Resumo
O estudo avaliou o efeito de diferentes doses de fitase e duas dietas (milho e farelo de soja, e farinha de carne e ossos) no desempenho de frangos de corte e na digestibilidade de nutrientes das rações. Foram utilizados 1320 frangos de corte Cobb 500 para o experimento de desempenho, 216 frangos de corte Cobb 500 para o ensaio de metabolismo, e 252 pintos de corte para a determinação dos coeficientes de digestibilidade aparentes e estandardizados dos aminoácidos das dietas. As aves foram pesadas individualmente e distribuídos em delineamento inteiramente casualizado, totalizando seis tratamentos divididos em esquema fatorial 2x3 (duas dietas e três níveis de fitase compondo os tratamentos): dietas vegetais com 500, 1000 e 1500 FTU de fitase (T1, T2, T3); e dietas com farinha de carne e ossos com 500, 1000 e 1500 FTU de fitase (T4, T5, T6). O ganho de peso médio final e ganho de peso dos animais que consumiram dietas com farinha de carne e ossos e fitase a 500 FTU/kg foi similar com os que consumiram 1000 FTU/kg de fitase. E a digestibilidade dos aminoácidos para os animais que consumiram dietas com milho e farelo de soja e fitase com 500 FTU/kg foi similar com os que consumiram 1000 FTU/kg, e estatisticamente o nível de 1500 FTU/kg foi igual ao nível de 500 FTU/ kg. Altas doses de fitase não promoveram melhora no desempenho e digestibilidade dos nutrientes, bem como nos valores de EMAn, com isso, recomenda-se a suplementação de fitase a 500 FTU/kg.
Palavras-chave: ácido fítico; digestibilidade; enzima
Abstract
The study evaluated the effect of different doses of phytase and two diets (corn and soybean meal, and meat and bone meal) on the performance of broiler chickens and the digestibility of nutrients in feed. A total of 1320 Cobb 500 broilers were used for the performance experiment, 216 Cobb 500 broilers for the metabolism test, and 252 broiler chicks to determine the apparent and standardized digestibility coefficients of amino acids in the diets. The birds were individually weighed and distributed in a completely randomized design, comprising six treatments divided into a 2×3 factorial scheme (two diets and three levels of phytase composing the treatments): vegetable diets with 500, 1000, and 1500 FTU of phytase (T1, T2, T3); and meat and bone meal diets with 500, 1000, and 1500 FTU of phytase (T4, T5, T6). The average final weight gain and weight gain of animals that consumed diets with meat and bone meal and phytase at 500 FTU/kg were similar to those that consumed 1000 FTU/kg of phytase. The digestibility of amino acids for animals that consumed diets with corn and soybean meal and phytase at 500 FTU/kg was similar to those that consumed 1000 FTU/kg; statistically, the level of 1500 FTU/kg was equal to that of 500 FTU/kg. High doses of phytase did not promote improvements in performance and nutrient digestibility, as well as EMAn values; therefore, phytase supplementation at 500 FTU/kg is recommended.
Keywords: digestibility; enzyme; phytic acid
1. Introdução
As rações de frangos de corte no Brasil são formuladas a base de ingredientes de origem vegetal (milho e farelo de soja), o que representa 90% de toda a dieta, contribuindo para o fornecimento de energia, proteína, vitaminas e minerais. Esses são ingredientes que representam altos custos na alimentação(1). O uso de enzimas contribui para a melhora da digestibilidade e disponibilidade de certos nutrientes como por exemplo, o fósforo.
Os ingredientes de origem vegetal das dietas das aves apresentam alguns compostos antinutricionais, como o fitato ou ácido fítico, uma molécula que contém principalmente fósforo, que forma sais insolúveis com aminoácidos e minerais de importância, levando a diminuição da disponibilidade, por ser mal digerido pelos monogástricos. A hidrólise do fitato é feita pela enzima fitase e, assim, sua adição na dieta tem sido uma alternativa nas formulações atuais, uma vez que, as aves não conseguem produzir de forma suficiente(2,3).
A suplementação de fitase objetiva disponibilizar o fósforo contido nas moléculas de ácido fítico, possibilitando a redução de inclusão de ingredientes que contenham esse mineral. Não só a disponibilização de fósforo, mas também outros nutrientes, pois o ácido fítico possui carga eletronegativa que em condições intestinais (pH e temperatura) é capaz de reduzir a solubilidade e a digestibilidade do Ca, Fe, Zn e proteína, levando a cascatas deletérias(6).
