O ciclo estral modula a hiperalgesia muscular inflamatória aguda e persistente em fêmeas sedentárias, mas não exercitadas

RESUMO

JUSTIFICATIVA E OBJETIVOS  Dor persistente é um problema de saúde pública que impacta significativamente a qualidade de vida. Mulheres relatam sentir dores persistentes com maior intensidade e frequência do que homens, o que é atribuído às flutuações dos hormônios sexuais. Neste estudo, investigou-se a influência do ciclo estral no desenvolvimento e manutenção da hiperalgesia muscular inflamatória aguda e persistente em fêmeas sedentárias e exercitadas.

MÉTODOS  A hiperalgesia muscular mecânica foi avaliada em camundongos fêmeas, da linhagem Swiss, submetidos ao modelo de hiperalgesia muscular inflamatória aguda e persistente, durante as quatro fases do ciclo estral (proestro, estro, metaestro ou diestro). O exercício foi realizado através da natação previamente à indução da hiperalgesia muscular.

RESULTADOS  Quando o estímulo inflamatório da carragenina ocorre na fase proestro, desencadeia-se a hiperalgesia muscular aguda de maior intensidade. Por outro lado, durante a fase estro, o estímulo inflamatório desencadeia a hiperalgesia muscular persistente de maior intensidade. A duração da hiperalgesia muscular persistente não é modulada pelos ciclos estrais. Exercícios de natação regulares preveniram a hiperalgesia muscular aguda e persistente independentemente do ciclo estral.

CONCLUSÃO  A fase do ciclo estral em que ocorreu o estímulo inflamatório é determinante para o desenvolvimento da hiperalgesia muscular aguda e sua transição para a fase persistente. Esse efeito foi observado em fêmeas sedentárias, mas não em exercitadas, sugerindo que a atividade física regular pode promover benefícios analgésicos independentemente da fase do ciclo estral ou das flutuações hormonais associadas. Pesquisas adicionais são necessárias para elucidar os mecanismos subjacentes ao desenvolvimento da hiperalgesia muscular inflamatória em fêmeas.

Descritores:
Camundongos fêmeas; Ciclo estral; Exercício físico; Hiperalgesia persistente; Músculo

DESTAQUES

O ciclo estral, no qual ocorreu o estímulo inflamatório, foi determinante para o desenvolvimento da hiperalgesia muscular inflamatória aguda e persistente

O estímulo inflamatório no músculo esquelético durante a fase proestro provocou a hiperalgesia muscular aguda mais intensa

O estímulo inflamatório no músculo esquelético durante a fase estro provocou a hiperalgesia muscular persistente mais elevada

A prática regular de natação preveniu a hiperalgesia muscular aguda e persistente, independentemente da fase do ciclo estral

ABSTRACT

BACKGROUND AND OBJECTIVES  Persistent pain is a significant public health issue, profoundly impacting quality of life. Women experience persistent pain more frequently and with greater intensity than men, which is attributed to sexual hormonal fluctuations. This study investigated the influence of the estrous cycle on the development and maintenance of acute and persistent inflammatory muscle hyperalgesia in sedentary and exercised female mice.

METHODS  The study analyzed mechanical muscle hyperalgesia in female Swiss mice that underwent a model of acute and persistent inflammatory muscle hyperalgesia, during each of the four estrous cycle phases (proestrus, estrus, metestrus or diestrus). Swimming exercises were performed before the induction of acute and persistent inflammatory muscle hyperalgesia.

RESULTS  The inflammatory stimulus of carrageenan during the proestrus phase induced the most intense acute muscle hyperalgesia. Conversely, in the estrus phase, the inflammatory stimulus induced the most intense persistent muscle hyperalgesia. The maintenance of persistent muscle hyperalgesia was not modulated by estrous cycle. Regular swimming exercise prevented the acute and persistent muscle hyperalgesia, regardless of the estrous cycle.

