Rho Kinases and Reactive Oxygen Species in Autophagy Regulation by Pressure in Periodontal Ligament Cells

A autofagia é um mecanismo de autodigestão das células, que está relacionado ao estresse celular. Ela permite a sobrevivência das células, mantendo a homeostase celular ou iniciando a morte celular. O objetivo deste estudo foi investigar a sinalização intracelular da regulação da autofagia induzida por pressão nas células do ligamento periodontal humano (PDL) e analisar o envolvimento de Rho kinases (ROCK) e espécies reativas de oxigênio (ROS) em particular. As células do ligamento periodontal humano foram tratadas com o inibidor de ROCK Y-27632 e o eliminador de ROS N-acetilcisteína (NAC) em combinação com magnitudes de pressão de 2, 6 e 8 g/cm2 durante 16 horas. As células tratadas com rapamicina serviram como controle positivo e as células não tratadas como grupo de controle. O kit de detecção de autofagia Cyto-ID® foi usado para análise de citometria de fluxo. A análise estatística foi realizada usando ANOVA e testes post-hoc. Os resultados mostram que a autofagia induzida por pressão foi afetada de forma diferente pelos dois inibidores (p<0,05). A aplicação do Y-27632 levou a uma redução significativa da autofagia em todos os grupos de pressão. A aplicação de NAC levou à redução da autofagia nas pressões de 2 g/cm2 e 6 g/cm2. A 8 g/cm2, esse efeito não estava mais presente. No grupo de controle, a autofagia foi significativamente reduzida pelo Y-27632 e significativamente aumentada pela NAC. Nossos dados sugerem que tanto a Rho-kinase quanto as espécies reativas de oxigênio podem influenciar a regulação da autofagia induzida pela pressão nas células PDL.