A superdosagem de fitase pode contribuir para melhorar os coeficientes de digestibilidade da matéria mineral e da proteína. Essa melhoria na digestibilidade pode estar relacionada à degradação do fitato e ao aumento da disponibilidade de mioinositol(4). Assim, o uso da enzima fitase, tanto nos níveis recomendados pelos fabricantes quanto em superdosagem, é de grande interesse para a sustentabilidade da cadeia produtiva avícola. Essa enzima pode ajudar a maximizar a digestão dos componentes naturais das rações e reduzir as excreções para o ambiente(5).
Walters et al.(7) ao avaliar superdoses de fitase (2.000 e 3.000 FTU/kg) observou uma melhoria no desempenho das aves, bem como na digestibilidade dos nutrientes.
Além disso, o uso de fitase pode diminuir a poluição ambiental, uma vez que aproximadamente 30% da excreção do P é diminuída pelas aves e suínos com a inclusão de fitase nas dietas, e a digestibilidade de outros nutrientes ligados ao ácido fitico é aumentada com a hidrólise da molécula de fitato(8).
Outra forma de disponibilizar fósforo para os animais tem sido a inclusão de farinha de carne e ossos nas rações, ingrediente de origem animal que não possui a molécula de ácido fítico. Dentro desse contexto, a suplementação de cerca de 5% de farinha de carne e ossos pode reduzir ou até mesmo eliminar a necessidade de suplementar o fósforo inorgânico, e com isso reduzir os custos da alimentação. O fósforo presente na farinha de carne e ossos, em função da inexistência de associação com o ácido fítico, é considerado mais disponível do que o fósforo dos ingredientes de origem vegetal(9).
O presente estudo foi realizado a partir da hipótese que a fitase melhora o desempenho das aves e a digestibilidade de nutrientes, contribuindo para a diminuição da poluição ambiental. Com isso, objetivou-se avaliar o efeito de diferentes doses de fitase e duas dietas, milho e farelo de soja, e farinha de carne e ossos sobre o desempenho de frangos de corte e a digestibilidade de nutrientes das rações.
2. Material e Métodos
2.1 Localização, instalações e manejo exerimental
Este experimento foi submetido à Comissão de Ética no Uso de Animais de Produção da Universidade Federal de Viçosa (CEUAP/UFV) - protocolo nº021/2019. Foi realizado na Unidade de Ensino, Pesquisa e Extensão em Produção e Nutrição de Aves do Departamento de Zootecnia do Centro de Ciências Agrárias da Universidade Federal de Viçosa (UFV), no período de setembro a outubro de 2019.
Alimento e água foram fornecidos ad libitum. Os boxes foram monitorados ao longo do dia para avaliar a condição dos animais, disponibilidade de ração e de água, controle de temperatura e qualquer outra condição adversa. Animais encontrados mortos durante experimento foram retirados e pesados. Os pesos, a data e o boxe eram anotados regularmente para realização das correções do consumo de ração e da conversão alimentar ao final de cada fase experimental, segundo Sakamura & Rostagno(10).
2.2 Tratamentos experimentais
O estudo incluiu dois experimentos com os mesmos seis tratamentos divididos em esquema fatorial 2x3 (duas dietas e três níveis de fitase 500, 1000 e 1500 FTU): T1- Dieta fosfato bicálcico com 500 FTU; T2 – 1000 FTU; T3 – 1500 FTU; T4 – Dieta Farinha de Carne e ossos com 500 FTU; T5 – 1000 FTU e T6 – 1500 FTU. Foram utilizadas 10 repetições e 22 aves por unidade experimental (Tabela 1).
As dietas foram formuladas seguindo as recomendações de Rostagno et al.(11), considerando o desempenho de frangos de corte regular médio. As dietas, com milho e farelo de soja e milho e farelo de soja e farinha de carne e ossos tiveram a inclusão de 500 FTU de fitase (50g/t) levando em conta uma valorização de 0,15% de Fósforo disponível 0,15 de Cálcio e 50 kcal/kg de EM por parte da fitase. Nas Tabelas 1 e 2 estão a composição das rações experimentais.
