Membranas de fibrina rica em plaquetas (PRF) e PRF injetável (i-PRF) são agentes biológicos utilizados para potencializar a cicatrização, frequentemente associados ao osso bovino desproteinizado (OBD) para promover a regeneração óssea. Este estudo avaliou protocolos de centrifugação em baixa rotação para a obtenção de membranas de PRF e de i-PRF combinado com OBD (sticky bone, SB) na reparação de defeitos ósseos tibiais de ratos. Sessenta e quatro ratos receberam defeitos preenchidos com coágulo sanguíneo (CO), membrana de PRF (PRF), OBD isolado (BO) ou SB. Foram realizadas análises por microtomografia computadorizada (μCT), avaliação histológica e expressão gênica de marcadores moleculares nos períodos de 15 e 45 dias. As membranas de PRF promoveram maior formação óssea precoce e aumento da expressão de Bglap em comparação ao controle (p < 0,05). A análise por μCT mostrou que o grupo BO apresentou formação óssea cortical significativamente maior aos 15 dias em comparação ao controle (p < 0,05). Além disso, os grupos BO e SB promoveram aumento da formação óssea cortical aos 45 dias (p < 0,05), com o grupo SB também apresentando aumento da espessura cortical nas margens do defeito. Na região medular, tanto BO quanto SB apresentaram maior formação óssea e maior número de trabéculas (p < 0,05) após 15 e 45 dias. A análise de expressão gênica revelou níveis mais elevados de Alpl, Bglap e Runx2 no grupo BO em comparação aos grupos SB e controle (p < 0,05). Em conclusão, as membranas de PRF melhoraram a formação óssea precoce em comparação ao coágulo sanguíneo. O OBD, utilizado isoladamente ou em combinação com i-PRF, também promoveu maior regeneração óssea em comparação ao controle. No entanto, a adição de i-PRF não aumentou o potencial regenerativo do OBD.
Autoria
person Lélio Fernando Ferreira Soares
schoolFaculdade de Odontologia da Universidade Federal de Alfenas(UNIFAL/MG), Alfenas, Minas Gerais, Brasil.Universidade Federal de AlfenasBrasilAlfenas, Minas Gerais, BrasilFaculdade de Odontologia da Universidade Federal de Alfenas(UNIFAL/MG), Alfenas, Minas Gerais, Brasil.school Departamento de Diagnóstico e Cirurgia da Faculdade de Odontologia de Araraquara, Universidade Estadual Paulista- UNESP, Araraquara, São Paulo, BrasilUniversidade Estadual PaulistaBrasilAraraquara, São Paulo, Brasil Departamento de Diagnóstico e Cirurgia da Faculdade de Odontologia de Araraquara, Universidade Estadual Paulista- UNESP, Araraquara, São Paulo, Brasil
person Thaisa Macedo Iunes Carrera
school Departamento de Periodontia e Implantodontia da Faculdade de Odontologia da Universidade Federal de Uberlândia(UFU), Uberlândia, Minas Gerais, BrasilUniversidade Federal de UberlândiaBrasilUberlândia, Minas Gerais, Brasil Departamento de Periodontia e Implantodontia da Faculdade de Odontologia da Universidade Federal de Uberlândia(UFU), Uberlândia, Minas Gerais, Brasil
person Roberta de Oliveira Alves
school Departamento de Periodontia e Implantodontia da Faculdade de Odontologia da Universidade Federal de Uberlândia(UFU), Uberlândia, Minas Gerais, BrasilUniversidade Federal de UberlândiaBrasilUberlândia, Minas Gerais, Brasil Departamento de Periodontia e Implantodontia da Faculdade de Odontologia da Universidade Federal de Uberlândia(UFU), Uberlândia, Minas Gerais, Brasil
person Camila Chiérici Marcantonio
school Departamento de Diagnóstico e Cirurgia da Faculdade de Odontologia de Araraquara, Universidade Estadual Paulista- UNESP, Araraquara, São Paulo, BrasilUniversidade Estadual PaulistaBrasilAraraquara, São Paulo, Brasil Departamento de Diagnóstico e Cirurgia da Faculdade de Odontologia de Araraquara, Universidade Estadual Paulista- UNESP, Araraquara, São Paulo, Brasil
person Juliana dos Santos Neves
person Joni Augusto Cirelli
school Departamento de Diagnóstico e Cirurgia da Faculdade de Odontologia de Araraquara, Universidade Estadual Paulista- UNESP, Araraquara, São Paulo, BrasilUniversidade Estadual PaulistaBrasilAraraquara, São Paulo, Brasil Departamento de Diagnóstico e Cirurgia da Faculdade de Odontologia de Araraquara, Universidade Estadual Paulista- UNESP, Araraquara, São Paulo, Brasil
person Guilherme José Pimentel Lopes de Oliveira
school Departamento de Periodontia e Implantodontia da Faculdade de Odontologia da Universidade Federal de Uberlândia(UFU), Uberlândia, Minas Gerais, BrasilUniversidade Federal de UberlândiaBrasilUberlândia, Minas Gerais, Brasil Departamento de Periodontia e Implantodontia da Faculdade de Odontologia da Universidade Federal de Uberlândia(UFU), Uberlândia, Minas Gerais, Brasil
person Suzane Cristina Pigossi
school Departamento de Periodontia e Implantodontia da Faculdade de Odontologia da Universidade Federal de Uberlândia(UFU), Uberlândia, Minas Gerais, BrasilUniversidade Federal de UberlândiaBrasilUberlândia, Minas Gerais, Brasil Departamento de Periodontia e Implantodontia da Faculdade de Odontologia da Universidade Federal de Uberlândia(UFU), Uberlândia, Minas Gerais, Brasil
Correspondence: Dr. Suzane Cristina Pigossi, Federal University of Uberlândia (UFU), School of Dentistry, Department of Periodontology and Implantodontology, Umuarama Campus, Bloco UMU4L, Pará Avenue, 1720, 38405-320, Uberlândia, Minas Gerais, Brazil, +55 34 3225-8106, E-mail:
suzane.pigossi@ufu.br
suzane.pigossi@ufu.br
Competing interests
The authors declare no conflict of interest.
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Faculdade de Odontologia da Universidade Federal de Alfenas(UNIFAL/MG), Alfenas, Minas Gerais, Brasil.Universidade Federal de AlfenasBrasilAlfenas, Minas Gerais, BrasilFaculdade de Odontologia da Universidade Federal de Alfenas(UNIFAL/MG), Alfenas, Minas Gerais, Brasil.
Departamento de Periodontia e Implantodontia da Faculdade de Odontologia da Universidade Federal de Uberlândia(UFU), Uberlândia, Minas Gerais, BrasilUniversidade Federal de UberlândiaBrasilUberlândia, Minas Gerais, Brasil Departamento de Periodontia e Implantodontia da Faculdade de Odontologia da Universidade Federal de Uberlândia(UFU), Uberlândia, Minas Gerais, Brasil
Departamento de Diagnóstico e Cirurgia da Faculdade de Odontologia de Araraquara, Universidade Estadual Paulista- UNESP, Araraquara, São Paulo, BrasilUniversidade Estadual PaulistaBrasilAraraquara, São Paulo, Brasil Departamento de Diagnóstico e Cirurgia da Faculdade de Odontologia de Araraquara, Universidade Estadual Paulista- UNESP, Araraquara, São Paulo, Brasil
Figuras
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imageFigure 1 Sequence of surgical defect preparation. A: Exposure of the tibia; B: Circular defect with a diameter of 3.5mm; C: Depth of 1.5mm of the defect created; D: Adjacent markings; E: Defect filled with bone xenograft granules; F: Suture of the animal's cutaneous plane. open_in_new

