Resposta imunológica e bioquímica de bezerros imunizados com rMSP1 <i>a</i> (<i>Anaplasma marginale</i>) utilizando nanotubos de carbono como moléculas carreadoras

Silvestre, Bruna Torres; Silveira, Júlia Angélica Gonçalves da; Facury-Filho, Elias Jorge; Carvalho, Antônio Último de; Versiani, Alice Freitas; Estevam, Letícia Gracielle Tôrres de Miranda; Araújo, Márcio Sobreira Silva; Martins-Filho, Olindo Assis; Negrão-Corrêa, Deborah Aparecida; Ribeiro, Múcio Flávio Barbosa

doi:10.1590/S1984-296120180029

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Original Article • Rev. Bras. Parasitol. Vet. 27 (02) • Apr-Jun 2018 • https://doi.org/10.1590/S1984-296120180029 linkcopiar

Resposta imunológica e bioquímica de bezerros imunizados com rMSP1 a (Anaplasma marginale) utilizando nanotubos de carbono como moléculas carreadoras

Autoria SCIMAGO INSTITUTIONS RANKINGS

Resumo

Vacinação contra Anaplasma marginale tem sido considerada uma importante estratégia de controle da anaplasmose bovina. Recentemente, camundongos imunizados com rMSP1a funcionalizada à nanotubos de carbono (MWNT) apresentaram resposta imune significante, gerando nova possibilidade para o uso da vacina inativada. O objetivo desse estudo foi investigar a resposta celular e humoral em bezerros imunizados com MWNT+rMSP1a, associado com a vacina inativada de A. marginale produzida in vitro, e avaliar os efeitos tóxicos dos MWNT nas funções hepática e renal. rMSP1 a foi ligada covalentemente aos MWNT. Vacina inativada (AmUFMG2) foi produzida através do cultivo de A. marginale em células IDE8. Vinte e quatro bezerros Holandeses foram divididos (quatro grupos) e imunizados subcutaneamente com: PBS e MWNT não-carboxilados (controle, G1), AmUFMG2 (G2), MWNT+rMSP1 a (G3), e AmUFMG2 com MWNT+rMSP1a (G4). Amostras de sangue foram coletadas para contagem de leucócitos, perfil bioquímico e avaliação da resposta celular e humoral. Imunização com MWNT+rMSP1a induziu aumento dos leucócitos totais, células NK, na população de linfócitos e altos níveis de anticorpos comparado com animais imunizados apenas com AmUFMG2. Além disso, MWNT não induziu alterações no perfil bioquímico. Esses dados indicam que MWNT+rMSP1a foram capazes de induzir eficientemente a resposta imune comparado com AmUFMG2 sozinho, sem gerar toxicidade.

Palavras-chave: Anaplasma marginale; MSP1a; vacina inativada; nanotubos de carbono

Group	Immunogen
G1	PBS + non-carboxylated MWNTs (66 µg/calf) - Control group
G2	AmUFMG2 (400 µg/calf)
G3	MWNT+rMSP1a (200 µg/calf)
G4	AmUFMG2 (400 µg/calf) and MWNT+rMSP1a (200 µg/calf)

PARAMETERS	Reference Values Bovine ^* * Reference values bovine according to Kaneko et al. (2008) ; GGT values according to Bouda et al. (1980) .	GROUP 1 (Control)				GROUP 2 (AmUFMG2)				GROUP 3 (MWNT+rMSP1a)				GROUP 4 (AmUFMG2 and MWNT+rMSP1a)
PARAMETERS		Day 0	Day 21	Day 42	Day 63	Day 0	Day 21	Day 42	Day 63	Day 0	Day 21	Day 42	Day 63	Day 0	Day 21	Day 42	Day 63
Glucose mg/dL	40-100	57.14	65.98	82.34	103.30	61.23	56.61	83.79	98.96	55.29	64.13	84.72	95.39	49.09	60.04	77.46	102.82
Creatinine mg/dL	0.5-2.2	1.06	1.42	1.32	1.72	0.96	1.44	1.22	1.74	1.06	1.37	1.18	1.49	1.29	1.49	1.23	1.62
Albumin g/dL	2.5-3.8	2.74	2.78	2.48	4.09	2.57	2.56	2.41	4.05	2.61	2.66	2.47	3.84	2.64	2.66	2.42	3.96
ALP U/L	0-488	164.80	177.33	157.87	278.45	240.67	253.97	186.74	311.67	170.15	158.44	142.78	189.68	175.76	180.12	178.24	289.33
Total Protein g/dL	6.7-7.5	7.46	7.31	6.83	9.22	7.40	7.30	6.86	9.04	7.64	7.79	7.12	9.46	7.23	7.39	6.86	9.44
GGT U/L	6-32.4	16.25	24.24	18.43	26.52	12.04	18.92	10.37	23.94	13.04	20.25	12.42	23.11	14.40	16.28	16.37	21.60
ALT U/L	11-40	18.62	19.74	24.80	32.56	23.20	20.86	25.30	40.20	22.03	19.74	26.71	35.48	20.06	22.27	27.65	40.50
AST U/L	60-125	57.71	48.67	77.33	82.51	68.60	52.34	68.52	95.33	62.86	52.06	73.88	92.58	63.60	57.51	68.89	94.71

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[1] Values represent the median of each group. Statistical analysis among groups did not show significant change between calves immunized with MWNT (G1, G3 and G4) and calves from G2 group (MWNT non-immunized) (Kruskal-Wallis test, p>0.05).

[TFN1] ^*
Reference values bovine according to Kaneko et al. (2008) ; GGT values according to Bouda et al. (1980) .