CONCLUSION  These findings suggest that the estrous cycle phase during which an inflammatory insult occurs is critical for the development of acute inflammatory muscle hyperalgesia and its transition to the persistent phase. This effect was observed in sedentary, but not in exercised female mice, suggesting that regular physical activity may provide analgesic benefits regardless estrous cycle phase or the associated fluctuations in gender hormones. Further research is necessary to elucidate the mechanisms underlying the development of inflammatory muscle pain in females.

Keywords:
Estrous cycle; Female mice; Persistent hyperalgesia; Physical exercise; Muscle

HIGHLIGHTS

The estrous cycle, in which an inflammatory insult occurred, was determinant in the development of acute and persistent inflammatory muscle hyperalgesia

The inflammatory insult to the musculoskeletal muscle during the proestrus phase triggered the highest acute muscle hyperalgesia

The inflammatory insult to the musculoskeletal muscle during the estrus phase triggered the highest persistent muscle hyperalgesia

Regular swimming exercise prevented the acute and persistent muscle hyperalgesia, regardless of the estrous cycle phase

INTRODUÇÃO

A dor crônica é um problema de saúde global significativo, com alto impacto socioeconômico, afetando milhões de pessoas em todo o mundo¹-³. É mais comum em mulheres, geralmente aumenta após a puberdade e flutua durante a menopausa⁴-⁶. Como exemplo, a prevalência de dor nas costas, dor de cabeça, dor de estômago e dor nas articulações temporomandibulares aumenta durante o desenvolvimento da puberdade em meninas⁷,⁸ e dor musculoesquelética, dores de cabeça ou enxaquecas e dor vulvovaginal têm alta incidência no período da menopausa⁶. Isso sugere fortemente que os hormônios ovarianos têm uma influência significativa na sensibilidade à dor.

Embora o impacto dos hormônios ovarianos na sensibilidade a várias condições dolorosas seja claro, seu papel é notavelmente complexo. Os dois hormônios ovarianos mais importantes são o estrogênio e a progesterona. Vários estudos demonstram que as flutuações nos níveis de estrogênio afetam significativamente a percepção da dor. Essas mudanças hormonais levam ao aumento da dor, enquanto níveis hormonais estáveis oferecem um mecanismo de proteção contra a nocicepção nas mulheres⁹-¹². A progesterona, por outro lado, parece ter um efeito que reduz a dor¹³-¹⁵. Apesar dessa complexidade, a maioria dos estudos pré-clínicos é realizada em indivíduos do sexo masculino, o que pode levar a estratégias ineficientes para controlar a dor crônica em mulheres.

A prática regular de exercícios físicos é uma estratégia bem conhecida para reduzir muitas condições de dor crônica¹⁶-¹⁸. Além disso, indivíduos fisicamente inativos são mais propensos a desenvolver dor crônica ao longo da vida¹⁹-²¹. Foi demonstrado recentemente que a prática regular de natação previne a hiperalgesia muscular inflamatória aguda e persistente em camundongos machos por um mecanismo dependente de macrófagos²². No entanto, pouco se sabe sobre o efeito preventivo do exercício na transição para a hiperalgesia muscular crônica em camundongos fêmeas.

Dadas as implicações significativas das diferenças relacionadas ao sexo no processamento da dor, este estudo investigou a influência das fases do ciclo estral no desenvolvimento e manutenção da hiperalgesia muscular inflamatória aguda e persistente em camundongos fêmeas. Para isso, foi utilizado um modelo de hiperalgesia muscular inflamatória aguda e persistente para analisar as respostas nociceptivas comportamentais em cada uma das quatro fases do ciclo estral em dois grupos de camundongos fêmeas: sedentárias e não sedentárias.

MÉTODOS

Ética e desenho do estudo

Foram utilizados 100 camundongos fêmeas Swiss (Mus musculus) com 60 dias de idade, fornecidos pelo Centro de Pesquisas Multidisciplinares em Biologia (CEMIB) da UNICAMP. O procedimento experimental foi aprovado pelo Comitê de Ética no Uso de Animais da mesma instituição (CEUA-UNICAMP, protocolo nº 5234-1/2019), seguindo as diretrizes do Conselho Nacional de Controle de Experimentação Animal (CONCEA, Brasil) e da Lei Federal Brasileira nº 11.794/2008 (Lei Arouca) e do Comitê de Ética da Associação Internacional para o Estudo da Dor em Animais Conscientes. Os animais foram mantidos em gaiolas de plástico (cinco por gaiola) contendo maravalha e tubos de plástico, sob ciclos claro/escuro de 12 horas (luz acesa às 6 h da manhã) com água e comida à vontade, exceto durante injeções musculares, sessões de exercícios e testes de hiperalgesia muscular mecânica. As sessões experimentais foram realizadas durante a fase clara, a partir das 7 h, em uma sala silenciosa com temperatura controlada (±23 °C). O pesquisador responsável pela designação dos animais aos grupos estava ciente das alocações dos grupos. Todos os experimentos comportamentais foram realizados com mulheres que não tinham conhecimento das alocações dos grupos. Após o período de testes comportamentais, todos os animais foram sacrificados, seguindo o protocolo ético aprovado.

Este estudo foi planejado com base em experimentos já publicados. Um protocolo detalhado, incluindo a questão de pesquisa, as principais características do projeto e o plano de análise, foi preparado antes do estudo.

Determinação da fase do ciclo estral

O ciclo estral foi determinado indiretamente utilizando o método não invasivo de lavagem vaginal. Inicialmente, para verificar se as fêmeas estavam com ciclos regulares, os autores analisaram o ciclo estral quatro dias antes da injeção de carragenina ou do exercício. Esse procedimento foi sempre realizado às 7h30 da manhã. As células vaginais foram lavadas com a introdução de 15 µL de solução salina por meio de uma pipeta e algumas gotas da suspensão celular foram colocadas em uma lâmina de vidro para exame microscópico. A análise visual das células foi usada para determinar o ciclo estral da seguinte forma: proestro (predominância de células epiteliais nucleadas), estro (predominância de células cornificadas), metaestro (predominância de leucócitos e presença de algumas células cornificadas) e diestro (predominância de leucócitos)²³. As fêmeas foram selecionadas para cada experimento com base no estágio do ciclo estral. Fatores que poderiam confundir os resultados foram controlados: as fêmeas foram agrupadas por fase do ciclo estral e alojadas em gaiolas separadas durante cada experimento.

O modelo de hiperalgesia muscular inflamatória aguda e persistente

Neste estudo, foi utilizado um modelo de hiperalgesia muscular inflamatória persistente²⁴, padronizado em camundongos²²,²⁵. Imediatamente após determinar o ciclo estral, λ-carragenina (Cg, 100 µg/músculo) foi injetada no ventre do músculo gastrocnêmio para induzir a hiperalgesia muscular inflamatória aguda. Após 10 dias, quando o limiar nociceptivo estava nos níveis basais, Prostaglandina E₂ (PGE₂; 1 µg/músculo) foi injetada no mesmo local para desencadear a hiperalgesia muscular persistente. A medição do limiar hiperalgésico foi realizada nos seguintes momentos (Figura 1): 1) Imediatamente antes da injeção muscular (basal); 2) após 1 h, 3 h e 6 h da injeção no dia 0; 3) diariamente até o 10º dia; 4) imediatamente antes da injeção de PGE₂ (10º dia); 5) após 1 h e 4 h da injeção de PGE₂ (10º dia); 6) nos dias 11, 12 e 17²²,²⁵. Nos grupos controle, foi administrada solução salina isotônica (NaCl a 0,9%) em vez de carragenina. O exercício de natação foi realizado antes da primeira injeção, e o ciclo estral foi determinado antes da administração de carragenina ou PGE₂ (Figura 1). Todos os animais designados para cada grupo experimental foram incluídos na análise.

Figura 1
Procedimentos experimentais no modelo de hiperalgesia muscular persistente. A carragenina (Cg) ou solução salina (Sal) foi administrada no músculo gastrocnêmio. O teste comportamental foi aplicado do dia 0 ao dia 6 após a injeção. No décimo dia, PGE₂ foi administrada e o teste comportamental foi aplicado nos dias 10, 11, 12 e 17. A análise do ciclo estral foi determinada antes da injeção de Cg ou PGE₂. Os procedimentos de exercícios de natação (quadrado cinza) foram realizados antes das injeções de Cg/Sal, com um intervalo de 48 horas antes do teste comportamental de linha de base no dia 0. Adaptado de um estudo de referência de 2021²².

Teste mecânico do limiar nociceptivo muscular

O limiar nociceptivo mecânico muscular foi avaliado por meio do algesímetro digital Randall-Selitto (Insight, Brasil)²²,²⁵. O dispositivo aplica pressão mecânica linear ao músculo gastrocnêmio através de uma ponta arredondada com 2 mm para evocar o limiar nociceptivo dos tecidos profundos²⁶. Três medições, em intervalos de 5 minutos cada, foram realizadas para obter o limiar nociceptivo²²,²⁵. Os níveis basais foram medidos dois dias após o término do período de exercício físico ou equivalente no grupo sedentário²². A hiperalgesia muscular mecânica foi calculada como a diferença (em gramas) entre a medição basal e os valores obtidos em cada ponto temporal após as injeções de carragenina (ou solução salina) e PGE₂. A hiperalgesia muscular mecânica foi representada no eixo y por valores crescentes²²,²⁵,²⁷.

Injeção intramuscular, fármacos e doses

Os fármacos ou seus veículos foram injetados no músculo gastrocnêmio dos camundongos usando uma agulha de calibre 30²⁸, conectada a um cateter de polietileno e uma seringa Hamilton (50 μL). O volume final foi de 20 μL. Foram utilizados os seguintes fármacos: λ – carragenina (100 μg/músculo) e prostaglandina E₂ (PGE₂, 1 μg/músculo)²²,²⁴,²⁵. Todos os fármacos foram adquiridos da Sigma-Aldrich (St. Louis, MO, EUA) e dissolvidos em solução salina isotônica (NaCl a 0,9%) para obter a solução de trabalho. A solução estoque de PGE₂ foi dissolvida em etanol, de acordo com a ficha técnica, e suspensa novamente em solução salina.

Protocolo de exercícios de natação

A natação foi realizada como exercício físico regular. A temperatura da água foi mantida em 31±1 ºC e todos os procedimentos foram realizados em tanques cilíndricos individuais com superfície lisa²²,²⁹. Para minimizar o estresse, os camundongos foram adaptados progressivamente ao ambiente líquido, com aumento progressivo na profundidade da água, durante 6 dias²²,³⁰. Antes de iniciar o protocolo de exercícios de natação, os animais permaneceram em repouso por 24 horas. O protocolo de natação foi realizado durante 15 dias, divididos em três períodos de 5 dias cada, com sessões diárias de 50 minutos. Para permitir a adaptação fisiológica e minimizar o risco de fadiga ou lesões, foi utilizado um protocolo com aumento progressivo da intensidade²³. No primeiro período, os camundongos realizaram sessões de natação com pausas passivas de 4 minutos. No segundo período, foram utilizadas sessões intervaladas com pausas de 3 minutos e, no último período, os camundongos nadaram 50 minutos sem pausas. Os camundongos foram retirados da água quando foram observados movimentos inadequados, como flutuar, escalar, mergulhar e balançar³¹. Os grupos sedentários foram mantidos em tanques individuais com água rasa por 10 minutos²². Todos os animais de cada grupo experimental foram considerados na análise.

Medição dos níveis séricos de corticosterona

Antes da coleta de sangue, os animais foram habituados por 1 h em uma sala silenciosa. A coleta de sangue foi realizada sem anestesia ou contenção. As amostras de sangue foram coletadas 24 h antes do início do exercício (linha de base) e 24 h após o término do protocolo de exercício²². Foi feito um pequeno corte na extremidade distal da cauda do animal e 25 μL de sangue foram coletados usando capilares de vidro não heparinizados. Após 30 minutos, as amostras foram centrifugadas e o sobrenadante foi coletado e armazenado a -20 °C até a análise. A corticosterona foi medida usando o teste Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay (ELISA), de acordo com as instruções do fabricante (Kit DetectX - Arbor Assays).

Análise estatística

De acordo com o teste de Kolmogorov-Smirnov, todos os dados seguiram uma distribuição gaussiana normal e permitiram a aplicação de testes paramétricos. Os dados quantitativos foram analisados de acordo com a ANOVA unidirecional, ANOVA bidirecional, análise de efeitos mistos ou teste t de Student (não pareado). Após a ANOVA unidirecional e bidirecional, foram realizados contrastes post hoc utilizando o teste de Tukey. A análise da área sob a curva (AUC) foi realizada para experimentos comportamentais para avaliar os efeitos gerais das intervenções na hiperalgesia aguda e persistente. A AUC do período agudo foi considerada do dia 0 ao dia 4 após a injeção de carragenina (AUC Δ, g × 4 dias) e a AUC do período persistente foi considerada do dia 10 ao 17 (AUC Δ, g × 10–17 dias). O tamanho da amostra para variáveis contínuas foi calculado com base no desvio padrão populacional estimado e na diferença média esperada entre os grupos, usando a fórmula “n=1+[2C*(s/d)²]”, em que “C=(zα+zβ) ²”. Os parâmetros foram definidos como α=0,05 (bilateral), potência = 80%, s=0,2 e d=0,5³². Os valores finais estão apresentados nas legendas das figuras. Estes valores são expressos como médias ± erro padrão da média (SEM). Todos os dados foram analisados pelo software GraphPad Prism 7.0. A ferramenta de cálculo de valores atípicos do site da GraphPad foi aplicada a cada grupo. Para todos os testes, a significância foi definida como p<0,05.

RESULTADOS

Inicialmente, foi analisado o desenvolvimento de hiperalgesia muscular inflamatória aguda e persistente em camundongos fêmeas, independentemente do seu ciclo estral. A administração de carragenina no músculo gastrocnêmio induziu hiperalgesia muscular aguda (n = 20, p < 0,05, ANOVA bidirecional, pós-teste de Tukey, Figura 2A, AUC, teste t de Student, Figura 2B) quando comparada ao grupo controle com solução salina (n = 20). A administração de PGE₂ no músculo gastrocnêmio previamente sensibilizado pela carragenina mostrou hiperalgesia muscular persistente (n = 20, p < 0,05, ANOVA bidirecional, pós-teste de Tukey, Figura 2A; AUC, teste t de Student, Figura 2C) na comparação com o grupo controle com solução salina (n = 20).

Figura 2
Dimorfismo sexual na hiperalgesia muscular inflamatória aguda e persistente. (A) Respostas nociceptivas comportamentais em diferentes momentos. AUC da hiperalgesia muscular aguda (B) e persistente (C). O símbolo “*” indica diferenças para o grupo controle com solução salina.

Para investigar a influência do ciclo estral no desenvolvimento de hiperalgesia muscular inflamatória aguda e persistente, administramos carragenina em cada uma das quatro fases do ciclo (proestro, estro, metaestro ou diestro). A fase do ciclo estral em que a PGE₂ foi injetada não foi considerada. Quando a carragenina foi injetada durante as fases proestro (n = 5), estro (n = 5), metaestro (n = 5) ou diestro (n = 5), houve desenvolvimento de hiperalgesia muscular aguda e persistente quando comparada aos respectivos grupos controle com solução salina (p < 0,05, teste de análise de efeitos mistos, pós-teste de Tukey, Figura 3A; AUC, ANOVA unidirecional, pós-teste de Tukey, Figura 3B).

Figura 3
O ciclo estral modula tanto a hiperalgesia muscular aguda quanto a persistente. (A) Respostas nociceptivas comportamentais nas fases proestro, estro, metaestro e diestro. AUC da hiperalgesia muscular aguda (B) e persistente (C). O símbolo “*” indica diferenças para seus respectivos grupos controle com solução salina, “x” indica diferenças para outros grupos na fase aguda ou persistente.

Uma comparação entre as diferentes fases do ciclo estral revelou que a injeção de carragenina durante a fase de proestro provocou uma hiperalgesia muscular aguda mais intensa do que a observada nas outras fases (p<0,05, teste de análise de efeitos mistos, pós-teste de Tukey, Figura 3A; AUC, ANOVA unidirecional, pós-teste de Tukey, Figura 3C). Além disso, a injeção de carragenina durante a fase de estro provocou uma hiperalgesia muscular persistente mais intensa do que a observada nas outras fases (p < 0,05, análise de efeitos mistos, pós-teste de Tukey, Figura 3A; AUC, ANOVA unidirecional, pós-teste de Tukey, Figura 3C).

A fase do ciclo estral no momento da injeção de PGE₂ não modulou a manutenção da hiperalgesia muscular persistente

Foi realizada uma análise para determinar se a fase do ciclo estral, no momento da injeção de PGE₂ em camundongos previamente sensibilizados por carragenina, modulava a manutenção da hiperalgesia muscular persistente. Foi observado que a manutenção dessa fase não foi diferente entre as fases do ciclo estral (n=5, p>0,05, Análise de efeitos mistos, Figura 4A; AUC, ANOVA unidirecional, Figura 4B).

Figura 4
O ciclo estral não modulou a hiperalgesia muscular persistente. (A) Respostas nociceptivas comportamentais nas fases proestro, estro, metaestro e diestro. (B) AUC da hiperalgesia muscular persistente. O símbolo “*” indica diferenças em relação aos respectivos grupos controle com solução salina.

O ciclo estral não modulou a hiperalgesia muscular aguda e persistente prevenida pelo exercício físico regular

Foi demonstrado anteriormente que a prática regular de exercício físico através da natação previne a hiperalgesia muscular inflamatória aguda e persistente em camundongos machos²². Assim, foi realizada uma análise para determinar se o ciclo estral modulava essa prevenção em camundongos fêmeas. Primeiro, foi observado que a natação era eficaz na prevenção da hiperalgesia muscular aguda e persistente em fêmeas (n=20, p<0,05, Análise de efeitos mistos, pós-teste de Tukey, Figura 5A; AUC, ANOVA unidirecional, pós-teste de Tukey, Figura 5A). Quando as fases do ciclo estral foram comparadas, não houve diferenças nas respostas comportamentais (n=5, p>0,05, Análise de efeitos mistos, Figura 5B; AUC, ANOVA unidirecional, Figura 5B).

Figura 5
A prevenção da hiperalgesia muscular aguda e persistente induzida pelo exercício físico é independente do ciclo estral. Respostas nociceptivas comportamentais independentes do ciclo estral. (A) e em diferentes fases do ciclo estral (B). Análise dos níveis de corticosterona (C). O símbolo “*” indica diferenças em relação aos respectivos grupos controle com solução salina e “°” indica diferenças em relação ao grupo sedentário Cg/PGE₂.

Para analisar se o estresse modulou a prevenção da hiperalgesia muscular induzida pelo exercício, os níveis plasmáticos de corticosterona antes do início e 24 horas após o término do protocolo de natação foram analisados. Não houve aumento nos níveis plasmáticos de corticosterona em camundongos fêmeas exercitadas (n = 16, p > 0,05, ANOVA de duas vias, Figura 5C).

DISCUSSÃO

O estudo demonstrou que o ciclo estral, no qual ocorreu o estímulo inflamatório, é determinante para o desenvolvimento da hiperalgesia muscular inflamatória aguda e para a consequente transição para o estágio persistente, mas não para sua manutenção. Além disso, em animais previamente exercitados, o ciclo estral, no qual ocorreu o estímulo inflamatório, não modulou a prevenção da hiperalgesia muscular pelo exercício.

O estudo mostrou que a injeção intramuscular de carragenina no músculo gastrocnêmio de camundongos fêmeas induziu hiperalgesia muscular inflamatória aguda e persistente em todas as fases do ciclo estral. Curiosamente, a estimulação inflamatória afetou de maneira diferenciada a intensidade da hiperalgesia muscular aguda e persistente nas várias fases do ciclo estral. Especificamente, na fase proestro, a carragenina induziu a hiperalgesia muscular inflamatória aguda mais intensa, enquanto na fase estro, a hiperalgesia muscular persistente mais intensa. Esses dados destacam o impacto do ciclo estral no resultado da hiperalgesia muscular aguda e persistente desencadeada por uma lesão inflamatório.

Normalmente, as mulheres ou os roedores fêmeas apresentam mais dor do que os homens em vários modelos de dor, incluindo dor induzida por fatores mecânicos, elétricos, térmicos e químicos³³. Além disso, as mulheres são mais propensas do que os homens a relatar diferentes condições de dor³⁴,³⁵. Essa evidência é, em parte, atribuída às flutuações dos hormonios sexuais³⁶-⁴⁰.

O estrogênio⁴¹ e a progesterona são hormônios esteroides secretados pelos ovários, que desempenham papéis importantes em vários tecidos⁴², como no metabolismo do sistema musculoesquelético⁴³-⁴⁵. Embora exista um número robusto de estudos pré-clínicos e clínicos sobre o papel dos hormônios sexuais na dor, os resultados ainda não são claros. Parece haver diferenças na influência dos hormônios femininos com base no estímulo que desencadeou a condição de dor⁴³,⁴⁶-⁵⁰. No entanto, um consenso na literatura sugere uma influência significativa das flutuações do estrogênio na sensibilidade à dor. Especificamente, variações nos níveis hormonais estão associadas a um aumento na sensibilidade à dor, enquanto perfis hormonais estáveis parecem conferir um efeito protetor contra a nocicepção em mulheres³⁶-⁴⁰. A progesterona também demonstrou estar envolvida no processamento da dor, mostrando um papel protetor contra a dor³⁹. Curiosamente, um modelo clínico de dor mostrou que o aumento da dor associado a níveis elevados de progesterona foi reduzido pelo aumento dos níveis de estradiol, sugerindo uma interação entre ambos os hormônios na percepção da dor⁵¹.