imageFigure 2 Regions of interest and threshold defined for bone micro-structural parameters analysis by micro-computed tomography. A: Circular ROI defined around the hole defect; B: ROIs including both cortical (yellow) and medullary areas (red); C: Representative threshold applied to transaxial images; D: Representative threshold applied to coronal images. open_in_new

imageFigure 3 Micro-computed tomography analyses conducted in the cortical defect area. A: Percentage of new bone formation (BV/TV) in CO and PRF groups; B: Cortical bone defect thickness (Ct.Th) in CO and PRF groups; C: Percentage of new bone formation (BV/TV) in CO, BO, and SB groups; D: Cortical bone defect thickness (Ct.Th) in CO, BO, and SB groups; E: Percentage of residual graft particles (BV/TV). Different letters (a, b) indicate intragroup statistical differences (p < 0.05); asterisks (*) indicate intergroup statistical differences (p < 0.05). CO: Control group; PRF: PRF membrane group; BO: DBBM alone group; SB: Sticky bone group (i-PRF + DBBM). open_in_new

imageFigure 4 Micro-computed tomography analyses conducted in the cortical and medullary defect area. A: Bone defect filling percentage (bone tissue/biomaterial; BV/TV) in CO and PRF groups; B: Trabecular number (Tb.N) in CO and PRF groups; C: Trabecular thickness (Tb.Th) in CO and PRF groups; D: Trabecular separation (Tb.Sp) in CO and PRF groups; E: Bone defect filling percentage (bone tissue/biomaterial; BV/TV) in CO, BO, and SB groups; F: Trabecular number (Tb.N) in CO, BO, and SB groups; G: Trabecular thickness (Tb.Th) in CO, BO, and SB groups; H: Trabecular separation (Tb.Sp) in CO, BO, and SB groups. Different letters (a, b) indicate intragroup statistical differences (p < 0.05); asterisks (*) indicate intergroup statistical differences (p < 0.05). CO: Control group; PRF: PRF membrane group; BO: DBBM alone group; SB: Sticky bone group (i-PRF + DBBM). open_in_new

imageFigure 5 Representative images of histological sections. A: After 15 and 45 days (2.5x); B: After 15 days (5x and 20x). C: After 45 days (5x and 20x). Arrows: Defect edges; Asterisk: Residual PRF membrane; BM: Bone marrow; BV: Blood vessel; DBP: Deproteinized bone particle; NB: New bone; Ob: Osteoblast; Oc: Osteoclast; Tr: Bone trabeculae. CO: Control group; PRF: PRF membrane group; BO: DBBM alone group; SB: Sticky bone group (i-PRF+DBBM). open_in_new

imageFigure 6 Bone molecular markers expression. A: Alpl. B: Bglap. C: Runx2. *: Intergroup statistical difference (p<0.05). CO: Control group; PRF: PRF membrane group; BO: DBBM alone group; SB: Sticky bone group (i-PRF+DBBM). open_in_new

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