2.3 Experimento de desempenho
No experimento de desempenho foram utilizados 1320 frangos de corte Cobb 500 machos de um dia de idade. As aves foram pesadas individualmente e distribuídos nos tratamentos para garantir que os animais tivessem pesos corporais médios semelhantes. Os animais foram manuseados em galpões de alvenaria de 3m de altura com telhas de fibrocimento. Os parâmetros de desempenho avaliados foram o consumo de ração (CR, g/ave), o ganho de peso (GP, g/ave), e conversão alimentar (CA, kg/kg) aos 21 e aos 42 dias de idade e a viabilidade (VIAB, %). A mortalidade foi registrada diariamente para posterior correção do consumo de ração de acordo com Sakomura e Rostagno(10). A ração e a água foram fornecidas à vontade durante todo o período experimental. A cama dos frangos consistia de serragem nova.
2.4 Experimento de metabolismo
No experimento de metabolismo 216 frangos de corte Cobb machos foram distribuidos a partir de um delineamento inteiramente casualizado com seis tratamentos e 6 repetições com 6 aves por unidade experimental, alojados em gaiolas contendo bandejas forradas com plástico para a coleta total das excretas, criados no período de 14 a 23 dias. Cada gaiola foi equipada com comedouro e bebedouro tipo Nipple, com ração e água ad libitum. As aves foram inicialmente alimentadas com ração comercial à base de milho e farelo de soja por 13 dias e posteriormente introduzidas nas rações experimentais.
As excretas totais foram coletadas para determinar a energia metabolizavel aparente (EMA) aparente corrigida para balanço de nitrogênio (EMAn). Após um período de adaptação de quatro dias (dias 14-18) as excretas foram coletadas duas vezes ao dia (às 8h e às 18h) por quatro dias consecutivos (dias 19-23). Ao final do período de coleta das excretas, as amostras foram descongeladas em temperatura ambiente e homogeneizadas, e as subamostras foram colocadas em recipientes plásticos e armazenadas em freezer a -18 ºC até a análise.
Excretas e amostras de ração foram secas a 55ºC em estufa de ventilação forçada por 72h. As amostras foram moídas em moinho com tela de 1mm. O teor de matéria seca (MS) foi determinado por secagem das amostras durante a noite em estufa de 105ºC(21). O método de Kajeldahl foi usado para determinar o teor de nitrogênio nas amostras de excretas e de ração de acordo com o protocolo padrão(21). O nitrogênio excretado (NE) foi calculado multiplicando-se a quantidade total excretada na MS pela porcentagem de nitrogênio nas excretas, também na MS. O mesmo método foi aplicado para o cálculo do nitrogênio consumido (NC).
A retenção de nitrogênio (NR) foi determinada como a quantidade de NC menos NE. O conteúdo bruto de energia foi medido com um adiabático C5001 bomba calorimétrica (IKA-Werke GmbH & Co.KG, Staufen, Alemanha). Os valores de EMAn foram calculados com base na análise de dietas e excretas de acordo com Sakomura e Rostagno(10).
2.5 Experimento de digetibilidade
Para a digestibilidade 252 frangos de corte machos Cobb 500 foram alojados em gaiolas e distribuidos em um delineamento inteiramente casualizado, com sete tratamentos, seis repetições e seis aves por unidade experimental. Para obter os coeficientes de digestibilidade ileal padronizada (CSIDs) de aminoácidos, utilizou-se uma dieta isenta de proteínas para determinar a excreção endógena de aminoácidos (Tabela 3). As aves receberam a dieta experimental dos 16 aos 20 dias de idade. Celite® (Celite Corp., Lompoc, CA, EUA), uma fonte de cinzas insolúveis em ácido (AIA), foi adicionada a todas as dietas a 10 g kg-1 como marcador indigestível, e as concentrações de AIA foram determinadas pelo método de Van Keulen e Young(12).
Após um período de adaptação de cinco dias, todas as aves foram mortas por deslocamento cervical e a cavidade abdominal foi aberta imediatamente para expor o trato digestivo. As aves tiveram a cavidade abdominal aberta para a retirada de todo o conteúdo intestinal que estiver a 40 cm da porção do íleo terminal, anterior à junção íleo-cecal.
As amostras ileais foram congeladas e armazenadas a -20ºC até o processamento. Em seguida, foram liofilizados por 72 h a -40ºC em um liofilizador (LH 0401, Terroni, São Carlos,Brasil).