É sabido que, em camundongos fêmeas, os níveis de estradiol começam a aumentar na fase metaestro, atingindo níveis máximos durante proestro e retornando aos valores basais em estro. A secreção de progesterona também aumenta durante a fase metaestro e diestro, com uma diminuição posterior. Em seguida, os níveis de progesterona sobem para atingir seu segundo pico no final de proestro⁵²,⁵³. Considerando tais oscilações, é possível levantar a hipótese de que os níveis mais elevados de progesterona e os níveis mais baixos de estradiol no final da fase proestro podem estar relacionados à hiperalgesia muscular aguda mais elevada induzida pelo estímulo inflamatório na fase proestro. Por outro lado, os níveis mais baixos de estrogênios e progesterona podem ter contribuído para a hiperalgesia muscular persistente mais elevada induzida pelo estímulo inflamatório na fase estro. Finalmente, o papel protetor dos níveis crescentes de estrogênios e progesterona pode ter contribuído para a menor intensidade da hiperalgesia muscular persistente induzida pelo estímulo inflamatório nas fases proestro e metaestro, respectivamente. Os mecanismos subjacentes ao papel protetor do estrogênio na hiperalgesia muscular inflamatória ainda estão sendo investigados. No entanto, as evidências mostram que os estrogênios regulam negativamente as citocinas pró-inflamatórias⁵⁴-⁵⁷, interagem com os sistemas adrenérgico e serotoninérgico⁵⁸ e inibem a sinalização do NFkappaB⁵⁹.

Foi demonstrado anteriormente que a natação regular previne o desenvolvimento da hiperalgesia muscular inflamatória aguda e sua transição para o estágio persistente em camundongos machos. O presente estudo demonstrou que as fêmeas exibem respostas comportamentais semelhantes induzidas pelo exercício. Curiosamente, a fase do ciclo estral durante o estímulo inflamatório não afetou a prevenção da hiperalgesia muscular aguda ou persistente induzida pelo exercício. O exercício físico regular de baixa ou moderada intensidade modula os sistemas neuroimunológicos periféricos e centrais relacionados às vias de sinalização da dor⁶⁰. Assim, eles são estratégias não farmacológicas eficientes para o tratamento e a prevenção de condições dolorosas crônicas⁶¹,⁶². Embora não tenham sido avaliados os mecanismos subjacentes à prevenção da hiperalgesia muscular aguda e persistente em camundongos fêmeas, foi demonstrado que o protocolo de exercícios também é eficaz em fêmeas, independentemente da fase do ciclo estral.

Uma limitação deste estudo é que os hormônios sexuais não foram medidos diretamente; em vez disso, as fases do ciclo estral foram determinadas usando o método não invasivo de lavagem vaginal. Embora a técnica não forneça níveis hormonais exatos, ela é amplamente utilizada e confiável para identificar os estágios do ciclo. Assim, as interpretações sobre as influências hormonais do estudo foram baseadas em evidências indiretas.

CONCLUSÃO

Foi demonstrado que a fase do ciclo estral durante a qual ocorre um estímulo inflamatório é crítica para o desenvolvimento da hiperalgesia muscular inflamatória aguda e sua transição para a fase persistente. Portanto, elas devem ser levadas em consideração no manejo clínico dessas condições. Embora se saiba que alterações nos hormônios sexuais ao longo do ciclo influenciam a sensibilidade à dor, as descobertas deste estudo sugerem que intervenções com exercícios bem planejadas podem prevenir eficazmente a progressão da dor muscular aguda para a crônica. Essas descobertas ressaltam o potencial da integração de programas de exercícios individualizados nas estratégias de controle da dor para mulheres, sugerindo que a atividade física regular pode resultar em benefícios analgésicos, independentemente da fase do ciclo menstrual ou das flutuações associadas aos hormônios sexuais.

• Fontes de fomento:
  FAPESP: Processos 2017/17919-8 e 2021/02921-2. CNPQ: 306413/2022-1 Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - Brasil (CAPES): Grant 001.
• Disponibilidade de dados
  Os dados que apoiam as descobertas deste estudo estão disponíveis com o autor correspondente mediante solicitação razoável.

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Editado por

• Editor associado responsável:
  Camila Squarzoni Dale https://orcid.org/0000-0002-3421-7799

Disponibilidade de dados

Os dados que apoiam as descobertas deste estudo estão disponíveis com o autor correspondente mediante solicitação razoável.

Datas de Publicação

• Publicação nesta coleção
  09 Jan 2026
• Data do Fascículo
  2025

Histórico

• Recebido
  15 Jul 2025
• Aceito
  30 Ago 2025