Este estudo avaliou a viabilidade celular, produção de citocinas e potencial de mineralização de células da polpa dentária humana (hDPCs) após exposição a lipopolissacarídeo (LPS) e aplicação de materiais à base de silicato de cálcio (CSBM). A caracterização do CSBM foi realizada por espectroscopia (n = 3). Extratos de Bio-C Repair, Biodentine, Cimmo HD e MTA Repair HP foram preparados e diluídos (1: 1, 1: 4 e 1:16). A cultura de hDPCs foi estabelecida e tratada ou não com 1 µg / mL de LPS de Escherichia coli por 7 dias. O ensaio de MTT foi usado para avaliar a viabilidade celular em 24, 48 e 72 h (n = 6). A atividade da fosfatase alcalina (ALP) foi avaliada no dia 7 (n = 4). Il-10 e TNF-α foram quantificados por ELISA em 24 h (n = 6). Os dados foram analisados por ANOVA e teste de Tukey (α = 0,05). A viabilidade celular das hPDCs ativados por LPS foi maior do que o controle não tratado em 48 e 72 h (p <0,05). Diferenças entre hPDCs não tratados e ativados por LPS foram observados para Biodentine e Cimmo HP (p < 0,05). Os CSBM influenciaram na viabilidade celular (p <0,05). A atividade de ALP foi maior em hDPCs ativadas por LPS (p <0,05). Não foram observadas alterações na concentração de TNF-α entre os grupos (p> 0,05). Os CSBM aumentaram a produção de Il-10 (p < 0,05). Os hDPCs ativados por LPS apresentaram um aumento na viabilidade celular e atividade ALP. Os CSBM apresentaram toxicidade moderada e foram capazes de aumentar a viabilidade celular e o potencial de mineralização de hDPCs não tratados e ativados por LPS. Os CSBM também induziram mecanismos anti-inflamatórios sem comprometer os pró-inflamatórios.
Article • Braz. Dent. J. 33
(5)
• Sep-Oct 2022 • https://doi.org/10.1590/0103-6440202204990 linkcopiar
Exposure to lipopolysaccharide and calcium silicate-based materials affects the behavior of dental pulp cells
Autoria
person Marlus da Silva Pedrosa
person Handially dos Santos Vilela
person Juliana Garuba Rahhal
person Natália Pieretti Bueno
schoolUniversity of São Paulo- USP, School of Dentistry, Department of Oral and Maxillofacial Surgery, Prosthesis and Traumatology, São Paulo, SP, Brazil.University of São PauloBrazilBrazilUniversity of São Paulo- USP, School of Dentistry, Department of Oral and Maxillofacial Surgery, Prosthesis and Traumatology, São Paulo, SP, Brazil.
person Fabianne Soares Lima
person Fernando Neves Nogueira
person Carla Renata Sipert
Correspondence: Prof. Carla Sipert - Departamento de Dentística, Faculdade de Odontologia, Universidade de São Paulo (USP). Av. Prof. Lineu Prestes 2227, 05508-900, São Paulo, SP, Brasil. E-mail
address: sipert@usp.br
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Figuras
imageBox 1 Tested materials open_in_new

imageBox 2 Fourier transform infrared spectroscopy information for the setting materials. open_in_new

imageFigure 1 ATR-FTIR spectroscopy Bio-C Repair, Biodentine, Cimmo HD, and MTA Repair HP. The main peaks are highlighted. open_in_new

imageFigure 2 Heat map representing the cell viability rate (% of negative control group) according to MTT assay in hPDCs after 24 (A, B, C and D), 48 (E, F, G, and H ),and 72 (I, J, K and L), hours of exposure to different dilutions (1:1, 1:4 and 1:16) of the extracts of Bio-C Repair (A, E and I), Biodentine (B, F and J), Cimmo HD (C, G and K), and MTA Repair HP (D, H and L). hPDCs incubated in culture e medium alone served as the negative control group. hPDCs were seeded at a cell density of 2x104 cells well in a 96-well culture plate. The results show the mean of the experiments (n = 9). Different letters represent significant differences between groups. Two-Way ANOVA with Tukey test (p < 0.05). The horizontal dashed line indicates 70% cell viability. A decrease in cell viability below 70% of the control is considered cytotoxic according to ISO 10993-5. open_in_new

imageFigure 3 ALP activity after 7 days of exposure to 1:16 dilution of the extracts of Bio-C Repair, Biodentine, Cimmo HD, and MTA Repair HP in untreated and LPS-treated hPDCs. hPDCs incubated in a culture medium alone served as the negative control. The results show the mean and standard deviation of the experiments (n = 4). Different letters represent significant differences between groups. Two-Way ANOVA with Tukey test (p < 0.05). open_in_new

imageFigure 4 TNF-α concentration according to ELISA assay after 24 h of exposure to 1:4 dilution of the extracts of Bio-C Repair, Biodentine, Cimmo HD, and MTA Repair HP in untreated and LPS-treated hPDCs. hPDCs incubated in ca ulture medium alone served as the negative control. The results show the mean and standard deviation of the experiments (n = 6). Different letters represent significant differences between groups. Two-Way ANOVA with Tukey test (p < 0.05). open_in_new

imageFigure 5 Il-10 concentration according to ELISA assay after 24 h of exposure to 1:4 dilution of the extracts of Bio-C Repair, Biodentine, Cimmo HD, and MTA Repair HP in untreated and LPS-treated hPDCs. hPDCs incubated in a culture medium alone served as the negative control. The results show the mean and standard deviation of the experiments (n = 6). Different letters represent significant differences between groups. Two-Way ANOVA with Tukey test (p < 0.05). open_in_new

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