Análise da matéria seca das dietas e digesta ileal foi realizada para cálculos de digestibilidade. A análise laboratorial para determinar o teor de aminoácidos das dietas e excretas foi realizado pelo CBO - Análises Laboratoriais (Campinas, São Paulo, Brasil) usando HPLC (cromatografia líquida de alta eficiência). A digestibilidade dos aminoácidos foi calculada com base na análise de dietas e digesta ileal de acordo com Sakomura e Rostagno(10).
2.6 Estatística
Todos os dados foram submetidos a análise de variância (ANOVA). Para estimar o efeito dos fatores em estudo (níveis e fontes), bem como suas interações, as médias foram comparadas pelo teste Tukey a 5% de significância. As análises foram realizadas pelo programa estatístico R v. 3.5.1(19).
3. Resultados
3.1 Experimento de desempenho
Os resultados de consumo de ração (CR), de peso médio final (PM), de ganho de peso (GP) e de conversão alimentar (CA) de um a 21 e um a 42 dias de idade encontram-se nas Tabelas 3 e 4, respectivamente.
Não houve efeito (P>0,05) significativo para o consumo de ração e conversão alimentar na fase de 1 a 21 dias de idade entre os tratamentos. Entretanto, foi observado efeito da interação fitase x dieta para peso médio final diário e ganho de peso (P<0,05). As aves que receberam dietas formuladas com farinha de carne e ossos apresentaram melhor peso médio e ganho de peso quando suplementadas com 1000 FTU de fitase comparadas ao nível de 1500.
Não houve interação (P>0,05) para as variáveis avaliadas, consumo de ração, ganho de peso médio, ganho de peso no desempenho dos animais de 1 a 42 dias de idade. Houve efeito signficativo entre as dietas para conversão alimentar.
3.2 Experimento de metabolismo
Não houve efeito (P>0,05) significativo dos níveis de inclusão da EM para os valores de energia metabolizável aparente e energia metabolizável aparente corrigida para balanço de nitrogênio, (Tabela 5).
Valores médios de energia metabolizável aparente (EMA) e energia metabolizável aparente corrigida por balanço de nitrogênio (EMAn).
3.3 Experimento de digestibilidade
Nas Tabelas 6 e 7 estão descritos os resultados da digestibilidade dos aminoácidos essenciais e não essenciais, metionina (Met), cistina (Cys), lisina (Lys), treonina (Thr), valina (Val), arginina (Arg), isoleucina (Ile), leucina (Leu), tirosina (Tyr), serina (Ser), prolina (Pro), fenilalanina (Phe), alanina (Ala), asparagina (Asp), glicina (Gly), histidina (His) e glutamina (Glu) a média do coeficiente de digestibilidade ileal aparente dos aminoácidos essenciais (CAE), não essenciais (CANE), aminoácidos totais (CAT), metionina + cistina (Met+Cist), fenilalanina + tirosina (Fen+Tir) e glicina + serina (Gli+Ser) das dietas experimentais.
Coeficientes de digestibilidade ileal aparente dos aminoácidos essenciais (CAE), não essenciais (CANE), aminoácidos totais (CAT), metionina + cistina (Met+Cist), fenilalanina + tirosina (Fen+Tir) e glicina + serina (Gli+Ser) das dietas experimentais.
Coeficientes de digestibilidade ileal estandardizada dos aminoácidos essenciais (CAE), não essenciais (CANE), aminoácidos totais (CAT), metionina + cistina (Met+Cist), fenilalanina + tirosina (Fen+Tir) e glicina + serina (Gli+Ser) das dietas experimentais.
Avaliando a digestibilidade ileal aparente e estandardizada dos aminoácidos essenciais e não essenciais sobre a inclusão de diferentes níveis de fitase e duas dietas, milho e farelo de soja e farinha de carne e ossos, observou-se uma maior digestibilidade dos aminoácidos quando os animais consumiram rações com milho e farelo de soja e fitase a 500 FTU e 1000 FTU/kg.
A suplementação de 500 e 1000 FTU/kg de fitase apresentaram os melhores resultados quando os animais consumiram milho e farelo de soja para CAE, CAT e gli+ser e para CANE e Fen+Tir o nível de 1500 FTU foi estatisticamente igual ao de 500 FTU/kg (Tabelas 6 e 7).
