Lozano, Stefhania Alzate; Sousa, Aline Bastos Brilhante de; Souza, Julio Cezar de; Silva, David Ribeiro da; Salazar, Marcos Gabriel Maciel; Halicki, Priscila Cristina Bartolomeu; Ramos, Daniela Fernandes; Silva, Pedro Eduardo Almeida da; Nunez, Cecilia Veronica

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Sumário

Pharmacognosy • Rodriguésia 71 • 2020 • https://doi.org/10.1590/2175-7860202071054 copiar

Duroia saccifera: in vitro germination, friable calli and identification of β-sitosterol and stigmasterol from the active extract against Mycobacterium tuberculosis

Autoria SCIMAGO INSTITUTIONS RANKINGS

Resumo

Duroia saccifera (Rubiaceae) ocorre na floresta Amazônica. Seus extratos apresentaram atividade antibacteriana. Para obter maiores quantidades de substâncias ativas, foram utilizados segmentos de folhas de plântulas in vitro de D. saccifera como explantes para indução de calos; os calos foram multiplicados através de múltiplos subcultivos, depois secos e extraídos com hexano, seguido por acetato de etila (AcOEt) e metanol (MeOH). Como D. macrophylla foi relatada como produtora de substâncias antimicobacterianas, os extratos de calos foram testados contra Mycobacterium tuberculosis (cepa H37Rv). O extrato AcOEt dos calos foi ativo, com uma concentração inibitória mínima (CIM) de ≤ 25 mg mL^-1, IC₉₀de 19,5 mg mL^-1 e concentração bactericida mínima (MBC) de 200 mg mL^-1. O extrato AcOEt foi analisado por cromatografia em camada delgada comparativa (CCDC) e Ressonância Magnética Nuclear (RMN) para determinar o seu perfil químico e mostrou ser rico em terpenos. O fracionamento cromatográfico do extrato AcOEt conduziu ao isolamento de uma mistura de dois esteroides, β-sitosterol e estigmasterol (na proporção de 2:1), os quais foram identificados por análises de RMN de ¹H e bidimensionais. Pelo levantamento bibliográfico realizado, este é o primeiro relato da cultura de células in vitro de Duroia saccifera, da atividade antituberculose do extrato de calos e do isolamento de β-sitosterol e estigmasterol da cultura de células vegetais in vitro da espécie.

Palavras-chave:
antituberculose; fitoquímica; cultura de tecidos vegetais; Rubiaceae; esterois

Position	β-Sitosterol			Stigmasterol
Position	¹³C	¹H	¹³C Literature ¹ 1 Kovganko et al. 1999 (360 MHz, CDCl3);	¹³C	¹H	¹³C Literature ² 2 Khatun et al. 2012 (400 MHz, CDCl3).
1	37.24	1.80, 1.05	37.3	37.24		37.31
2	31.89	1.82, 1.52	31.6	32.41		31.72
3	71.81	3.53	71.8	71.81	3.53	71.85
4	42.29	2.28, 2.22	42.3	42.29		42.37
5	140.75	-	140.8	140.75		141.01
6	121.74	5.35	121.7	121.74	5.35	121.73
7	31.89	1.95, 1.52	32.1	31.65		31.72
8	31.89	1.53	32.1	31.65		31.79
9	50.1	0.91	50.2	50.1		50.19
10	36.49	-	36.5	36.15		36.17
11	21.08	1.46	21.1	21.22		21.11
12	39.76	1.99, 1.14	39.8	39.76		40.10
13	42.3	-	42.3	42.3		42.41
14	56.85	0.87	56.8	56.75		56.12
15	24.30	1.55, 1.03	24.3	24.30		23.12
16	28.94	1.82, 1.24	28.3	29.35		29.72
17	56.02	1.08	56.1	55.96		56.12
18	11.85	0.68	12.0	11.97		12.01
19	19.40	1.01	19.1	19.86		19.42
20	35.89	1.34	36.2	39.74		41.10
21	18.77	0.94	18.8	20.53		21.10
22	33.92	1.29, 0.99	34.0	138.34	5.15	138.00
23	26.00	1.15	26.2	129.25	5.01	128.95
24	45.80	0.90	45.2	51.23		50.15
25	29.1	1.64	29.2	29.70		31.72
26	19.01	0.80	18.9	21.86		21.30
27	19.84	0.82	19.1	18.70		19.06
28	23.03	1.23	23.1	25.4		25.38
29	11.85	0.85	11.9	11.97		12.28

Extract / control	MIC (µg mL^-1)	IC₉₀ (µg mL^-1)	MBC (µg mL^-1)
EtOAc	≤ 25	19.5	200
MeOH	> 400	> 400	> 400
RMP	≤ 0.01	nd	nd
INH	0.03	nd	nd

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[1] 4Author for correspondence: cecilia@inpa.gov.br