A expressão das proteínas reguladas pelo ferro (IRPs), in vitro, tem sido obtida pela adição de quelantes de ferro ao meio de cultura, após o crescimento bacteriano, na presença de fonte de ferro orgânico. Neste estudo foram investigados aspectos da máxima expressão das IRPs de meningococo durante o crescimento normal, em condições de cultura definidas, utilizando-se o meio de Catlin e os caldos Mueller-Hinton e Tryptic Soja (TSB). Foram avaliadas as melhores condições para se obter vesículas de membrana externa (OMVs) contendo IRPs para uso em vacina de meningococo B. A expressão das IRPs variou entre as diferentes cepas com relação as diferentes concentrações de Etilenediamine Di-orto-Hidroxifenil-ácido acético (EDDA), de acordo com o meio de cultura e também entre os diferentes lotes de TSB. Para cada cepa, um específico padrão de ERPs foi expresso e altas concentrações de EDDA, adição de glicose ou o uso de diferentes meios de cultura não resultou em expressão diferencial das IRPs. Não foi possível cultivar meningococo em condições normais de crescimento utilizando-se Desferral. Foi investigado condições de crescimento para se obter bom rendimento de OMVs com expressão de IRPs em meio de Catlin deficiente em ferro, contendo EDDA e hemina. Cultura de 32 h a 30ºC, após incubação por 16 h a 37ºC, manteve bom crescimento, porém, lise da bactéria foi observada após 46 h a 30ºC. Aproximadamente 4 vezes mais OMVs foram recuperadas do sobrenadante de cultura após 24 h a 30ºC do que das células após 16 h a 37ºC. As IRPs foram bem expressas nas OMVs obtidas do sobrenadante de cultura após 24 h a 30ºC como também nas OMVs obtidas das células crescidas por 16 h a 37ºC.