4. Discussão
4.1 Experimento de desempenho
A suplementação de fitase objetiva disponibilizar o fósforo contido nas moléculas de ácido fítico, possibilitando a redução de inclusão de ingredientes que contenham esse mineral. Não só a disponibilização de fósforo, mas também outros nutrientes, pois o ácido fítico possui carga eletronegativa que em condições intestinais (pH e temperatura) é capaz de reduzir a solubilidade e a digestibilidade do Ca, Fe, Zn e proteína, levando a cascatas deletérias(6).
Altas doses de fitase não proporcionaram resultados positivos no desempenho dos animais, diferindo de Walters et al.(7) que ao suplementarem altas doses de fitase (≥1.500 FTU / kg), obtiveram melhorias adicionais no desempenho dos animais ao comparar-se com as taxas de inclusão normalmente feitas. A utilização de uma superdose de fitase não demonstra efeitos negativos no desempenho de crescimento, utilização de nutrientes, mineralização óssea e índices plasmáticos de frangos de corte alimentados com dietas contendo o nível de 2.000 FTU/kg(13).
Apesar dos benefícios expostos em vários trabalhos relacionados a utilização da sobredosagem de fitase, é necessário estar atento a alguns fatores essenciais, como concentração de fitato, a energia e a densidade de aminoácidos, a idade dos animais e o equilíbrio dos íons da dieta(6). A concentração de fitato relaciona-se a quantidade de substrato que a dieta fornece para que a enzima possa atuar, assim altas doses de fitase podem não ser benéficas quando não existe substrato suficiente.
Liu et al.(14) observaram que os animais tiveram uma piora na conversão alimentar (CA) e ganho de peso ao consumir dietas com farinha de carne e ossos na fase inicial. No entanto, foi observado, na fase final, melhora de 4,4% na conversão alimentar.
Na fase de 1 a 21 dias de idade Meneghetti et al.(15), estudando a suplementação de superdoses de fitase (1.500 até 10.000 FTU/kg), não encontraram diferença para consumo de ração e ganho de peso, mas teve piora na conversão alimentar (CA) para aves alimentadas com os níveis de 1.500, 3.000 e 6.000FTU/kg de fitase, diferindo desse estudo que não encontrou diferença entre as variáveis ao suplementar superdoses. E na fase de 1 a 35 dias de idade encontrou uma melhora para a CA no nível de 1500 e 3.000FTU/kg, diferindo desse trabalho onde as dietas suplementadas com fitase não influenciaram nenhuma das variáveis estudadas na fase de 1 a 42 dias de idade.
Na fase de 1 a 42 dias a suplementação de dietas a base de farinha de carne e ossos contendo fitase não afetou as variáveis estudadas. A potencialização da atividade de enzimas exógenas se dá pelo uso de estratégias, como a redução dos nutrientes da dieta, retirada de fontes de fósforo da dieta(6), no entanto, neste estudo não houve ausência nos tratamentos de fontes de fósforo, até o tratamento três era fornecido o fosfato bicálcico e nas demais a farinha de carne e ossos que é fonte de fósforo, o que poderia explicar os resultados não benéficos da superdose de fitase. Supõe-se que a interação entre a proteína da dieta e o fitato ocorre principalmente no intestino a uma faixa de pH abaixo do ponto isoelétrico da proteína, além do pH, depende também da concentração de fitato e proteína no meio(6).
Os resultados deste estudo sugerem que, na fase de 1 a 42 dias de idade, a suplementação de dietas contendo farinha de carne e ossos com fitase não afetou significativamente as variáveis de desempenho. A presença de fontes de fósforo na dieta, como fosfato bicálcico e farinha de carne e ossos, pode ter influenciado os resultados, não favorecendo os benefícios da superdosagem de fitase. Portanto, é importante ajustar a dieta e considerar a interação entre fitato e proteínas, além de outros fatores dietéticos, para otimizar a eficácia da fitase e garantir um desempenho adequado dos animais.
4.2 Experimento de metabolismo
Meneghetti et al.(15) não encontraram diferença nos valores de EMAn com a suplementação de superdoses de fitase em dietas para frangos de corte, o que se assemelha aos resultados encontrados neste estudo. Assim também, Litz et al.(16), ao suplementarem dietas contendo fitase (50g /t) e farinha de carne e ossos, não encontraram diferença entre os tratamentos nos valores de energia metabolizável aparente e energia metabolizável aparente corrigida para balanço de nitrogênio, resultados que são corroborados por este estudo.
A suplementação com fitase, mesmo em altas doses, em dietas contendo farinha de carne e ossos, e milho e farelo de soja não mostrou impacto nos valores de energia metabolizável aparente e energia metabolizável aparente corrigida para balanço de nitrogênio. Esses achados sugerem que a eficácia da fitase em melhorar a energia disponível na dieta pode ser limitada em certos contextos dietéticos, indicando a necessidade de uma avaliação cuidadosa das condições específicas de cada dieta para otimizar o uso dessa enzima.
4.3 Experimento de digestibilidade
Na ausência de enzimas para degradação do fitato o mesmo pode se complexar a proteínas e formar o complexo fitato-proteína. Além das proteínas o mesmo também pode se ligar a outros substratos e enzimas, ocasionando uma diminuição na ação dessas, bem como redução da digestão das proteínas e aumento das perdas endógenas de aminoácidos, e a utilização da enzima fitase consegue amenizar esses efeitos prejudiciais do fitato(17).
Superdoses de fitase não promoveram melhora do desempenho e digestibilidade dos nutrientes. Quando eficazes as superdoses possibilitam a redução de aminoácidos na dieta, levando a uma valorização dos nutrientes do milho e da soja, bem como maior digestibilidade e redução das perdas endógenas(18). A suplementação de fitase proporciona uma maior digestibilidade dos aminoácidos, o que pode estar ligada aos benefícios da ruptura do fitato e consequente liberação de nutrientes, ou também, em função de menores perdas de aminoácidos endógenos(7). Resultados semelhantes foram encontrados por Cowieson et al.(20) no qual, o aumento da concentração de inclusão acima de 1000 FYT/kg não resultou em alterações adicionais na digestibilidade dos aminoácidos, tanto essenciais quanto não essenciais.
Em estudo realizado por Liu et al.(14) avaliando dietas contendo farinha de carne e ossos e fitase observaram que, a digestibilidade ileal da maioria dos aminoácidos não foi afetada pela adição de fitase. No entanto, a glicina que teve maior digestibilidade em dietas com adição de fitase e 60g/kg de farinha de carne e ossos. De forma oposta, neste estudo, embora tenha havido suplementação de fitase, a digestibilidade dos aminoácidos essenciais e não essenciais foram menores com a utilização da farinha de carne e ossos, quando comparado a dietas convencionais.
A ausência de enzimas específicas para a degradação do fitato resulta na formação de complexos fitato-proteína, além de se ligar a outros substratos e enzimas, prejudicando a digestão das proteínas e aumentando as perdas endógenas de aminoácidos. A utilização de fitase é eficaz em mitigar esses efeitos negativos, melhorando a digestibilidade dos aminoácidos devido à quebra do fitato e à liberação de nutrientes. No entanto, doses excessivas de fitase não apresentam melhorias adicionais no desempenho e na digestibilidade dos nutrientes, embora possam reduzir a necessidade de aminoácidos na dieta e valorizar os nutrientes presentes no milho e na soja. Estudos indicam que a inclusão de fitase em dietas contendo farinha de carne e ossos pode não melhorar a digestibilidade de todos os aminoácidos, destacando a variabilidade dos efeitos da fitase dependendo da composição da dieta. Assim, a suplementação de fitase deve ser cuidadosamente ajustada para maximizar seus benefícios na nutrição animal.
5. Conclusão
Altas doses de fitase não promoveram melhora no desempenho e digestibilidade dos nutrientes, bem como nos valores de EMAn, com isso, sugere-se a suplementação de fitase a 500 FTU/kg. Dietas baseadas em milho e farelo de soja são mais eficientes em termos de digestibilidade de aminoácidos, tanto essenciais quanto não essenciais, especialmente quando suplementadas com fitase.
Agradecimentos
Este estudo foi realizado com o apoio da Coordenação de Aperfeiçoamento de Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CnpQ).
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Datas de Publicação
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Publicação nesta coleção
04 Nov 2024 -
Data do Fascículo
2024
Histórico
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Recebido
11 Mar 2024 -
Aceito
05 Jun 2024 -
Publicado
03 Set 2024