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Use of 2,3,5-triphenyl tetrazolium chloride for detection of Fusarium semitectum viability in soybean seeds

RESUMO:

Técnicas colorimétricas, como sais de tetrazólio e resazurina, são indicadores de viabilidade (atividade respiratória) de fungos, bactérias e sementes, amplamente utilizados em diferentes áreas de pesquisa. O objetivo deste estudo foi desenvolver um protocolo com dois métodos, qualitativo e quantitativo, de triagem para detecção da viabilidade de Fusarium semitectum em sementes de soja, utilizando 2,3,5-trifenil cloreto de tetrazólio (TZ). O delineamento experimental utilizado foi inteiramente casualizado (DIC) em arranjo fatorial triplo (tempos de incubação, concentrações de TZ e diluições seriadas de inóculo) com níveis de 3, 5 e 5 de cada fator, respectivamente, com 3 repetições em ambos os métodos. Para o método qualitativo, a sensibilidade foi mais satisfatória no tempo de 72h, na concentração mínima de TZ de 0,1 mg mL-1 e com a concentração de inóculo 10⁻¹. No método quantitativo (espectrofotometria) não foi possível quantificar as Unidades Formadoras de Colônias (UFC) em placas, sendo a Densidade Óptica (DO) interferida pela estrutura do micélio no microtubo, embora seja uma metodologia reprodutível está condicionada pela morfologia do fungo. O presente estudo permitiu fácil visualização das estruturas de F. semitectum em sementes de soja, a partir do TZ, porém não foi possível quantificar a densidade de inóculo devido a baixa produção de esporos precisando de maiores ajustes na metodologia.

Termos para indexação:
Técnicas colorimétricas; fitopatogênicos; TZ; viabilidade

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