Sensibilidade in vitro de Sclerotium rolfsii a fungicidas

O fungo Sclerotium rolfsii Sacc. é um patógeno necrotrófico de diversas culturas de interesse agrícola. Os sintomas iniciam com necrose na região das raízes e do colo das plantas e, consequentemente, murcha da parte aérea. Os tecidos vegetais mortos na superfície do solo servem como substrato para o desenvolvimento do micélio e, posteriormente, dos escleródios do fungo, sendo esses responsáveis pela sua sobrevivência (³). Os fungicidas estão entre as opções de controle deste patógeno, já que reduzem a intensidade da doença e inibem a germinação dos escleródios (², ⁴). Embora sua utilização possa selecionar variantes do fungo menos sensíveis às moléculas do fungicida, a sensibilidade do fungo aos ingredientes ativos pode ser monitorada com testes in vitro (¹). Não obstante, a sensibilidade do fungo às moléculas do fungicida varia de acordo com o meio de cultura utilizado, por exemplo, em meios sólidos S. rolfsii é menos sensível devido à redução de contato do micélio ao meio de cultura acrescido de fungicidas (⁵).

A sensibilidade de S. rolfsii foi avaliada a dez fungicidas que constam listados na tabela 1. Os fungicidas foram diluídos em água destilada esterilizada até obter soluções estoque de concentração 10⁴ µg i.a.mL^-1, para posterior diluição e incorporação em meio de cultura BDA ¼ tamponado a pH 5,5 com tampão citrato-fosfato. As concentrações finais adicionadas aos meios de cultura foram de 10^-3 a 10⁴ µg.mL^-1 de acordo com o fungicida testado, diluindo a concentração do fungicida em intervalos 1/10, a partir da solução de estoque. Para cada dose foram avaliadas cinco repetições com 12 escleródios do fungo por placa de Petri, e um tratamento sem adição de fungicidas como controle da germinação dos escleródios. As placas de Petri foram mantidas em câmara de crescimento na temperatura de 27 ±2 ºC e fotoperíodo de 12 horas. A verificação da germinação dos escleródios foi realizada em microscópio com ampliação de 400x após 24 horas de incubação. A eficiência do fungicida (E_fung) foi determinada conforme a equação:

$${\mathrm{E}}_{\mathrm{FUNG}}=\left(\frac{\mathrm{germinação} \mathrm{sem} \mathrm{Fungicida}-\mathrm{germinação} \mathrm{com} \mathrm{Fungicida}}{\mathrm{germinação} \mathrm{com} \mathrm{Fungicida}} \right)\times 100$$

Tabela 1
DL₅₀ de inibição da germinação de escleródios de Sclerotium rolfsii por fungicidas.

Fungicida	Concentração	Equação	R2ajustado	DL50 µg.mL-1
Azoxistrobina + Benzovindiflupir	300 g.Kg-1 + 150 g.Kg-1	Efung= 58,2+13,2. Log x	82%	0,00024x103
Trifloxistrobina + Tebuconazol	100 g.L-1 + 200 g.L-1	Efung= 29,7+20,5. Log x	54%	0,0098x103
Piraclostrobina + Tiofanato metílico + Fipronil	25 g.L-1 + 225 g.L-1 + 250 g.L-1	Efung= 8,5+21,8 Log x	72%	0,08x103
Piraclostrobina + Epoxiconazol	133 g.L-1 + 50 g.L-1	Efung= -9,2+30. Log x	66%	0,094x103
Trifloxistrobina + Protioconazol	150 g.L-1 + 175 g.L-1	Efung= -0,7+22,8. Log x	72%	0,17x103
Azoxistrobina + Ciproconazol	200 g.L-1 + 80 g.L-1	Efung= -1,3+21,8. Log x	73%	0,22x103
Difenoconazol	250 g.L-1	Efung= -8+24, 7. Log x	72%	0,22x103
Tiofanato-Metílico	700 g.Kg-1	Efung= -13+16,3. Log x	59%	7,2x103
Carbendazim	500 g.L-1	Efung = 4,1 + 5. Log x	45%	*
Silicato de potássio	131 g.L-1	Efung = 18,1	-	**

• ^*
  não foi possível definir a DL₅₀ dentro do intervalo de doses testadas.
• ^**
  sem efeito na inibição da germinação dos escleródios.

A DL₅₀ foi calculada para cada um dos fungicidas pela regressão entre a eficiência de germinação e a log das doses avaliadas (Tabela 1) usando o programa SAS. Para efeito de análise estatística, cada um dos fungicidas foi analisado separadamente.

Foi possível calcular a DL₅₀ para os fungicidas, com exceção do Silicato de potássio e Carbendazim. A mistura contendo fungicida com sítio de ação na respiração, como Azoxistrobina + Benzovindiflupir, teve DL₅₀ com 0,24 µg.mL^-1. A dose de menor concentração que alcançou a DL₅₀ encontra-se nessa mistura. O sítio de ação da Azoxistrobina é no complexo III, enquanto do Benzovindiflupir é no complexo II, ambos na respiração, essa ação múltipla na respiração pode ter conferido o efeito fungicida pronunciado desta mistura. Piraclostrobina + Epoxiconazol teve DL₅₀ de 94 µg.mL^-1. Trifloxistrobina + Protioconazol de 170 µg.mL^-1. Azoxistrobina + Ciproconazol com 220 µg.mL^-1 e somente Difenoconazol com DL₅₀ de 220 µg.mL^-1.

Os dados apresentados mostram que o S. rolfsii é sensível aos princípios ativos dos grupos das estrobilurinas, triazóis e ao benzovindiflupir quando avaliado em condições controladas, portanto, estes fungicidas apresentam potencial para uso no manejo deste patógeno, porém devem ser consideradas outras variáveis, principalmente a viabilidade econômica da aplicação destes produtos e a forma de aplicação para atingir o alvo. Por outro lado, S. rolfsii foi pouco sensível aos fungicidas Tiofanato Metílico e Carbendazin quando avaliado in vitro, isso indica que a utilização destes dois produtos apresentará baixa eficiência do controle deste patógeno.

REFERÊNCIAS

• ¹
  Ghini, R.; Kimati, H. Resistência de fungos a fungicidas Juaguariúna - SP: Embrapa Meio Ambiente, 2000. 78p.
• ²
  Keinath, A.P.; Dubose, V.B. Management of southern blight on tomato with SDHI fungicides. Crop Protection, Guildford, v.101, p.29-34, 2017.
• ³
  Marcuzzo, L.L.; Schuller, A. Sobrevivência e viabilidade de escleródios de Sclerotium rolfsii no solo. Summa Phytopathologica, Botucatu, v.40, n.3, p.281-283, 2014.
• ⁴
  Siddique, M.N.A.; Ahmmed, A.N.F.; Jahan, N.; Mazumder, M.G.H.; Islam, M.R. Management of foot and root rot disease of eggplant (Solanum melongena L.) caused by Sclerotium rolfsii under in vivo condition. The Agriculturists, Bangladesh, v.16, n.1, p.78-86, 2018.
• ⁵
  Waterfield, W.F.; Sisler, H.D. Effect of propiconazole on growth and sterol biosynthesis by Sclerotium rolfsii Netherlands Journal of Plant Pathology, Dordrecht, v.95, n.S1, p.187-195, 1989.

Publication Dates

• Publication in this collection
  13 Feb 2023
• Date of issue
  Oct-Dec 2022

History

• Received
  21 Sept 2020
• Accepted
  03 Oct 2022