39; 20 (0 a 833)
Início dos sintomas digestivos (meses)	140; 41,2 ± 112,61; 3 (0 a 720)
Início dos sintomas pulmonares (meses)	156; 46,33 ± 123,64; 6 (0 a 720)
Índice de massa corporal	178; 17,28 ± 4,08; 16,28 (6,5 a 35,67)
Polipose nasal (presença)	28/162 (17,3%)
Diabetes mellitus (presença)	32/164 (19,5%)
Osteoporose (presença)	25/162 (15,4%)
Insuficiência pancreática (presença)	130/162 (80,2%)
Íleo meconial (presença)	23/162 (14,2%)
1ª Pseudomonas aeruginosa	121; 103,03 ± 171,74; 31 (0 a 872)^b b Os valores ausentes para primeira P. aeruginosa correspondem a pacientes com fibrose cística que nunca apresentaram cultura positiva para P. aeruginosa.
P. aeruginosa mucoide (presença)	74/173 (42,8%)^c c Um paciente com fibrose cística apresentou cultura positiva para P. aeruginosa, com valores negativos para IgG específico do antígeno P. aeruginosa e o paciente foi excluído para estimativa de frequência.
P. aeruginosa não mucoide (presença)	99/173 (57,2%)^c c Um paciente com fibrose cística apresentou cultura positiva para P. aeruginosa, com valores negativos para IgG específico do antígeno P. aeruginosa e o paciente foi excluído para estimativa de frequência.
Achromobacter xylosoxidans (presença)	17/174 (9,8%)
Burkolderia cepacia (presença)	25/174 (14,4%)
Staphylococcus aureus (presença)	131/174 (75,3%)
SaO ₂	159; 94,87 ± 4,28; 96 (66 a 99)
Escore de Bhalla	113; 8,9 ± 5,77; 8 (0 a 25)
Escore de Kanga	118; 18,78 ± 5,82; 17,5 (10 a 40)
Escore de Shwachman-Kulczycki	143; 65,97 ± 16,78; 65 (20 a 95)
CVF	142; 72,13 ± 23,86; 77 (19 a 126)
FEV ₁	141; 60,99 ± 25,75; 63 (17 a 116)
VEF ₁ /CVF	144; 79,08 ± 14,99; 81 (39 a 113)
FEF _25%	119; 61,28 ± 31,71; 60 (7 a 138)
FEF _50%	119; 46,2 ± 31,25; 40 (3 a 126)
FEF _75%	116; 36,32 ± 28,77; 27,5 (4 a 142)
FEF _25-75%	140; 47,16 ± 32,51; 39 (5 a 150)
FEF _Max	114; 75,54 ± 25,59; 73,5 (25 a 137)
VRE	112; 80,96 ± 52,39; 69 (3 a 248)

Resposta a broncodilatador inalatório
CVF	117; 1,74 ± 8,19; 1 (-17 a 32)
FEV₁	117; 3,51 ± 8,0; 3 (-12 a 48)
VEF₁/CVF	111; 2,14 ± 7,43; 2 (-19 a 32)
FEF_25%	99; 9,99 ± 24,41; 5 (-45 a 110)
FEF_50%	99; 13,08 ± 26,06; 9 (-41 a 114)
FEF_75%	99; 20,93 ± 46,47; 16 (-64 a 235)
FEF_25-75%	99; 12,28 ± 27,77; 9,5 (-51 a 117)
FEF_Max	116; 2,63 ± 14,48; 3 (-42 a 69)
VRE	100; 23,04 ± 101,08; 0 (-90 a 670)

Variantes	Genótipo	Número (%)	Alelo	Número (fa)	χ²	Valor de p^a a χ2 e valores de p fazem referência ao cálculo de equilíbrio de Hardy-Weinberg. Os dados significativos são mostrados em negrito. Houve uma fraca correlação entre as variantes do gene da IL-8 nos pacientes com fibrose cística inscritos no estudo. Não há desequilíbrio de ligação.
rs4073	AA	54 (29,2)	A	187 (0,51)	3,94	< 0,05
	AT	79 (42,7)	T	183 (0,49)
	TT	52 (28,1)	Total	370
	Total	185

rs2227306	CC	70 (38)	C	211 (0,57)	8,21	< 0,05
	CT	71 (38,6)	T	157 (0,43)
	TT	43 (23,4)	Total	368
	Total	184

rs2227307	GG	31 (17,4)	G	139 (0,39)	1,48	> 0,05
	TG	77 (43,3)	T	217 (0,61)
	TT	70 (39,3)	Total	356
	Total	178
rs4073/rs2227306/rs2227307			Frequência		Percentual (%)
AA CC GG			3		1,7
AA CC GT			5		2,8
AA CC TT			24		13,6
AA CT GG			3		1,7
AA CT GT			4		2,3
AA CT TT			7		4,0
AA TT GG			2		1,1
AA TT GT			2		1,1
AA TT TT			3		1,7
AT CC GT			13		7,3
AT CC TT			7		4,0
AT CT GT			30		16,9
AT CT TT			10		5,6
AT TT GG			5		2,8
AT TT GT			6		3,4
AT TT TT			3		1,7
TT CC GG			2		1,1
TT CC GT			5		2,8
TT CC TT			8		4,5
TT CT GG			4		2,3
TT CT GT			6		3,4
TT CT TT			3		1,7
TT TT GG			12		6,8
TT TT GT			5		2,8
TT TT TT			5		2,8
Total			177		100

[1] * Autor para correspondência. E-mail:fernandolimamarson@hotmail.com (F.A. Marson).

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Resumo

Objetivo:

Métodos:

Resultados:

Conclusões: