Efeitos neurotóxicos de levobupivacaína e fentanil sobre a medula espinhal de ratos

Resumos

JUSTIFICATIVA:

O objetivo deste estudo foi comparar os efeitos neurotóxicos da administração por via intratecal de levobupivacaína e fentanil e suas misturas sobre a medula espinhal de ratos.

MÉTODOS:

O experimento compreendeu quatro grupos que receberam medicamento e um grupo controle. Os ratos foram submetidos a injeção de salina (15 µL) ou fentanil (0,0005 µg/15 mL), levobupivacaína a 0,25% (15 µL) e fentanil (0,0005 µg + levobupivacaína a 0,25%/15 µL) por via intratecal durante quatro dias. O teste de placa quente foi usado para avaliar a função neurológica após cada injeção nos minutos cinco, 30 e 60. Cinco dias após a última injeção lombar, secções da medula espinhal entre os níveis vertebrais T5 e T6 foram obtidas para análise histológica. Usamos um escore com base na avaliação subjetiva do número de neurônios eosinofílicos (neurônios vermelhos), o que significa degeneração neuronal irreversível. Esses neurônios refletem o número aproximado de neurônios em degeneração presentes nas áreas neuroanatômicas afetadas da seguinte forma: 1 = nenhum; 2 = 1-20%; 3 = 21-40%; 4 = 41-60% e 5 = 61-100% neurônios mortos. Um escore neuropatológico global foi calculado para cada rato pela soma dos escores patológicos para todas as áreas examinadas da medula espinhal.

RESULTADOS:

Nos resultados do TPQ, comparando o grupo controle, a latência analgésica foi estatisticamente prolongada para todos os quatro grupos.Em investimento neuropatológico, os grupos fentanil e fentanil + levobupivacaína apresentaram degeneração neuronal em contagens significativamente mais altas di que os grupos controle e salina.

CONCLUSÕES:

Esses resultados sugerem que fentanil e levobupivacaína, quando administrados por via intratecal em ratos, se comportam de forma semelhante à ação analgésica, mas fentanil pode ser neurotóxico para a medula espinhal. Não houve degeneração significativa com levobupivacaína, mas o grupo fentanil apresentou degeneração significativa.

Levobupivacaína; Neurotoxicidade; Fentanil

BACKGROUND:

The purpose of the study was to compare the neurotoxic effects of intrathecally administered levobupivacaine, fentanyl and their mixture on rat spinal cord.

METHODS:

In experiment, there were four groups with medication and a control group. Rats were injected 15 µL saline or fentanyl 0.0005 µg/15 µL, levobupivacaine 0.25%/15 µL and fentanyl 0.0005 µg + levobupivacaine 0.25%/15 µL intrathecally for four days. Hot plate test was performed to assess neurologic function after each injection at 5th, 30th and 60th min. Five days after last lumbal injection, spinal cord sections between the T5 and T6 vertebral levels were obtained for histologic analysis. A score based on subjective assessment of number of eosinophilic neurons - Red neuron - which means irreversible neuronal degeneration. They reflect the approximate number of degenerating neurons present in the affected neuroanatomic areas as follows: 1, none; 2, 1-20%; 3, 21-40%; 4, 41-60%; and 5, 61-100% dead neurons. An overall neuropathologic score was calculated for each rat by summating the pathologic scores for all spinal cord areas examined.

RESULTS:

In the results of HPT, comparing the control group, analgesic latency statistically prolonged for all four groups.In neuropathologic investment, the fentanyl and fentanyl + levobupivacaine groups have statistically significant high degenerative neuron counts than control and saline groups.

CONCLUSIONS:

These results suggest that, when administered intrathecally in rats, fentanyl and levobupivacaine behave similar for analgesic action, but fentanyl may be neurotoxic for spinal cord. There was no significant degeneration with levobupivacaine, but fentanyl group has had significant degeneration.

Levobupivacaine; Neurotoxicity; Fentanyl

JUSTIFICACIÓN:

El objetivo de este estudio fue comparar los efectos neurotóxicos de la administración por vía intratecal de la levobupivacaína y el fentanilo y su mezcla sobre la médula espinal de ratones.

MÉTODOS:

El experimento abarcó 4 grupos que recibieron medicamento y un grupo control. Los ratones recibieron inyección de solución salina (15 µL) o fentanilo (0,0005 µg/15µL), levobupivacaína al 0,25% (15 µL) y fentanilo (0,0005 µg + levobupivacaína al 0,25%/15 µL) por vía intratecal durante 4 días. Se empleó el test de placa caliente para evaluar la función neurológica tras cada inyección en los minutos 5, 30 y 60. Cinco días después de la última inyección lumbar, se obtuvieron las secciones de la médula espinal entre los niveles vertebrales T5 y T6 para el análisis histológico. Usamos una puntuación basándonos en la evaluación subjetiva del número de neuronas eosinofílicas (neuronas rojas), lo que significa degeneración neuronal irreversible. Esas neuronas reflejan el número aproximado de neuronas en degeneración presentes en las áreas neuroanatómicas afectadas de la siguiente forma: 1 = ninguna; 2 = 1-20%; 3 = 21-40%; 4 = 41-60% y 5 = 61-100% neuronas muertas. Para cada ratón se calculó una puntuación neuropatológica global a través de la suma de las puntuaciones patológicas de todas las áreas examinadas de la médula espinal.

RESULTADOS:

En los resultados del test de placa caliente, comparando el grupo control, la latencia analgésica fue estadísticamente prolongada para los 4 grupos.En la inversión neuropatológica, los grupos fentanilo y fentanilo + levobupivacaína tuvieron una degeneración neuronal en recuentos significativamente más altos que los grupos control y salina.

CONCLUSIONES:

Esos resultados nos sugieren que el fentanilo y la levobupivacaína, cuando se administran por vía intratecal en ratones, se comportan de forma similar a la acción analgésica, pero el fentanilo puede ser neurotóxico para la médula espinal. No hubo degeneración significativa con la levobupivacaína, pero el grupo fentanilo presentó degeneración significativa.

Levobupivacaína; Neurotoxicidad; Fentanilo

Introdução

O aumento de evidências laboratoriais^{1 , 2 , 3 , 4 and 5} sugere que todos os anestésicos locais são potencialmente neurotóxicos e que o dano neurológico após o bloqueio neuraxial pode resultar do efeito direto de medicamentos neurotóxicos. Atualmente, a bupivacaína comercialmente disponível é uma mistura racêmica de enantiômeros S (-) e R +. O seu enantiômero isolado, S (-) levobupivacaína, tem potencial inferior para produzir toxicidade no sistema nervoso central e cardiovascular do que o R + bupivacaína em animais e seres humanos.^{6 , 7 and 8} Em abordagem clínica, o principal objetivo da administração de opiáceos por via espinhal é reduzir a dose do anestésico local para maximizar a eficácia e minimizar os efeitos colaterais dos medicamentos que atuam no sistema nervoso central. Os opiáceos lipofílicos, como fentanil, são comumente administrados por via espinhal em adultos. Há poucos relatos que abordam especificamente a histologia, fisiologia ou evidência clínica de neurotoxicidade com a administração de fentanil por via espinhal.^{9 and 10}

No presente estudo, investigamos se repetidas injeções em bolus intratecal de fentanil, levobupivacaína e de sua combinação podem ser neurotóxicas para a medula espinhal em modelo de rato.

Métodos

O protocolo foi aprovado pelo Comitê de Ética em Pesquisa e Uso de Animais da Universidade de Istambul (Número: 26; 25/02/2010). Todos os experimentos foram feitos no Departamento de Neurociências do Instituto de Medicina Experimental, Universidade de Istambul (Detae). O experimento foi conduzido em ratos albinos Wistar, 6-8 meses de idade, com peso de 240-320 g. Os animais foram alocados em cinco grupos de oito cada. O grupo controle não recebeu medicamento. Após o posicionamento em decúbito ventral e a raspagem dos pelos, sob condições assépticas e sem anestésicos, os seguintes medicamentos foram injetados por via intratecal, uma vez por dia e no mesmo horário, durante quatro dias, no espaço intervertebral L4-5: solução isotônica (grupo salina), 50 µg.mL^-1 de fentanil (grupo fentanil), 2,5 mg.mL^-1 levobupivacaína (grupo levobupivacaína) ou 50 µg.mL^-1 de fentanil + 2,5 mg.mL^-1 de levobupivacaína (grupo fentanil + levobupivacaína). As soluções foram preparadas com citrato de fentanil (sem aditivo) (Fentanyl-Janssen, Janssen - Cilag, Bélgica) e cloridrato de bupivacaína (Chirocaine-Sigma Chemical, Steinheim, Alemanha). As soluções foram diluídas com solução salina estéril (Serum Physiologique 0,9%-Galen Deva-Kocaeli, Turquia) (tabela 1). Todas as soluções foram preparadas e injetadas a temperatura ambiente (20-24 °C). Como a implantação crônica de cateter intratecal pode induzir danos ao tecido,^{11 and 12} preferimos a técnica de injeção intratecal em vez de cateter intratecal. A função neurológica foi observada e os testes de placa quente (TPQ) mensurados nos minutos cinco, 30 e 60, durante quatro dias seguidos depois de cada administração do medicamento. A resposta ao TPQ foi avaliada com a colocação dos ratos sobre uma placa metálica mantida a 45 °C. A latência entre a colocação do animal sobre a placa e a resposta comportamental foi registrada. A resposta de lamber as patas traseiras foi observada na maioria dos animais; no restante, o tempo de corte em que o animal responde ao tentar pular foi de 15 s. Os testes comportamentais foram feitos por um neurocientista, cegado para a designação dos grupos. A função motora dos membros posteriores foi avaliada bilateralmente e se classificou o bloqueio motor como: 0, nenhum; 1, parcialmente bloqueado e 2, completamente bloqueado.¹³ O bloqueio motor foi classificado como nenhum quando o rato não apresentou fraqueza muscular visível das patas e a marcha era normal; parcialmente bloqueado quando os membros se moviam, mas não sustentavam o animal; completamente bloqueado quando os membros estavam flácidos, sem resistência detectável à extensão dos mesmos. Os animais foram examinados 30 minutos antes e após cada injeção. Os animais com problema de movimento da cauda ou disfunção motora dos membros posteriores não foram usados nos experimentos. O seguinte parâmetro foi mensurado e registrado durante um período de duas horas: bloqueio sensorial, determinado pela resposta ao teste da pinça hemostática. Após cada injeção, os ratos foram mantidos em regime de 12 horas claro/escuro e alojados com livre acesso a comida e água.

Tabela 1
Densidade do LCR, salina isotônica, levobupivacaína e fentanil a 37° C

	37° C
LCR	1,000646 ± 0,000086
Salina	0,99951 ± 0,00001
Levobupivacaína – 2,5 mg/mL	0,99985 ± 0,00002
Fentanil	0,99333 ± 0,00002

Avaliação histológica

Após o último exame funcional, os ratos foram sacrificados com doses elevadas de pentobarbital (100 mg.kg), administradas por via intraperitoneal. A medula espinhal foi excisada por um neurocirurgião, cegado para a alocação dos grupos e para os resultados das mensurações comportamentais. Para descobrir a dispersão cranial dos anestésicos locais, as secções da medula espinhal obtidas a partir de T5-6 foram usadas para a avaliação qualitativa. A medula espinhal foi fixada em formalina tamponada neutra a 10% durante sete dias. Os tecidos foram expostos a formalina, álcool, xilol e parafina com o uso de máquina (Thermo Shandon Exelsior ES) e embebidos em parafina com o uso de técnicas de rotina. A medula foi cortada em lâminas de 2 µm com a ajuda de um micrótomo tipo rotary (Thermo Shandon Finesse 325). Os tecidos foram corados com hematoxilina e eosina e avaliados por microscopia de luz (Olympus CX31) por um patologista, cegado para a designação dos grupos e para os resultados das mensurações comportamentais. A primeira alteração neuropatológica observada nos ratos foi a degeneração aguda de neurônio eosinofílico.¹⁴ Os graus das alterações neuropatológicas dentro de uma determinada região anatômica foram pontuados com base na avaliação subjetiva do número e distribuição dos neurônios eosinofílicos (neurônio vermelho), o que significa degeneração neuronal irreversível. Eles refletem o número aproximado de neurônios em degeneração presentes nas áreas neuroanatômicas afetadas da seguinte forma: 1, nenhum; 2, 1-20%; 3, 21-40%; 4, 41-60%; 5, 61-100% neurônios mortos. Um escore neuropatológico global foi calculado para cada rato, com a soma das pontuações patológicas para todas as medulas espinhais, 10 áreas examinadas para cada preparação.

Análise estatística

Os resultados do TPQ foram avaliados com o uso da análise de variância simples (Anova), seguido pelo teste pós-hoc de Dunnett para comparar todos os grupos com o grupo controle.

Para o exame de tolerância, os valores de latência do TPQ do segundo, terceiro e quarto dias foram comparados com os resultados do primeiro dia de cada grupo e o teste Anova seguido pelo teste de Dunnet foram feitos. A função motora não foi avaliada porque todos os animais apresentavam nível zero da função motora. O grau de alteração neuropatológica da medula espinhal foi avaliado com o teste de Kruskal-Wallis e o teste U de Mann-Whitney. Um valor p < 0,05 em Anova foi considerado significativo.

Resultados

Todos os ratos completaram o experimento e foram incluídos na análise de dados. Todos os animais se recuperaram totalmente, estavam acordados e ativamente móveis, comendo e bebendo normalmente 30 minutos após a injeção. Durante o experimento, o bloqueio motor não foi observado em nenhum dos ratos. Nenhum animal apresentou lesões visíveis ou sangramento da medula espinal quando a medula foi excisada no fim do experimento.

As latências no TPQ foram prolongadas para todos os grupos em comparação com o grupo controle sem bloqueio motor.

Os resultados da latência no TPQ no primeiro, segundo, terceiro e quarto dias nos minutos cinco, 30 e 60 podem ser vistos na tabela 2. No quinto minuto, as latências no TPQ foram significativamente prolongadas nos grupos salina (p < 0,02), fentanil e fentanil + levobupivacaína (p < 0,05), em comparação com o grupo controle. No 30° minuto, as latências no TPQ aumentaram de forma estatisticamente significativa nos grupos salina (p < 0,02), fentanil (p < 0,01) e fentanil + levobupivacaína (p < 0,02), em comparação com o grupo controle. Verificou-se que os valores do TPQ para os grupos levobupivacaína (p < 0,01) e fentanil + levobupivacaína (p < 0,02) foram significativamente diferentes dos valores do grupo controle no 60° minuto.

Tabela 2
Efeitos do tratamento farmacológico repetido no desenvolvimento da tolerância

Grupo	n	Latência em placa aquecida
		Dia 1			Dia 2
		5 min	30 min	60 min	5 min	30 min	60 min
Controle	8	1,3 ± 0,3	1,3 ± 0,2	1,3 ± 0,2	1,1 ± 0,1	1,3 ± 0,2	1,4 ± 0,3
Salina	8	5,3 ± 1,3	3,9 ± 0,3	2,9 ± 0,6	3,9 ± 0,7	2,1 ± 0,3a	2,3 ± 0,3
Fentanil	8	4,9 ± 0,.7	4,4 ± 0,9	1,8 ± 0,3	3,1 ± 0,6b	2,5 ± 0,5	2,1 ± 0,4
Levobupivacaína	8	3,9 ± 1,0	3,3 ± 0,5	3,5 ± 0,8	2,8 ± 0,5	2,4 ± 0,5	2,4 ± 0,5
Fentanil+levobupivacaína	8	4.9 ± 1,1	3,8 ± 0,7	3,4 ± 0,4	2,9 ± 0,3	3,1 ± 0,9	3,4 ± 0,5
		Dia 3			Dia 4
		5 min	30 min	60 min	5 min	30 min	60 min
Controle	8	1,3 ± 0,1	1,4 ± 0,1	1,3 ± 0,2	1,3 ± 0,2	1,3 ± 0,2	1,4 ± 0,2
Salina	8	2,7 ± 0,6	2,1 ± 0,1a	2,6 ± 0,2	3,1 ± 0,6	3,6 ± 0,3	2,8 ± 0,4
Fentanil	8	2,5 ± 0,2c	2,5 ± 0,4	3,5 ± 0,6d	2,6 ± 0,3c	3,0 ± 0,5	3,6 ± 0,5e
Levobupivacaína	8	2,8 ± 0,6	3,0 ± 1,0	3,4 ± 0,6	3,3 ± 1,2	3,3 ± 0,9	3,6 ± 0.7
Fentanil+levobupivacaína	8	1,8 ± 0,3b	3,0 ± 0,5	3,8 ± 0,8	3,8 ± 0,8	2,9 ± 0,4	3,4 ± 0,4

• n, número de animais.Valores expressos como média ± DP.
• ^a
  p < 0,001 comparado ao Dia 1, valor no minuto 30.
• ^b
  p < 0,02 comparado ao Dia 1, valor no minuto 5.
• ^c p < 0,01 comparado ao Dia 1, valor no minuto 5.
• ^d p < 0,05 comparado ao Dia 1, valor no minuto 60.
• ^e
  p < 0,02 comparado ao Dia 1, valor no minuto 60.

O resultado da latência no TPQ nos minutos cinco, 30 e 60 do segundo dia foi prolongado em todos os grupos, em comparação com o grupo controle. Esse prolongamento foi considerado significativo nos grupos salina (p < 0,01), fentanil e fentanil + levobupivacaína (p < 0,05) no quinto minuto. No 30° minuto, não houve diferença estatisticamente significativa em latências prolongadas. O incremento dos valores no TPQ do grupo fentanil + levobupivacaína no 60° minuto foi significativamente diferente daquele do grupo controle no segundo dia (p < 0,1).

No grupo levobupivacaína, o resultado da latência no TPQ no terceiro dia, nos minutos cinco, 30 e 60, foi significativamente prolongado no quinto minuto, em comparação com o grupo controle (p < 0,05). Houve um aumento significativo nos grupos fentanil (p < 0,05), levobupivacaína (p < 0,05) e fentanil + levobupivacaína (p < 0,02) no 60° minuto.

O resultado da latência no TPQ no quarto dia, nos minutos cinco, 30 e 60, não apresentou alteração significativa nos valores do quinto minuto do TPQ no quarto dia. Houve aumento estatisticamente significativo dos valores no 30° minuto nos grupos salina (p < 0,02) e levobupivacaína (p < 0,05), em comparação com o grupo controle. As latências no TPQ dos grupos fentanil (p < 0,01), levobupivacaína (p < 0,01) e fentanil + levobupivacaína (p < 0,05) foram significativamente prolongadas no 60° minuto, em comparação com o grupo controle (tabela 2).

A figura 1 mostra que as aplicações repetidas dos medicamentos apresentaram efeitos analgésicos. O grupo controle mostrou que não houve alteração no tempo de resposta analgésica durante quatro dias. No grupo salina, o tempo de resposta analgésica foi estatística e significativamente curto no segundo e terceiro dias no 30° minuto (p < 0,001). No grupo fentanil, o tempo de resposta analgésica foi mais curto no segundo (p < 0,02), terceiro (p < 0,01) e quarto dias (p < 0,01) no quinto minuto e no terceiro (p < 0,05) e quarto dias (p < 0,02) no 60° minuto. No grupo levobupivacaína não houve alteração da resposta analgésica durante quatro dias. No grupo fentanil + levobupivacaína, o tempo de resposta analgésica foi mais curto no quinto minuto do terceiro dia (p < 0,02).

Figura 1
Efeitos das aplicações dos fármacos no primeiro (A), segundo (B), terceiro (C) e quarto (D) dias sobre os resultados da latência no TPQ.Todos os dados são expressos como média ± DP.ap < 0,05, aap < 0,02, aaap < 0,01 de acordo com o valor no quinto minuto para o grupo controle.bp < 0,05, bbp < 0,02, bbbp < 0,01 de acordo com o valor no 30° minuto para o grupo controle.cp < 0,05, ccp < 0,02, cccp < 0,01 de acordo com o valor no 60° minuto para o grupo controle.

A figura 2 mostra as análises neuropatológicas das medulas espinhais de todos os grupos. Na avaliação neuropatológica, o escore degenerativo do neurônio aumentou de forma estatisticamente significativa no grupo fentanil, em comparação com os grupos controle e salina (p < 0,05). O grupo fentanil + levobupivacaína mostrou escores mais altos de degeneração neuronal do que os grupos controle, salina e bupivacaína (p < 0,01).

Figura 2
Efeitos das aplicações repetidas dos fármacos sobre a medula espinhal.Os dados são expressos como média ± DP.*p < 0,05 comparado aos grupos controle e salina.**p < 0,01 comparado aos grupos controle, salina e levobupivacaína.

Discussão

Desde que Bier e Hildebrandt fizeram pela primeira vez uma raquianestesia com cocaína em 1898, a história do uso de anestésico local via espinhal em seres humanos foi acompanhada por aplicações generalizadas, com pouco ou nenhum teste de controle para neurotoxicidade.¹⁵ Em 1985, Ready et al. avaliaram os efeitos neurotóxicos de injeções únicas de anestésicos locais em coelhos e relataram que alterações histopatológicas e déficits neurológicos ocorreram com concentrações mais altas de tetracaína a 1% e lidocaína a 8%.^{16 and 17} No passado, as soluções de anestésicos locais, administradas em doses clinicamente eficazes, raramente provocavam dano neurológico e a constatação de efeitos neurotóxicos exigia doses maiores dos fármacos. Para uma lesão produzida, um modelo de rato no qual anestésicos locais foram continuamente infundidos foi desenvolvido por Drasner et al. Nesse estudo, sem relevância clínica, o comprometimento funcional e o dano morfológico foram observados.¹⁸ Estudos anteriores conduzidos por Kofke indicaram que opiáceos podem produzir hipermetabolismo do sistema límbico e danos cerebrais quando administrados de forma sistemática e em doses altas.^{19 , 20 and 21} Em 2000, a densidade e a baricidade das misturas usadas em raquianestesia foram determinadas pela primeira vez no Brasil.²²

À luz desses estudos, queríamos observar se alguns medicamentos intratecais penetrariam de forma crônica na medula espinhal e se poderiam ser neurotóxicos ou não. Em nosso estudo, os resultados do TPQ indicaram que não houve bloqueio motor, mas os efeitos analgésicos/antinociceptivos foram significativos em todos os grupos.

No quinto minuto, as latências no TPQ foram prolongadas de forma estatisticamente significativa no grupo salina (p < 0,02), em comparação com o grupo controle. De forma semelhante, após injeções repetidas, o tempo de resposta analgésica no grupo salina foi diminuído como com outros opiáceos analgésicos. Não podemos explicar por que a salina se comportou como uma solução analgésica.

Após aplicações repetidas, o grupo fentanil desenvolveu tolerância ao efeito analgésico, mas essa tolerância não foi desenvolvida no grupo levobupivacaína.

Também testamos a disseminação rostral dos fármacos. Há muitos anos, sabemos que existem muitos fatores que afetam a dispersão cranial da raquianestesia, incluindo posicionamento do paciente, composição da solução, tipo de agulha, nível e velocidade da injeção, volume, viscosidade, obstrução da veia cava inferior e gravidez.^{23 , 24 , 25 , 26 and 27} Porém, a baricidade e a temperatura dos anestésicos locais são os fatores mais importantes da distribuição do anestésico local no espaço subaracnóideo.^{28 , 29 and 30}

A densidade do líquido cefalorraquidiano (LCR) humano não é uniforme e pode variar com a idade, o sexo, a gravidez e várias doenças. A relação entre a densidade do anestésico local e a do LCR é conhecida como baricidade.

As mudanças de temperatura também afetam a distribuição dos anestésicos locais. Quando os anestésicos locais são injetados no espaço subaracnoideo (geralmente em temperatura ambiente 20-24 °C), a temperatura do anestésico local entra em equilíbrio com a temperatura do corpo (37 °C) muito rapidamente, antes de fixar-se às raízes nervosas, e aos 37 °C todos os anestésicos isobáricos se tornam soluções hipobáricas.

Adjuvantes são frequentemente adicionados aos anestésicos locais para melhorar a anestesia e prolongar a analgesia pós-operatória. Os opiáceos (morfina, fentanil e sufentanil) e a clonidina mostraram ser hipobáricos a 37 °C. Quando adicionados aos anestésicos locais, reduzem a densidade da nova solução e a tornam mais hipobárica, de acordo com alguns estudos,^{31 and 32} mas não parece ter qualquer efeito na prática clínica. Isso sugere que a mudança de densidade é muito pequena.^{27 , 33 , 34 and 35}

Em nosso estudo, a temperatura das soluções (temperatura ambiente 20-24 °C) e sua combinação com opiáceos afetaram a propagação rostral dos fármacos, mas esse mecanismo não explica a contagem excessiva de neurônios eosinofílicos, especialmente em alguns grupos.

Na prática clínica, há muitos estudos nos quais anestésicos locais foram diluídos com solução salina estéril isotônica como fizemos em nosso estudo.^{36 , 37 , 38 and 39} A difusão rostral dos fármacos pode ser explicada pela hipobaricidade de nossas soluções; entretanto, em comparação com os resultados de Fukushima, nossos resultados neuropatológicos mostraram que quando os fármacos foram usados mesmo em doses analgésicas muito baixas (sem bloqueio motor), os efeitos neurotóxicos foram permanentes na medula espinhal torácica.⁴⁰ Em nosso estudo, usamos a contagem de neurônio eosinofílico como sinal de neurotoxicidade porque o mesmo mostra dano neuronal não recuperável, em vez de achados não específicos, como vacuolização, edema, invasão de macrófagos e núcleos picnóticos.⁴¹ Podemos observar a degeneração do neurônio eosinofílico na figura 3. Essa degeneração foi previamente determinada por Kofke.¹⁴

Figura 3
seta mostra o neurônio eosinofílico da medula espinhal de rato do grupo fentanil.

O escore de degeneração do neurônio na coluna vertebral foi significativamente elevado nos grupos fentanil e fentanil + levobupivacaína, em comparação com os grupos controle e salina. O grupo fentanil + levobupivacaína também apresentou escore maior do que o grupo levobupivacaína.

De fato, um dos principais objetivos deste estudo foi determinar as alterações neuropatológicas na medula espinhal após a sua exposição crônica a medicamentos intratecais. Cateteres intratecais cronicamente implantados caracteristicamente induzem lesões em animais controles. Portanto, preferimos a técnica de injeções repetidas em vez de cateter intratecal.^{11 and 12}

Nossos dados confirmam que fentanil e levobupivacaína podem causar danos à medula espinhal de ratos quando injetados durante quatro dias, mesmo em doses analgésicas.

Em conclusão, nosso estudo procurou explicar os diferentes lados da neurotoxicidade. Este foi um estudo experimental com animais e tem um componente comportamental. A metodologia neuropatológica é diferente e pode ser mais objetiva do que a de estudos anteriores; além disso, nosso estudo teve como base estudos in vitro da baricidade e da distribuição de anestésicos locais em LCR. Novos estudos devem ser planejados com microscopia eletrônica ou estudos de comportamento que possam mostrar que a penetração em longo prazo de anestésicos locais pode causar degenerações neuropatológicas na medula espinhal, no futuro.

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Datas de Publicação

• Publicação nesta coleção
  Jan-Feb 2015

Histórico

• Recebido
  20 Jan 2013
• Aceito
  15 Jul 2013